苟小燕
- 作品数：5 被引量：16H指数：3
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- 沉默Bmi-1基因表达对MCF-7细胞阿霉素敏感性的影响被引量：1
- 2012年
- 目的研究Bmi-1对MCF-7细胞阿霉素敏感性的影响及机制。方法阿霉素处理MCF-7／Bmilsi、MCF-7／GFPsi和MCF一7细胞株，M1Tr法检测阿霉素的IC50；DAPI检测阿霉素处理后细胞的凋亡，计算凋亡指数（apoptosisindex，AI）；Western印迹检测相关蛋白P53，phospho—Akt（Ser473）（pAkt），totle—Akt（tAkt），Bcl-2，Bax的表达。结果阿霉素处理72h的MCF-7／Bmi．1si组生长抑制率明显高于MCF-7和MCF-7／GFPsi组，MCF-7／Bmilsi组的IC50为（0．15±0．02）μg／ml，而MCF-7组和MCF-7／GFPsi组的IC50分别为（0．87±0．06）μg/ml和（0．81±0．02）μg/ml（P〈0．05）。阿霉素处理48h后用DAPI检测凋亡发现，MCF-7／Bmi．lsi＋doxorubiein组可见大量凋亡细胞，而MCF-7＋doxorubicin和MCF-7／GFPsi＋doxo—rubicin组出现较少的凋亡细胞，MCF-7／Bmi-1si＋doxorubicin组凋亡指数明显高于对照组（P〈0．05）。进一步研究发现：MCF-7／Bmi．1si＋doxorubicin组与MCF-7＋doxorubiein及MCF-7／GFPsi＋doxorubiein组相比，P53表达量增加，tAkt表达未发生改变，而pAkt的表达明显减少，另外，Bcl-2表达量减少而Bax表达量增加，差异具有显著性（P〈0．05）。结论沉默Bmi—l基因表达能增加MCF-7细胞对阿霉素的敏感性，增加阿霉素引起的凋亡。
- 武向梅余华荣卜友泉易发平汪长东刘革力邓小园苟小燕宋方洲
- 关键词：BMI-1基因乳腺癌阿霉素
- BRIT1基因过表达对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响被引量：6
- 2012年
- 目的探讨BRIT1基因过表达对人宫颈癌HeLa细胞凋亡的影响。方法真核表达质粒pcDNA3.1(-)/BRIT1经双酶切和测序鉴定后转染HeLa细胞,并设空载体转染组(阴性对照)和未处理组。转染后48 h,采用RT-PCR和Real timePCR法检测细胞中BRIT1基因mRNA的转录和表达情况,Western blot检测细胞中BRIT1蛋白的表达水平,流式细胞术分析细胞的凋亡情况。结果重组真核表达质粒pcDNA3.1(-)/BRIT1经双酶切和测序证实构建正确;转染48 h后,可有效上调HeLa细胞中BRIT1基因mRNA和蛋白的表达,细胞凋亡率[(12.37±0.19)%]较阴性对照组[(1.81±0.22)%]和未处理组[(2.06±0.10)%]明显增加,且差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 BRIT1基因过表达能诱导人宫颈癌HeLa细胞体外凋亡,为进一步研究BRIT1基因在宫颈癌细胞凋亡中的作用及其机制奠定了基础。
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- 关键词：宫颈肿瘤HELA细胞细胞凋亡
- 应用SYBR实时荧光定量Real—TimePCR法检测人宫颈癌MCPH1 mRNA表达被引量：7
- 2011年
- 目的 应用SYBR实时荧光定量RT-PCR法检测MCPH1/BRIT1 mRNA的表达.方法 提取人宫颈癌总RNA,经逆转录PCR获得靶基因（MCPH1）及管家基因（GAPDH）的CDNA,采用SYBR Green 荧光实时定量法检测,以GAPDH基因作为内参,计算各组MCPH1 mRNA的相对表达量.结果 在31例宫颈癌标本中,MCPH1基因mRNA的表达,19例癌比正常低,1 例癌比正常高,其余标本无统计学意义;6例癌比癌旁低,1例癌比癌旁高,其余无统计学意义.结论 利用SYBR实时荧光定量RT-PCR检测出人宫颈癌中MCPH1基因mRNA的表达下调,为进一步研究MCPH1在宫颈癌中的作用及功能奠定了基础.
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- 关键词：宫颈癌
- MCPH1过表达对宫颈癌SiHa、CaSKi细胞凋亡的影响
- 常染色体隐性遗传原发性小头畸形基因MCPH1，也称为BRIY1，在DNA损伤、修复和抑制癌的过程中有重要作用;近年来研究表明其在肿瘤的发生发展中也发挥重要作用。MCPH1在宫颈癌病例中的表达情况尚未见报道，本文主要就：M...
- 苟小燕
- 关键词：宫颈癌细胞凋亡蛋白表达
- 沉默Bmi-1基因表达稳定细胞株的建立及其生物学特性的研究被引量：5
- 2012年
- B细胞特异性莫洛尼鼠白血病病毒插入位点1(B-cell-specific moloney murine leukemia virus insertionsite 1,Bmi-1)基因是多梳基因家族成员,参与细胞增殖调控.研究发现Bmi-1基因可能参与肿瘤的形成,可能成为肿瘤潜在的治疗靶点.用RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默Bmi-1基因表达观察其对乳腺癌细胞株MCF-7侵袭和转移等生物学特性的影响,以探讨Bmi-1在乳腺癌发生发展中的作用.PT67细胞包装质粒后产生的逆转录病毒感染MCF-7细胞,嘌呤霉素筛选建立稳定细胞株,稳定抑制Bmi-1的细胞株命名为MCF-7/Bmi-1si.通过RT-PCR和Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测Bmi-1的表达量;平板克隆形成实验检测细胞克隆形成能力;Transwell侵袭小室模型检测细胞体外侵袭和转移能力.MCF-7/Bmi-1si组与MCF-7和MCF-7/GFPsi组相比,Bmi-1 mRNA和蛋白表达量明显减少,克隆形成数及形成率也明显减少(P<0.05).侵袭和转移实验表明:与MCF-7和MCF-7/GFPsi组相比,MCF-7/Bmi-1si组细胞在Transwell侵袭小室中24 h穿膜细胞数明显减少(P<0.05).结果表明沉默Bmi-1基因表达稳定细胞株构建成功,Bmi-1基因表达的沉默能显著降低MCF-7细胞的体外增殖及侵袭转移能力.
- 武向梅余华荣卜友泉易发平汪长东刘革力苟小燕邓小园宋方洲
- 关键词：BMI-1基因乳腺癌RNA干扰MCF-7细胞
