王鹏飞
- 作品数：30 被引量：158H指数：7
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金陕西省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 泌尿生殖系统肿瘤无限细胞系的建立被引量：7
- 2000年
- 目的 建立人泌尿系肿瘤无限细胞系 ,为泌尿系肿瘤的基础研究提供实验模型 .方法 无菌取下肿瘤手术标本 ,分别采用组织块直接培养法 ,细胞悬液法 ,裸鼠肿瘤移植模型法进行细胞原代培养 .裸鼠皮下肿瘤块发生明显增殖并长到一定程度后 ,再行裸鼠体内传代两次 ,最后取下 F3代组织块进行原代培养 .培养细胞传代超过 2 0代后按建系标准进行检测 .结果 共取 43例标本 ,其中 38例行组织块直接培养 ,18例 F1代培养成功 ,5例 F3代培养成功 ,最长培养时间为 1.3mo;16例行细胞悬液培养 ,10例 F1代培养成功 ,6例 F3代培养成功 ,最长培养时间为 2 .3mo;40例行裸鼠皮下包埋 ,裸鼠体内传代 F1代成功 6例 ,F3代成功 3例 ,该 3例标本行原代培养后建成 3个无限细胞系 :人肾透明细胞癌 RCC- 986 3,人膀胱癌 BC- 6 ,人前列腺癌 PC- 9810 6 .全部细胞传代 1a以上 ,生长稳定 ,传代周期固定 ,其形态结构 ,分化程度与原发瘤保持一致 ,且遗传学特性包括染色体形态仍为人类核型 .结论 与组织块直接培养法和细胞悬液法相比 。
- 王鹏飞邵国兴师长宏邵晨王中琨严泉剑
- 关键词：泌尿生殖系统肿瘤
- 尿中粒酶B和穿孔素mRNA水平在移植肾功能延迟恢复诊断中的作用
- 目的探讨尿中穿孔素mRNA、粒酶B mRNA在移植肾功能延迟恢复诊断中的临床应用价值。方法研究对象为12例同种异体肾移植肾功能延迟恢复患者,均行彩色多普勒和移植肾活检。于术后留取12例患者34份尿样,应用竞争PCR方法对...
- 张波王禾张更杨建林武国军杨晓剑李欣王鹏飞秦卫军付振虹袁建林秦荣良陈宝琦
- 关键词：肾移植肾功能延迟恢复穿孔素信使核糖核酸
- 文献传递
- 利用裸鼠建立人前列腺肿瘤原位移植模型被引量：7
- 2002年
- 目的 应用前列腺梭形细胞瘤细胞系PC 981 0 6建立人前列腺肿瘤原位移植模型 ,观察肿瘤局部浸润和远处转移情况。方法 8只裸鼠取下腹部切口 ,显露膀胱和前列腺 ,将PC 981 0 6细胞悬液 0 .2～ 0 .4ml注射于前列腺后叶包膜下。观察裸鼠生命体征的变化 ,取原位肿瘤、膀胱、盆腔淋巴结、肺脏、肝脏、脾脏标本福马林液固定 48h ,苏木素 伊红染色后显微镜下观察。原位移植瘤电镜观察 ,X线照射显示骨骼转移情况。结果 5只模型建立成功 ,1 0d左右 ,可触及前列腺部位有小结节。 60d左右 ,裸鼠出现明显恶液质。解剖后发现盆腔淋巴结肿大 ,显微镜观察膀胱有浸润 ,肝脏有微转移灶。X线未见骨骼转移。结论 前列腺肿瘤原位移植模型的转归接近于临床 。
- 王鹏飞邵晨袁建林王禾陈宝琦邵国兴师长宏
- 关键词：裸鼠前列腺肿瘤原位移植模型肿瘤浸润肿瘤转移
- 氟他胺耐受前列腺癌动物模型的建立被引量：3
- 2005年
- 目的建立SCID鼠前列腺癌氟他胺耐受模型。方法运用我们前期建立的氟他胺耐受前列腺癌细胞LNCaPflu(5×106个/0.1ml),结合应用Matrigel胶,将LNCaP细胞、LNCaPflu细胞分别各接种20只SCID雄鼠皮下,成瘤后将LNCaP细胞种植荷瘤鼠随机分为两组(LNCaP组、LNCaP/flu组),同时将LNCaPflu细胞种植荷瘤鼠也随机分为2组(LNCaPflu组、LNCaPflu/flu组),每组6只,其中LNCaP/flu组、LNCaPflu/flu组两组给予SCID鼠氟他胺20mg/kg体重皮下注射,每周2次,另2组作为对照组,动态观察肿瘤的生长状况。21d后测量瘤体大小,应用免疫组织化学方法检测种植瘤组织AR和PSA的表达。结果模型建立过程中,LNCaP细胞接种成瘤率75%(15/20),LNCaPflu细胞接种成瘤率60%(12/20),种植瘤组织组化染色AR均为阳性,而PSA均为阴性,未观察到肿瘤的远位转移。LNCaP组、LNCaPflu组、LNCaPflu/flu组3组间瘤重、瘤体积之间的差异无统计学意义(P>0.05),与LNCaP/flu组差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功建立了前列腺癌细胞氟他胺耐受动物模型,为进一步研究并解决临床氟他胺耐受现象提供了重要的动物模型。
- 邵晨汪涌师长宏王鹏飞刘凡邵国兴
- 关键词：前列腺癌氟他胺动物耐受LNCAP细胞MATRIGEL
- 2450 MHz微波对小鼠肾皮质与睾丸组织MDA含量、SOD和PKC活性的影响被引量：7
- 2002年
- 目的 :研究微波辐照对小鼠肾皮质和睾丸中脂质过氧化产物 (MDA)含量、超氧化物歧化酶 (SOD)和PKC活性的影响。方法 :选用频率为 2 4 5 0MHz、功率密度为 10mW cm2 的微波照射小鼠 ,用TBA比色法和NBT羟胺法检测组织中MDA含量和SOD活性 ,用放射示踪法测定PKC活性。结果 :微波辐照后 1、6、12、2 4天 ,小鼠的肾皮质和睾丸中MDA含量均升高 ,2 4天达到最高量 (P <0 .0 5 ) ;SOD活性均降低 ,2 4天降到最低点 (P <0 .0 5 ) ;2 4天时小鼠的肾皮质胞质PKC活性降低 ,而膜相PKC活性明显增高 (P <0 .0 1)。结论 :在该辐照条件下 ,微波辐照可致肾皮质和睾丸中自由基产量过多 ,SOD消耗增加 。
- 袁建林任东青王禾王鹏飞刘贺亮于磊王栋武国军于茂生
- 关键词：肾皮质睾丸脂质过氧化物微波辐射
- HSP70高表达的T_(24)细胞克隆筛选及其生物学特性被引量：9
- 2001年
- 目的 筛选耐热 T2 4细胞亚克隆 ,研究其生物学特性变化 .方法 用热暴露筛选 ,联合应用免疫荧光化学方法及流式细胞仪筛选高表达 HSP70的 T2 4细胞亚克隆 ,计数法测定其细胞生长曲线及细胞倍增时间 ,流式细胞仪分析其细胞周期的变化 .分子生物学方法及细胞化学方法观察有无凋亡出现 .结果 有限稀释法筛选获取耐热 T2 4单克隆细胞株(Hr T2 4)共 2 6株 ,应用免疫荧光法筛选出 HSP70阳性克隆 12株 ,取荧光较强的两株命名为 Hr T2 4e,Hr T2 4j,FCM(平均荧光强度为 0 . 2 9)检测 HSPs分子的阳性表达率 T2 4,Hr T2 4e,Hr T2 4j分别为 2 .4% ,37.6 % ,6 5 .8% .细胞周期分析显示 T2 4,Hr T2 4e,Hr T2 4j增殖指数 (proliferation index,PI分别为44 .3% ,39.0 % ,38.5 % ,Hr T2 4e与 T2 4相比差异有显著意义(Yates corrected,χ2 =5 .5 6 ,P=0 .0 183) ,Hr T2 4e与 T2 4j相比差异无显著意义 (Yates corrected,χ2 =0 .0 3,P=0 .85 43) .Hr T2 4e与 Hr T2 4j凋亡率分别为 4.7% ,5 .9% .分子生物学方法观察到 DNA凋亡梯带出现 ,细胞化学方法观察到凋亡小体 .结论 Hr T2 4细胞 HSP70表达增加 ,出现了一定的增殖抑制现象 ,同时观察到细胞凋亡 。
- 严泉剑王禾阎小君张宇梅王鹏飞陈宝琦邵国兴苏成芝
- 关键词：膀胱肿瘤热休克蛋白质类70T24细胞细胞培养分子克隆
- 尿穿孔素和粒酶Bm RNA检测在诊断移植肾急性排斥反应中的意义被引量：6
- 2003年
- 目的 探讨尿穿孔素、粒酶BmRNA检测在诊断移植肾急性排斥反应中的作用价值。 方法 应用竞争PCR方法对 34例肾移植患者 4 5份尿样中的穿孔素和粒酶BmRNA进行定量检测。 结果 急性排斥反应组 (n =10 )尿中穿孔素mRNA值 (1.2± 0 .4 )fg/μg总RNA ,粒酶BmR NA值 (1.1± 0 .5 )fg/μg总RNA ,显著高于非排斥组 [n =2 4 ,分别为 (- 0 .6± 0 .3)fg/μg总RNA和(- 0 .8± 0 .2 )fg/μg总RNA],P <0 .0 0 1。尿中细胞毒性分子mRNA水平与急性排斥反应发生时间和严重程度 (Banff分类级别 )无显著相关。当穿孔素mRNA值为 0 .9fg/μg总RNA时 ,诊断急性排斥反应的灵敏度和特异度分别为 85 %和 83% ,粒酶BmRNA值为 0 .4fg/μg总RNA时 ,诊断急性排斥反应的灵敏度和特异度分别为 81%和 78%。 结论 尿中穿孔素及粒酶BmRNA水平检测可以监测和诊断急性排斥反应的发生。
- 张波王禾张更杨建林武国军杨晓剑李欣王鹏飞秦卫军付振虹袁建林秦荣良陈宝琦
- 关键词：肾移植术急性排斥反应聚合酶联反应
- HLA氨基酸残基配型标准在肾移植中的应用被引量：4
- 2002年
- 目的 评价HLA氨基酸残基配型新标准在肾移植中的应用 .方法 应用血清学和基因分型方法对 134例肾移植供受者进行HLA Ⅰ ,Ⅱ类抗原分型 ,并比较氨基酸残基配型标准与传统的HLA六抗原无错配标准的关系 .结果 HLA氨基酸残基配型标准可以提高肾移植供受者的相配率 ,六抗原无错配率可由 0 .75 %提高到 2 .2 4 % ,六抗原完全错配的几率由 15 .6 7%降至 2 .2 4 % .
- 武国军王禾张波王鹏飞潘光辉张峻汤群辉李欣郭炜
- 关键词：HLA抗原氨基酸残基配型肾移植
- 抗bcl-2核酶基因转染促进GRC-1肾癌细胞凋亡的研究被引量：1
- 1999年
- 目的 观察抗ｂｃｌ２ 核酶促进ＧＲＣ１ 肾癌细胞凋亡的情况。 方法 体外构建抗ｂｃｌ２核酶基因逆转录病毒真核表达载体ｐＤＯＲＲＺ，用脂质体介导的ＤＮＡ 转染法导入ＧＲＣ１ 细胞，用ＤＮＡ 和ＲＮＡ 打点杂交、流式细胞仪（ＦＣＭ） 、电镜及光镜观察。 结果 核酶（ ＲＺ） 基因成功导入ＧＲＣ１ 细胞并在其内表达，转基因后ＧＲＣ１ 细胞的ｂｃｌ２ 蛋白量明显减少，ＦＣＭ 检测转基因后ＧＲＣ１ 细胞周期Ｇ１ 期前出现了典型的亚２ 倍体凋亡峰，电镜下观察ＧＲＣ１ 细胞出现典型的凋亡现象。 结论 人工合成的抗ｂｃｌ２ 核酶基因能够成功地导入ＧＲＣ１ 肾癌细胞并抑制ｂｃｌ２ 蛋白的合成，促进ＧＲＣ１ 细胞的凋亡。
- 汤群辉王禾陈宝琦邵国兴秦荣良袁建林邵晨王鹏飞
- 关键词：肾肿瘤核酶肾癌基因治疗
- 骨肉瘤细胞与活化B淋巴细胞融合疫苗的制备及其诱导的抗瘤活性被引量：4
- 2001年
- 目的骨肉瘤细胞与活化B淋巴细胞融合制备肿瘤疫苗,探讨其生物学特征及抗肿瘤特性。方法以体积分数50%的聚乙二醇(PEG)为融合剂,将C3h小鼠来源的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)基因缺陷型骨肉瘤细胞LM9与脂多糖(LPS)活化的C3h小鼠B淋巴细胞进行融合。经HAT(hypoxanthine-aminopyerin-thymidine)选择性培养基筛选后,流式细胞仪检测融合细胞表面H-2Kb表达情况,用有限稀释法进行克隆,H-2Kb高表达株FLM9用于体内抗瘤实验,观察该融合瘤株的体内外生长特性、对C3h小鼠的致瘤性以及抗肿瘤免疫活性。结果C3h小鼠骨肉瘤融合细胞在体外生长缓慢,对C3h小鼠无致瘤性,经有限稀释法克隆得到一个B7表达为75.11%的克隆,该克隆H-2Kb表达为15.6%;作用于荷瘤C3h小鼠,融合细胞治疗组小鼠(8只)2只分别于38d和45d死亡,其余6只存活期超过60d;对照组小鼠均在60d内全部死亡(P<0.01)。用肿瘤细胞攻击时,预先接种融合瘤苗组的存活率75%明显高于对照组。结论活化B淋巴细胞与骨肉瘤细胞融合后改变了肿瘤细胞的生物学特性,对小鼠有较好的预防和治疗肿瘤作用,说明用细胞融合方法构建的肿瘤疫苗具有潜在的应用价值。
- 王臻彭磊肖毅王庆良朱德生吴银松王鹏飞张志培
- 关键词：骨肉瘤细胞融合生物治疗B淋巴细胞
