罗洋
- 作品数：5 被引量：1H指数：1
- 供职机构：南开大学生命科学学院微生物学系更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生经济管理更多>>
- 缺失突变的chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用
- 一种缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用。本发明首先提供了一种DNA定向分子育种方法，经所述的方法进行DNA操作后获得的缺失突变的几丁质酶编码基因chiB启动子序列——chiBp△135，如序...
- 陈月华罗洋谢池楚李蓬飞蔡峻
- 文献传递
- 组成型表达chi基因的Bt工程菌株构建及其特性被引量：1
- 2014年
- 【目的】通过构建能够组成型高效表达几丁质酶的苏云金芽胞杆菌工程菌株,以提高其抑真菌活性。【方法】首先通过PCR扩增获得Bti75菌株chiB全长及系列缺失启动子片段,与本室构建的启动子探测型载体pCB连接,转化Bti75菌株,通过β-半乳糖苷酶活性检测及β-半乳糖苷酶mRNA的Real time-PCR检测,确定了一段长度为190 bp的组成型高效表达启动子。将这一启动子分别与Bti75自身几丁质酶基因chiA以及地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)的几丁质酶基因chiMY连接构建了组成型高效表达的工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)。应用几丁质酶酶活检测、SDS-PAGE及酶谱分析检测了工程菌几丁质酶的表达情况。最后,通过检测工程菌发酵粗酶液对真菌孢子萌发和菌丝生长的影响,评估了工程菌对3种植物病原真菌的抗真菌活性。【结果】在没有诱导物存在的情况下,Bti75(pBPΔ7)菌株表达的β-半乳糖苷酶酶活和β-半乳糖苷酶mRNA的转录量分别是Bti75(pBP)菌株的7倍和2.5倍左右。在没有几丁质诱导的情况下,与野生株Bti75相比,工程菌株Bti75(pDA)和Bti75(pDM)的几丁质酶活性均提高了3.5倍左右。SDS-PAGE及酶谱分析证明目的几丁质酶在非诱导条件下达到组成型高效表达,抑真菌实验显示工程菌Bti75(pDA)和Bti75(pDM)抑制3种植物病原真菌的活性明显提高。【结论】发现190 bp的缺失启动子能够组成型高效表达不同来源的几丁质酶,无需诱导物的诱导,工程菌株就能展现良好的抗真菌能力。
- 李蓬飞罗洋谢池楚蔡峻边强陈月华
- 关键词：苏云金芽胞杆菌几丁质酶组成型表达
- Bti75 chi基因调控元件的鉴定和组成型高效表达启动子的获得
- 苏云金芽胞杆菌（Bacillus thuringiensis简称Bt）是目前产量最大、使用最广的生物杀虫剂，至今已有100多年的研究历史。几丁质含量仅次于纤维素，广泛存在于甲壳类动物的外壳、昆虫的甲壳、真菌的胞壁和一些绿...
- 罗洋
- 关键词：芽胞杆菌几丁质酶生物活性
- 文献传递
- 缺失突变的chiB启动子及其组成型表达蛋白的应用
- 一种缺失突变的几丁质酶编码基因<I>chiB</I>启动子及其组成型表达蛋白的应用。本发明首先提供了一种DNA定向分子育种方法，经所述的方法进行DNA操作后获得的缺失突变的几丁质酶编码基因<I>chiB</I>启动子序列...
- 陈月华罗洋谢池楚李蓬飞蔡峻
- 城市综合公园游客满意度影响因子研究——以天津水上公园为例
- 本文以城市综合公园为研究对象，以游客满意度影响因子为研究内容，试图浓缩并提炼出影响城市综合公园游客满意度的具体因子和体系，分析其因子同游客满意度的关系。 本研究采用文献研究与实证研究相结合的方法。首先通过文献的阅读与探...
- 罗洋
- 关键词：旅游业游客满意度
- 文献传递
