褚新星
- 作品数：6 被引量：18H指数：2
- 供职机构：山东农业大学动物科技学院更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 己烯雌酚酶联免疫检测方法的建立被引量：12
- 2006年
- 建立灵敏度高和特异性强的己烯雌酚残留检测分析方法。用人工合成的己烯雌酚免疫原多次免疫家兔，获取高效价抗体。纯化抗体经生物素标记，可同辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素特异结合。采用纯化的抗体包被96孔板，形成固相抗体。加入不同浓度的己烯雌酚标准品后，再加入生物素标记抗体，以酶标记亲和素作为探针，经酶底物显色反应可获得良好的ELISA标准曲线。该方法检测灵敏度为0．125ng／mL，可定量检测范围为0．25～15．60ng／mL。该方法操作简便，具有较强灵敏度和特异性，可满足实践中一般样品的残留检测。
- 邴爱英成连贵褚新星牛钟相
- 关键词：己烯雌酚酶联免疫分析生物素-亲和素
- 融合蛋白C3d提高新城疫灭活苗的免疫原性被引量：1
- 2008年
- 补体C3d是补体系统(complement system,CS)中补体C3的最终裂解产物。本试验利用RT-PCR技术从AA肉鸡肝脏总RNA中扩增C3d cDNA,测序证实为C3d基因。然后将其连接至表达载体pET-32a(+),转化E.coliBL21(DE3),1%IPTG诱导表达。SDS-PAGE、Western-blotting证实目的蛋白为C3d。亲和层析分离C3d融合蛋白,与纯化新城疫病毒(Lasota株)经戊二醛连接后免疫SPF鸡。血凝抑制试验(HI)检测新城疫抗体水平,MTT法检测胸腺T淋巴细胞转化率。结果表明C3d融合蛋白能够提高特异性抗体水平以及细胞免疫水平,本研究为进一步研究、利用鸡补体C3d奠定了基础。
- 李艳梅褚新星吴春涛聂玉霞肖连明
- 关键词：C3DMTT血凝抑制试验
- 鸡C3d-P29分子佐剂作用效果的研究
- 基因疫苗主要由真核表达载体和保护性抗原基因构成,此种疫苗与传统疫苗相比,具有设计灵活、安全性高、性质稳定、成本低、同时诱导体液免疫和细胞免疫等优点。然而核酸疫苗存在的问题是产生抗体慢且水平低,需要加入有效的佐剂才能克服这...
- 褚新星
- 关键词：基因疫苗RT-PCR
- 文献传递
- 酸奶中快速分离嗜热链球菌的新方法
- 2008年
- 本文研究了从酸奶中快速分离嗜热链球菌的新方法。新方法具有高效、经济、快速的特点。同时采用新方法对市售酸奶进行了菌体计数,结果显示市售某品牌酸奶的乳酸菌在108cfu/ml左右。
- 聂玉霞肖连明褚新星
- 关键词：嗜热链球菌
- 新城疫C3d-P29分子佐剂F基因疫苗的构建被引量：5
- 2008年
- C3d是补体C3的裂解产物之一,与抗原相连时可以明显提高抗原分子的免疫原性。CR2/CD21在其功能发挥过程中起到重要作用,P29为编码C3d与CR2结合区域的基因。从健康AA肉鸡肝脏中RT-PCR克隆C3d CDNA,设计引物克隆P29至pUC19载体,利用同裂酶BamHⅠ和BglⅡ构建pUC-P29.n。酶切获得P29.n,将其克隆至真核表达载体pCDNA3.1(+)。最后RT-PCR扩增新城疫F基因,定向克隆至真核表达载体pCDNA-P29.n中P29.n的上游,构建完成新城疫F基因疫苗。3周龄SPF鸡进行基因免疫,结果pCDNA-F-P29.4、pCDNA-F-P29.6较pCDNA-F都能够提高HI抗体水平及保护力,虽然HI抗体水平不及灭活苗,但是能够抵抗致死量病毒的攻击,并且pCDNA-F-P29.6效果更好。目前发表的关于C3d的佐剂作用的文章多是关于鼠C3d,相应的抗原不能够自然感染鼠类,关于鸡C3d的报道较少。研究结果为进一步开发和利用鸡C3d奠定了基础。
- 褚新星彭军翁立雪朱瑞良牛钟相
- 关键词：HI
- AA肉鸡补体C3d基因cDNA的克隆及鉴定
- 2008年
- 为获得鸡C3d基因的cDNA,从鸡肝细胞提取总RNA,通过RT-PCR扩增出C3d基因的cDNA,脂糖凝胶电泳鉴定后直接克隆到pMD18-T载体,构建C3d-pMD18-T重组质粒,转化大肠杆菌,酶切鉴定后进行序列测定。通过琼脂糖凝胶电泳证明有1.0 kb左右的PCR扩增片段,序列测定表明为C3d基因的cDNA。通过RT-PCR法从鸡肝细胞RNA中成功地扩增到鸡C3d基因的cDNA,为进一步构建基于C3d基因内佐剂的疫苗奠定了基础。
- 褚新星翁立雪彭军牛钟相姜世金
- 关键词：基因克隆
