谢宇锋
- 作品数：127 被引量：224H指数：9
- 供职机构：苏州大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学理学农业科学更多>>
- hIFN-λ1(hIL-29)基因在COS-7细胞中瞬时表达和抗病毒效应
- 目的为了克隆hIFN-λ基因并使自主构建的pcDNA3.1A-IFN-λ表达质粒能在真核细胞中获得表达,以进一步研究rhIFN-λ的生物学特性。方法采用RT-PCR 法从病毒诱导的A549细胞mRNA中克隆hlFN.入l...
- 王建红马丽丽谢宇锋盛伟华缪竞诚吴康陈雄艳杨吉成
- 关键词：RT-PCR基因克隆COS-7细胞
- 文献传递
- rhIL-18在不同原核表达系统中的表达和活性比较被引量：2
- 2006年
- 目的研究rhIL-18包涵体、可溶性(His融合型)两种形式蛋白的生物学活性。方法从已构建的pBV220-IL-18重组质粒中双酶切获取IL-18基因,回收后重组至pLHis质粒构建重组载体。42℃热诱导pBV220-IL-18表达,产生rhIL-18包涵体,IPTG诱导pLHis-IL-18表达,产生可溶性rhIL-18蛋白。两者分别刺激人外周血单个核细胞,ELISA法检测上清中IFN-γ的含量。结果两种重组表达载体均表达产生了rhIL-18,且均可刺激人PMBC上清产生IFN-γ,可溶性rhIL-18刺激人外周血产生IFN-γ的能力高于包涵体形式的rhIL-18。结论可溶性rhIL-18具有比包涵体形式的rhIL-18更强的活性,这为IL-18原核表达基因工程药物的开发提供了新思路。
- 张海峰李丽娥盛伟华缪竞诚谢宇锋王金志杨吉成
- 关键词：IL-18包涵体可溶性蛋白IFN-Γ
- Ad-ING4对人前列腺癌细胞PC-3体内外抑癌效应的研究被引量：14
- 2009年
- 背景与目的:腺病毒作为载体已被广泛用于肿瘤的基因治疗。ING4是生长抑制因子家族中的一个成员,是一种潜在的抑癌基因。本研究旨在探讨腺病毒介导的人ING4基因(Ad-ING4)对人前列腺癌细胞PC-3的体内外抑癌效应及其分子机制。方法:将扩增的Ad-ING4重组腺病毒感染PC-3细胞,用RT-PCR法检测ING4在PC-3细胞中的转录;MTT法检测ING4基因对PC-3细胞增殖的影响;流式细胞术和Hoechst33258染色法检测细胞凋亡的变化;半定量RT-PCR法检测ING4基因的表达对PC-3细胞中的bcl-2、bax、p53和caspase-3凋亡相关基因表达的影响。用Ad-ING4重组腺病毒在裸鼠PC-3移植瘤的瘤体内注射治疗,观察肿瘤生长变化,15d后处死裸鼠,摘除瘤体,称瘤重;用免疫组化法检测瘤组织中Bcl-2、Bax、Caspase-3和CD34蛋白的表达。结果:腺病毒介导的人ING4基因在PC-3细胞中成功转录,明显抑制PC-3细胞增殖,上调p53、bax、caspase-3基因表达和下调bcl-2基因表达,并诱导细胞凋亡。Ad-ING4重组腺病毒能显著抑制裸鼠PC-3移植瘤的生长,瘤重的抑制率达37%,与空病毒载体Ad-GFP组和细胞对照PBS组比较差异有统计学意义(P<0.05);免疫组化结果显示Ad-ING4重组腺病毒能明显上调Bax和Caspase-3蛋白的表达水平,下调Bcl-2和CD34蛋白的表达水平。结论:腺病毒介导的ING4基因在体内外均可明显抑制人前列腺癌细胞PC-3的生长,诱导其凋亡,其机制可能是上调P53、Bax、Caspase-3蛋白和下调Bcl-2蛋白表达水平。
- 杨慧翠盛伟华谢宇锋缪竞诚魏文祥杨吉成
- 关键词：ING4基因PC-3细胞前列腺癌肿瘤抑制
- Ang-1和VEGF165腺病毒的载体构建及其表达
- 目的:构建人血管生成素-1(Ang-1)和人血管内皮生长因子VEGF165(VEGF165)的腺病毒载体,为下一步用Ang-1和VEGF165转基因细胞修饰丝素材料进行动物创伤恢复实验研究奠定基础。
方法:通过...
- 刘铁连谢宇锋盛伟华缪竞成单云波胡志清井莹莹杨吉成
- 关键词：血管生成素-1腺病毒载体RT-PCR法血管形成
- 文献传递
- 腺病毒介导的ING4和IL-24共表达对肝癌的抑瘤增效和化疗增敏效应及分子机制
- 目的:
构建ING4和IL-24双基因共表达腺病毒载体/(Ad-ING4-IL-24/),研究其对肝癌的抑瘤增效和化疗增敏效应及分子机制。
方法:
分别以pGEZ-Term、pAdTrack...
- 谢宇锋
- 关键词：ING4IL-24腺病毒肝癌化疗增敏
- 文献传递
- 新生大鼠嗅鞘细胞在再生丝素膜上的生长被引量：4
- 2004年
- 目的 观察新生大鼠嗅鞘细胞在再生丝素膜上的生长情况 ,探讨再生丝素膜在嗅鞘细胞移植修复脊髓损伤中成为细胞培养基质的可能性。方法 采用静置贴壁培养法体外培养分离的新生大鼠嗅鞘细胞 ,免疫酶和免疫荧光方法染色鉴定 ,观察在再生丝素膜上嗅鞘细胞的生长 ,并用MTT法测定细胞生长曲线。结果 再生丝素膜对新生大鼠嗅鞘细胞的贴壁能力和形态未见明显改变 ,也未见明显毒性 ,并能支持细胞正常生长 ,呈现正常的生长繁殖曲线。结论 再生丝素膜对新生大鼠嗅鞘细胞具有良好的细胞相容性。
- 徐明杨吉成盛伟华谢宇锋李明忠唐天驷
- 关键词：再生丝素丝素膜嗅鞘细胞
- 非小细胞肺癌检测标志物、组合物、试剂盒
- 本申请公开了一种非小细胞肺癌检测标志物、组合物、试剂盒。本申请的药物组合物，包括微肽467MP的抑制剂，所述微肽467MP的氨基酸序列包括如SEQ ID NO.1所示。本申请提供的微肽467MP可以作为非小细胞肺癌诊断和...
- 赵军童新陈俊崔源李畅丁成徐春具晟谢宇锋
- 着丝粒蛋白K调控YAP1对结直肠癌细胞增殖和侵袭迁移的影响被引量：3
- 2021年
- 目的探讨着丝粒蛋白K(CENPK)在结直肠癌组织中的表达及临床意义并探索CENPK与结直肠癌细胞生物学功能间的关系。方法采用实时定量PCR(qPCR)法检测43对结直肠癌组织和正常组织及结直肠癌细胞和人正常肠黏膜上皮细胞的CENPK水平,分析CENPK水平与结直肠癌临床病理特征的关系,选择CENPK低表达的结直肠癌细胞转染pcDNA3.1/CENPK质粒进行过表达CENPK处理,选择CENPK高表达的结直肠癌细胞转染si-CENPK进行敲减CENPK处理。采用CCK-8法、EdU实验、Transwell侵袭实验和划痕实验检测细胞增殖、DNA合成及侵袭迁移能力的变化情况,Western blotting检测Yes相关蛋白1(YAP1)和上皮间质转化(EMT)相关指标的蛋白水平。结果结直肠癌组织的CENPK水平高于正常组织(P<0.05),且其水平与肿瘤大小、脉管侵袭和淋巴结转移有关(P<0.05)。体外实验表明,干扰CENPK表达后,结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力减弱;而过表达CENPK则会促进结直肠癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。干扰CENPK可下调YAP1水平而过表达CENPK可上调YAP1水平进而影响EMT相关蛋白的表达。YAP1过表达部分恢复CENPK沉默对细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的抑制作用。结论CENPK在结直肠癌组织中异常高表达,可通过调控YAP1来促进人结直肠癌细胞的增殖、EMT、迁移和侵袭,CENPK/YAP1轴在结直肠癌防治中有一定价值。
- 周琳龚莲孔丹丹谢宇锋陶敏
- 关键词：结直肠癌上皮间质转化
- 人腺病毒介导白细胞介素24对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及免疫功能影响的研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究腺病毒介导白细胞介素24(Ad-hIL-24)基因对H22肝癌荷瘤小鼠的抑瘤作用及其对免疫功能的影响。方法取16只BALB/C小鼠,其中4只未致瘤,12只BALB/C小鼠致瘤后随机分为3组:PBS组、5-氟脲嘧啶(5-Fu)组和Ad-hIL-24组。PBS组和Ad-hIL-24组(1×107pfu)隔日用药,共注射5次;5-Fu组注射5-Fu,20μg/kg,连续注射5d,停药2d后,再连续注射5d。2周后,称质量,眼眶取血,处死后取瘤体、脾脏、胸腺,检测抑瘤率、胸腺指数、脾脏指数、白细胞总数及淋巴细胞、单核细胞、中性粒细胞数。结果Ad-hIL-24组与5-Fu组的抑瘤率分别为45.08%和52.11%,两者抑瘤效果差异无统计学意义(P>0.05),而与PBS组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。与5-Fu组相比,Ad-hIL-24组的胸腺指数、脾脏指数、外周血白细胞总数、淋巴细胞及单核细胞数均增加,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与正常未致瘤组比较,Ad-hIL-24组中性粒细胞显著增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Ad-hIL-24可以抑制小鼠H22肝癌的生长,并对机体免疫功能无抑制作用。
- 汪小华缪竞诚盛伟华谢宇锋杨吉成
- 关键词：抑瘤免疫功能
- 人lamda3干扰素(hIFN-λ3)基因克隆及表达被引量：1
- 2005年
- 目的构建表达hIFN-λ3基因的真核表达载体,并在COS-7细胞中表达具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白。方法用口腔滤泡炎病毒VSV刺激A549人肺腺癌细胞,抽提总RNA,经RT-PCR获得全长cDNA,与pcD-NA3.1/myc—his(-)A真核表达载体连接,构建重组体pcDNA3.1A-hIFN-λ3,并在COS-7细胞中进行表达,采用微量细胞病变抑制试验研究表达产物的抗病毒活性。结果经PCR和限制性酶切鉴定以及DNA测序确证重组入载体中的基因片段不仅方向正确,而且确为hIFN-λ3,与GeneBank报告序列完全一致,并成功地在COS-7细胞中瞬时表达了具有抗病毒活性的rhIFN-λ3蛋白。结论该研究成功地克隆出hIFN-λ3基因编码序列,并在COS-7细胞中获得瞬时表达,证明了rhIFN-λ3蛋白具有抗病毒活性,为今后干扰素的基因治疗奠定了基础。
- 马丽丽王建红盛伟华谢宇锋缪竞诚杨吉成
- 关键词：RT-PCR基因克隆COS-7细胞
