许佐良
- 作品数：18 被引量：29H指数：3
- 供职机构：北京肿瘤医院临床肿瘤学院更多>>
- 发文基金：广西省科技厅自然科学基金广西科技厅自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程更多>>
- SCID小鼠在制备人单克隆抗体中的应用被引量：1
- 1993年
- 由CB-17纯系小鼠突变而来的重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠的突出特点为T-B淋巴细胞功能联合缺陷.此特点决定了它可接受人器官组织移植物,形成人-鼠嵌合体:SCID-hu小鼠,为以往不能在人体上进行的人类生物医学实验开辟了一条新的途径,同时也为人单克隆抗体的深入研究头来了新的希望.本文讨论了在SCID小鼠中进行异种移植的条件以及利用SCID-hu小鼠进行人单抗研究的一些进展.
- 王军许佐良
- 关键词：单克隆抗体
- 体内转染人突变DHFR基因的小鼠骨髓对致死量照射小鼠造血重建和保护作用
- 1999年
- 目的将转染了人突变ＤＨＦＲ基因的小鼠骨髓移植给经致死剂量照射的小鼠，观察其对受者造血功能的重建和保护作用。方法分离转染人突变ＤＨＦＲ基因小鼠骨髓有核细胞，移植给经致死剂量照射的同系小鼠，以甲氨蝶呤（ＭＴＸ）筛选。观察受体小鼠血象、生存率和ＣＦＵＧＭ的改变，并用ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析外源基因在小鼠染色体ＤＮＡ中的整合与表达情况。对照组以正常同系小鼠为供体。结果在大剂量ＭＴＸ筛选下，实验组小鼠造血功能逐渐恢复，对照组在３０天内全部死亡。实验组骨髓、脾脏和部分肝脏及肾脏组织中均检测到了前病毒标志基因Ｎｅｏｒ和ＤＨＦＲ基因的特异条带。ＣＦＵＧＭ分析提示在不同Ｇ４１８和ＭＴＸ浓度中均有集落形成。结论转染了人突变ＤＨＦＲ基因的小鼠骨髓能有效地重建和保护受致死量照射受体小鼠的造血功能。
- 张文卿许佐良张文卿许佐良
- 关键词：DHFR造血重建
- 一株对LAK细胞杀伤耐受的胃癌细胞株的建立及其相关生物学特性的研究
- 1995年
- 人胃癌细胞系MGC-803经反复与LAK细胞共培养获得对LAK细胞杀伤耐受的特性。在反复共培养十个周期后，残留细胞数量逐渐增多并达到稳定。在八小时^3H-TdR释放细胞毒实验中，当效靶比为40：1时，LAK细胞对亲代细胞MGC-803^p杀伤率为90%，而对耐受株MGC-803^R的杀伤率仅为40%。
- 董坚许佐良张桂国
- 关键词：耐受MGC-803杀伤胃癌细胞株^3H-TDR
- 含人突变DHFR基因的逆转录病毒对造血细胞的转导及造血功能的作用
- 1999年
- 利用逆转录病毒介导，成功地将许多基因导入了造血干细胞，含人突变二氯叶酸还原酶（ｈｕｍａｎｄｉｈｙｄｒｏｆｏｌａｔｅｒｅｄｕｃｔａｓｅ，ｈＤＨＦＲ）基因的产病毒细胞ＡＭ１２－Ｓ３１，能稳定产生高滴定、安全有效的非复制型逆转录病毒，并能成功转染小鼠造血细...
- 张文卿许佐良于杰赵实诚于杰
- 关键词：逆转录病毒造血细胞造血功能转导
- 利用PCR技术构建GM-CSF/Fc γ_2融合蛋白载体
- 1999年
- 目的：构建 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ／ Ｆｃγ２ 融合蛋白载体。方法：利用 Ｐ Ｃ Ｒ技术，将人 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ基因与人免疫球蛋白 Ｉｇ Ｇ２ 的 Ｆｃ 段基因联接，构建融合基因ｈ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ Ｈ Ｖ２；并将此片段定向克隆到真核表达质粒ｐ Ｒｃ／ Ｃ Ｍ Ｖ２ 载体。结果：琼脂糖凝胶电泳结果显示 Ｐ Ｃ Ｒ扩增出了 １．３ ｋｂ 的融合基因片段；限制性内切酶图谱分析，成功地完成了 Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ／ Ｆｃγ２ 融合蛋白载体的构建。结论：（１）经 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增技术由质粒 Ｐ Ｃ Ｄｈ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ和 Ｐ Ｓ Ｖ Ｖ Ｎ Ｐ Ｈ Ｖ２ 分别扩增到了所需的ｈ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ ｃ Ｄ Ｎ Ａ 片段和 Ｉｇ Ｇ２ 从绞链区到 Ｃ Ｈ３ 的基因组 Ｄ Ｎ Ａ 片段。（２）利用 Ｐ Ｃ Ｒ介导，扩增出了融合基因片段ｈ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ Ｈ Ｖ２。（３）构建了真核细胞表达载体ｐ Ｒｃ／ Ｃ Ｍ Ｖ２／ｈ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ Ｈ Ｖ２ 。
- 麦丽凯许佐良
- 关键词：聚合酶链反应融合基因融合蛋白
- IL-2受体表达和溶酶体含量在激活淋巴细胞杀伤中的作用
- 1997年
- 研究淋巴细胞增殖时，ＩＬ┐２Ｒ表达水平和胞内溶酶体含量变化对细胞杀伤效应的影响。方法用３Ｈ┐ＴｄＲ掺入及释放测定细胞增殖和杀伤效应，用荧光素标记技术测定ＩＬ┐２Ｒ表达和溶酶体含量。结果ＰＨＡ，ＣｏｎＡ，消炎痛和胰岛素可协同增加ＩＬ┐２诱导的淋巴细胞增殖，ＩＬ┐２Ｒ表达，ＣＤ＋８细胞数量和杀伤活性。ＰＨＡ预处理１２小时杀伤活性明显增强。ＰＨＡ预处理长达７２小时则杀伤活性明显受到抑制。这种抑制不是ＣＤ＋８细胞减少的缘故，而与胞内溶酶体产生减少有关。封闭ＩＬ┐２Ｒ或破坏胞内溶酶体，细胞杀伤活性受到明显的抑制。结论细胞增殖和杀伤活性并不平行，ＩＬ┐２Ｒ表达与细胞增殖及杀伤活性密切相关，但不充分，只有胞内溶酶体含量同时增加。
- 梁钢许佐良
- 关键词：IL-2R溶酶体凝集素
- 膜结合型TNF-α基因转导人胃癌细胞株的建立及其生物学特性研究被引量：4
- 1996年
- 本研究利用逆转录病毒载体LXSN构建了插入突变的膜结合型TNF-α基因的重组逆转录病毒载体，将重组载体及空载体导入包装细胞CRIP．筛选G418抗性克隆。测定病毒滴度均为1×10^4CFU／ml，并转入胃癌细胞MGC-803．经筛选分别获得抗性克隆MGC-803^T及MGC-803^T,经Southern杂交证实目的基因已整合在MGC-803^T细胞基因组中。MGC-803^T对L929细胞有杀伤作用．而对照细胞无杀伤作用。MGC-803^T细胞的形态，体外增殖率无明显改变。裸鼠体内接种结果表明，与对照组相比，MGC-803^T细胞在裸鼠体内的生长受到明显抑制，表现为肿瘤发生延缓．肿瘤重量明显减轻。上述结果表明．逆转录病毒介导的突变型膜结合型TNF-α基因可在人胃癌细胞中获得有效表达．并能改变其生物学特性。
- 胡荫许佐良于杰张桂国
- 关键词：转导胃癌细胞株生物学特性
- 转染人突变dhfr基因的小鼠骨髓细胞对小鼠造血功能的长期保护作用
- 1999年
- 目的:将转染了人突变dhfr基因的第二代小鼠骨髓,移植给经致死剂量照射的第三代小鼠,观察该基因对小鼠造血功能的长期保护作用.方法:分离存活的第二代小鼠骨髓有核细胞,直接移植给经致死剂量照射的同系小鼠,以MTX筛选,观察小鼠血象和生存率变化,PCR和Southem印迹杂交分析目的基因在小鼠染色体DNA中的整合与表达情况.结果:在大剂量MTX筛选下,实验组小鼠造血功能逐渐恢复,对照组3周内全部死亡.实验组生存率和生存期明显高于对照组,但较前两代生存率低.PCR和Southern印迹分析结果提示,实验组脾脏和肝脏组织中均检测到前病毒标志基因neo^R和dhfr基因的特异务带.结论:转染了人突变dhfr基因的第二代小鼠骨髓,能有效地重建经致死剂量照射的第三代小鼠造血功能.保护骨髓免遭大剂量MTX所致的严重骨髓抑制,dhfr基因在小鼠基因组DNA中的稳定整合是这种长期保护作用的物质基础.
- 张文卿许佐良徐光炜于杰赵实诚
- 关键词：骨髓移植基因转染基因疗法耐药基因
- 儿茶素对耐药人口腔表皮样癌细胞KBV200凋亡的影响被引量：6
- 2004年
- 目的 研究两种儿茶素ECG、EGCG对耐药人口腔表皮样癌细胞KBV2 0 0的促凋亡作用。方法 MTT法检测药物对细胞的毒性作用 ,用形态学观察法、TUNUL法、琼脂糖凝胶电泳及流式细胞仪PI染色法观察细胞凋亡。结果 30mg·L-1ECG或 8mg·L-1EGCG联合 0 0 2 4mg·L-1长春新碱 (VCR)可用形态学观察、免疫组化法、琼脂糖凝胶电泳法见到细胞凋亡改变 ,而对照组无此类改变或改变不明显。结论 两种儿茶素在低细胞毒剂量时可促进长春新碱对耐药口腔表皮样癌细胞KBV2 0 0的细胞凋亡作用。
- 张肃梁钢黄志明黄仁彬唐安洲许佐良
- 关键词：儿茶素多药耐药口腔癌凋亡
- 细胞因子在肿瘤治疗中的应用
- 1998年
- 细胞因子在肿瘤治疗中的应用麦丽凯＊许佐良细胞因子疗法是肿瘤生物疗法之一。８０年代由于基因工程、蛋白工程、细胞工程等生物高技术的发展和交叉渗透推动了肿瘤生物治疗领域的研究，相继建立了特异性主动免疫疗法，过继性细胞免疫疗法，免疫导向疗法，细胞因子疗法，基...
- 麦丽凯许佐良
- 关键词：肿瘤生物疗法细胞因子疗法
