罗芳
- 作品数:15 被引量:66H指数:5
- 供职机构:中南大学湘雅医院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金湖南省科技厅科研项目湖南省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 四代聚酰胺-胺型枝状聚合物纳米粒介导HSP90基因表达对结肠癌荷瘤小鼠的免疫功能影响
- 2013年
- 目的观察四代聚酰胺-胺型枝状聚合物纳米粒介导热休克蛋白质90(HSP90)基因表达对结肠癌荷瘤小鼠的治疗作用及其对免疫功能的影响。方法建立结肠癌荷瘤小鼠动物模型,随机分为空白组、转染空载体对照组和转染HSP90基因表达组,对比不同时点三组肿瘤的大小,评价抑瘤效果。通过Westernblot检测移植瘤组织HSP90蛋白表达,流式细胞仪检测脾单核细胞中CD4+、CD8+细胞比例,ELISA检测血清中细胞因子IL2、INFγ、IL8、IL10的含量。结果与空白组和转染空载体组相比,转染HSP90基因表达组肿瘤生长受到明显抑制(P<0.05),脾单核细胞中CD4+、CD8+细胞比例明显增加(P<0.05)。结论治疗组血清中细胞因子IL2和INFγ含量较荷瘤组和对照组明显增加(P<0.05),IL10含量基因表达对荷瘤小鼠结肠癌动物模型的肿瘤生长具有抑制作用,其机制与激发免疫系统功能有关。
- 罗芳胡铁辉
- 关键词:结肠肿瘤免疫功能
- miR-18a对结肠癌血管生成的影响被引量:2
- 2013年
- 目的探讨miR-18a对结肠癌血管生成的影响及其机制。方法以用合成的miR-18a模拟物转染人结肠癌细胞系SW620细胞。应用MTT法检测过表达miR-18a对细胞增殖活性的影响。分别用稳转miR-18a的SW620细胞接种建立裸鼠人结肠癌移植瘤模型。每周测量瘤体积。5周后麻醉处死裸鼠。免疫组化法检测增殖细胞核标志物Ki 67和血管内皮细胞标志物CD31的表达。应用Western blotting法检测血管生成相关的mTOR通路中mTOR下游靶蛋白S6K1和4E BP1的磷酸化情况,并检测肿瘤组织血管生成相关因子缺氧诱导因子1α(HIF-1α)和血管内皮生长凶子(VEGF)的表达。结果 miR-18a过表达显著降低SW620细胞的增殖能力(P<0.01)。并且,该基因对裸鼠人结肠癌移植瘤有明显的生长抑制作用,SW620组瘤体显著减小,抑瘤率达71.8%(P<0.01)。免疫组化检测显示,miR-18a显著抑制细胞增殖核抗原蛋白Ki-67(P<0.01)和血管内皮细胞标记物CD31(P<0.05)的表达。Western blot法检测显示,miR-18a显著抑制S6K(IP<0.01)和4E-BP(IP<0.05)的磷酸化,而且抑制肿瘤组织中HIF-1α(P<0.05)和VEGF蛋白(P<0.01)的表达。结论过表达miR-18a抑制结肠癌生长和血管生成,这可能与其抑制mTOR/VEGF通路有关,提示过表达miR-18a可能成为结肠癌治疗的新方法。
- 罗芳胡铁辉
- 关键词:结肠癌血管生成
- 姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿时SOD及MDA的影响及机制
- 2004年
- 目的了解大鼠感染性脑水肿时 SOD 与 MDA 的改变,探讨姜黄素预处理对其影响和机制。方法将 SD 大鼠随机分为5组:生理盐水对照组(NS 组);感染性脑水肿组(PB 组);二甲亚砜组(DMSO 组);热休克组(HS 组);姜黄素组(CUR 组)。制备感染性脑水肿模型。用干湿法测定脑含水量(WC);比色法测定脑组织匀浆上清 SOD、MDA 含量;电镜观察各组形态学改变;Western 印迹方法检测 HSP 70的表达;用图像处理仪进行密度面积分析。结果 HS 组 WC(80.24±0.28)%和 CUR 组 WC(80.44±0.32)%与 PB 组(82.40±0.45)%比较有明显降低(P<0.01);PB 组脑组织匀浆上清 MDA 含量(14.83±2.13)nmol/ml 比 NS 组(7.83±1.33)nmol/ml 明显增高(P<0.01),HS 组 MDA 含量(5.55±1.06)nmol/ml、CUR 组 MDA 含量(8.35±1.65)nmol/ml 与 PB 组比较有明显降低(P<0.01或 P<0.05);PB 组 SOD 含量(369.54±2.13)Nu/ml 比 NS 组 (461.78±18.13)Nu/ml 明显降低(P<0.05),HS 组 SOD 含量(450.00±21.59)Nu/ml 和 CUR 组 SOD 含量(532.25±13.10)Nu/ml 与 PB 组比较有明显增高(P<0.05)。电镜观察显示 CUR 组脑水肿明显减轻;Western印迹分析经图像处理仪扫描显示密度面积 CUR 组、HS 组、PB 组高于 NS 组及 DMSO 组。其中以 CUR 组增高明显。结论感染性脑水肿时脂质过氧化物产生明显增多,姜黄素具有抗脂质过氧化的作用,其作用与诱导HSP 70的表达增强有关。
- 黄榕罗芳杨于嘉余小河虞佩兰
- 关键词:姜黄素热休克蛋白70丙二醛超氧化物歧化酶感染性脑水肿
- Ⅰ型戊二酸尿症一例被引量:7
- 2004年
- 钟乐杨于嘉罗芳孙吉平余小河
- 关键词:小儿常染色体隐性遗传病
- 脐血间充质干细胞成功培养的相关因素探讨被引量:6
- 2006年
- 目的探讨影响人脐血间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)成功培养的相关因素,以期提高其培养成功率。方法脐血依胎龄分为3组:40周胎龄组(n=11);36周胎龄组(n =6);32周及其以下胎龄组(n=5)。采用相对适宜的条件培养,观察能成功培养出MSCs的比率,探讨脐血MSCs培养与胎龄、脐血单个核细胞数量(mononuclear cells,MNCs)、脐血容量之间的相关关系,以及各因素之间可能存在的相关关系。通过检测脐血MSCs的生长曲线、细胞群体倍增时间、成纤维细胞集落形成数目(fibroblast colony forming unit,CFU-F)、表面标志的表达来观察脐血MSCs细胞的生物学特性。结果脐血MSCs培养成功率达54.5%。MSCs培养成功与否与接种于培养瓶内脐血MNCs数量密切相关,脐血MNCs接种数量在1.25×108/L以上者培养成功率达83.3%。单位体积内脐血MNCs含量与胎龄呈负相关。小胎龄者脐血MSCs成集落能力(CFU-F数目)高于大胎龄。流式细胞术检测显示,在原代培养细胞增殖期末间充质干细胞的重要表面标志CD29有62.1%的表达,传1代细胞表达CD29、CD105分别为78.3%和85.0%;造血系统的表面标志CD34、CD45则始终在3.0%以下。结论脐血MNCs的接种数量在1.25×108/L以上可以提高培养的成功率。相同容量内脐血MNCs与胎龄呈负相关,且脐血MSCs样细胞集落形成能力(CFU-F计数)小胎龄者高于大胎龄,可能是小胎龄脐血MSCs相对容易培养成功的原因之一。
- 罗芳杨于嘉王霞余小河王庆红宋健辉刘沉涛黄榕
- 关键词:胎血孕龄间质干细胞
- 体外诱导大鼠骨髓间质干细胞分化为胰岛样细胞的研究被引量:5
- 2006年
- 目的探索大鼠骨髓间质干细胞(MSCs)体外诱导分化为胰岛素分泌细胞的方法,为解决胰岛移植物来源匮乏问题提供新的思路。方法采用横向分化技术,将成年大鼠MSCs诱导成胰岛素分泌细胞;间接免疫荧光法鉴定诱导前后的细胞巢蛋白、胰岛素、胰高血糖素、生长抑素的表达;RTPCR法检测诱导前后的细胞胰岛素1、Pdx1、Pax6mRNA的表达;24h累积分泌量测定和胰岛素刺激实验评价诱导前后细胞的功能。结果诱导5h,巢蛋白阳性细胞为(44.6±7.3)%,诱导24h增至(61.8±8.4)%。此后,巢蛋白阳性细胞数开始下降,诱导第14天后,巢蛋白表达基本消失。而且,诱导后细胞可表达胰岛素、胰高血糖素、生长抑素等蛋白;表达胰岛素1及其多种转录因子基因mRNA;胰岛素刺激实验反应敏感,而诱导前MSCs不具备上述特点。结论体外大鼠MSCs可诱导成为胰岛素分泌细胞,为胰岛移植开辟新的研究思路。
- 孙吉平贾延劼宋建辉罗芳杨于嘉
- 关键词:胰岛分化
- 44例原发性肝癌栓塞化疗的护理
- 1996年
- 我科自1995年初对44例原发性肝癌患者进行了碘油化疗药物肝动脉栓塞治疗,在治疗期间制定了具体的护理措施:术前准备、术后护理。我们认为,在肝动脉栓塞术后1~2周内,密切观察患者生命体征及病情变化,同时做好体位护理,饮食护理,心理护理,并发症的预防,不仅有利于手术的顺利进行,对术后疗效亦很重要。
- 罗芳
- 关键词:肝癌栓塞化疗护理
- IL-6、IL-8在新生儿感染中的改变
- 2006年
- 目的探讨血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)水平与新生儿感染之间的关系。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和免疫比浊法检测45例新生儿感染患儿及20例正常健康儿血清中IL-6I、L-8和C-反应蛋白(CRP)的含量。结果新生儿感染急性期IL-6、IL-8和CRP水平较对照组明显升高(P<0.001),败血症组较非败血症组明显升高(P<0.001),恢复期与正常水平差异无显著性(P>0.05);感染急性期IL-6、IL-8和CRP水平呈正相关性(P<0.01)。结论IL-6、IL-8参与了炎症反应过程,其水平的高低可反映疾病的严重程度,可作为感染性疾病早期诊断的重要检测指标。
- 肖春香殷小成罗芳
- 关键词:新生儿白细胞介素-6白细胞介素-8C-反应蛋白
- 姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿的保护作用及其机制研究被引量:10
- 2003年
- 目的 观察姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿的保护作用 ,并从预处理后的脑组织氧自由基、细胞因子含量及HSP70表达三方面探讨其可能的作用机制。方法 SD大鼠随机分为 5组 :(1)正常对照组 (NS组 ,n =9) ;(2 )感染性脑水肿组 (PB组 ,n =12 ) ;(3)溶剂对照组 (DMSO组 ,n =9) ;(4)热休克预处理组 (HS组 ,n =9) ;(5 )姜黄素预处理组 (CUR组 ,n =13)。制备感染性脑水肿模型。用干湿法测定脑含水量 ;原子光谱吸收法测定脑组织钠、钾含量 ;比色法测定脑组织匀浆上清MDA、SOD含量 ;ELISA测定TNF α、IL 1β含量及Western印迹方法研究HSP70的表达。 结果 脑含水量、脑组织钠离子含量、脑组织匀浆上清MDA含量及TNF α、IL 1β含量 :PB组比NS组增高 (P<0 0 1) ,HS组、CUR组低于PB组 (P <0 0 1或P <0 0 5 )。SOD含量PB组低于NS组 (P <0 0 5 ) ,HS组、CUR组高于PB组 (P <0 0 5 )。Western印迹分析经图像处理仪扫描显示CUR组、HS组、PB组高于NS组及DMSO组 ,其中以CUR组最高 (P <0 0 1)。结论 姜黄素预处理对大鼠感染性脑水肿具有保护作用 ,姜黄素的保护作用可能与抗脂质过氧化、抑制细胞因子的过度产生、诱导或加强HSP70的表达这三方面均有关。
- 罗芳黄榕杨于嘉余小河
- 关键词:姜黄素预处理感染性脑水肿
- 脂质体介导外源性基因在骨髓基质细胞表达被引量:1
- 2005年
- 目的:用阳离子脂质体介导真核表达载体pEGFP PDX 1转染大鼠骨髓基质细胞,并对其转染条件进行优化以获得较高效率。方法:构建的重组载体鉴定后,以脂质体介导其转染骨髓基质细胞,改变DNA,脂质体的量,在荧光显微镜下观察荧光并计算转染效率;转染后48h进行细胞免疫组化染色检测目的基因的表达情况。结果:限制性酶切分析证实重组后的载体成功载入PDX 1基因;克隆的目的片断经序列测定与GenBank公布的序列一致;质粒∶脂质体为1∶1或1∶2的转染效率最佳;细胞免疫化学染色检测证实转染后骨髓基质细胞有PDX 1基因表达。结论:成功构建了含有PDX 1基因的真核表达载体;通过优化转染条件提高了pEGFP PDX 1转染大鼠骨髓基质细胞的效率,为成为组织工程的种子细胞提供了实验依据。
- 孙吉平贾延劼罗芳宋建辉杨于嘉
- 关键词:外源性基因细胞表达大鼠骨髓基质细胞阳离子脂质体介导显微镜下观察细胞免疫化学