谢志萍
- 作品数：56 被引量：401H指数：13
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 急性下呼吸道感染患儿喘息发生的相关因素分析被引量：13
- 2012年
- 目的探讨急性下呼吸道感染患儿发生喘息的危险因素。方法对1 165例急性下呼吸道感染患儿的临床资料进行单因素及多因素Logistic回归分析。结果单因素分析显示急性下呼吸道感染患儿的年龄、是否为特应征体质、呼吸道合胞病毒(RSV)、鼻病毒(HRV)感染、性别与喘息发生有关;进一步多因素Logistic回归分析示发病年龄小、特应征体质、RSV、HRV感染、男性为发生急性下呼吸道感染喘息的高危因素。结论对于年龄小、特应征体质、RSV、HRV感染、男性的急性下呼吸道感染患者发生喘息的风险性高,应重点评估及合理控制。
- 彭力张兵段招军钟礼立谢志萍侯云德高寒春肖倪光周琼华梁沫
- 关键词：呼吸道感染喘息
- 急性下呼吸道感染住院患儿多瘤病毒检测及临床研究被引量：4
- 2010年
- 目的了解多瘤病毒WU(WUPyV)和多瘤病毒KI(KIPyV)在急性下呼吸道感染住院患儿中的感染现状及特征。方法收集2007年9月至2008年3月长沙地区773份急性下呼吸道感染住院儿童鼻咽抽吸物样本,采用巢式聚合酶链反应(nested PCR)扩增方法进行WUPyV和KIPyV基因检测,并将PCR阳性产物测序,将所测序列在GenBank中进行比较分析。结果 773例样本中,多瘤病毒阳性53例(6.8%),其中WUPyV 39例(5.0%),KIPyV14例(1.8%)。所测得的核苷酸序列与GeneBank中已知的WUPyV与KIPyV序列同源性分别在93%～100%、95%～100%。结论 WUPyV和KIPyV可能是儿童急性下呼吸道感染中较重要病原之一,且与其他病毒引起的儿童下呼吸道感染存在相关性。
- 肖霓光张兵段招军谢志萍钟礼立高寒春丁小芳李嘉宋靖荣侯云德
- 关键词：呼吸道感染多瘤病毒儿童
- 2012年4月至2013年3月期间长沙地区急性下呼吸道感染住院儿童的病毒病原学分析
- 目的:了解2012年4月至2013年3月长沙地区急性呼吸道感染患儿的病毒感染情况及流行趋势,监测其发展走向,可以为临床治疗提供依据.方法:利用实时荧光定量PCR方法,对湖南省人民医院儿科医学中心收集的2012年4月至20...
- 彭颖高寒春钟礼立张兵黄寒谢乐云林琳段招军熊洁谢志萍
- 关键词：急性呼吸道感染儿童患者病毒病原学
- 人博卡病毒VP2蛋白的原核表达及血清学检测方法的建立被引量：3
- 2012年
- 目的获得高表达量的人博卡病毒（HBoV1、HBoV2）VP2蛋白，建立血清学检测方法。方法按照大肠埃希菌密码子使用偏性，对HBoV1、HBoV2VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化合成。将合成的目的基因克隆至表达载体pET30a，构建重组表达质粒pET30a-VP2，转化大肠埃希菌BL21（DE3），使用IPTG诱导表达并摸索最佳表达条件；粗提取蛋白进行Ni亲和层析纯化后建立间接酶联免疫吸附试验（ELISA），进行临床血清标本筛查，分析人群HBoV1、HBoV2感染情况。结果优化合成的HBoV1、HBoV2VP2基因正确连接至pET30a载体，开放阅读框正确，用1mmol／LIPTG过夜诱导表达（25℃）得到高表达量的VP2蛋白，目的蛋白主要以包涵体的形式存在。粗提取蛋白经Ni—NTA亲和层析，在pH4．5时获得较理想的纯化蛋白，以其为抗原建立ELISA检查方法，筛查临床血清标本IgG抗体水平，结果显示健康儿童HBoV1阳性率为62．2％，HBoV2阳性率为55．5％，混合感染率为37％。结论本研究成功将H-BoV1、HBoV2VP2衣壳蛋白基因编码区序列进行优化，得到了较高的蛋白表达量，所建立的ELISA法可以应用于HBoV1、HBoV2人群血清流行病学调查。
- 蒿叶霞高基民金玉李晓乐李金松谢志萍敖元云陈惜倩陈克娜段招军
- 关键词：人博卡病毒密码子酶联免疫吸附试验
- 多重实时荧光定量PCR检测人博卡病毒的价值
- 目的建立多重实时荧光定量PCR检测人博卡病毒1-3(HBoV1-3)的方法 ,与普通PCR比较;运用该方法对急性下呼吸道感染(ALRTI)住院儿童的鼻咽抽吸物(NPAs)标本进行HBoV检测及测序分型,结合临床资料进行分...
- 张菲丁小芳林琳熊洁彭颖王娟段招军张兵钟礼立谢志萍高寒春肖霓光曾赛珍赵辛彭力
- 人偏肺病毒DNA疫苗的构建和小鼠免疫反应的研究被引量：3
- 2009年
- 目的构建人偏肺病毒（hMPV）DNA疫苗，小鼠免疫后评价其细胞和体液免疫水平。方法利用PCR方法，从hMPV的cDNA中扩增融合蛋白FATM（缺失跨膜区）基因和基质蛋白M基因，构建DNA疫苗pcDNA3．1His．FATM和pcDNA3．1His—M，瞬时转染后用WesternBlot和间接免疫荧光方法检测F、M蛋白表达。疫苗肌内注射免疫小鼠，ELISA和ELISPOT方法分别检测血清IgG抗体和小鼠脾细胞CTL水平。结果WesternBlot和间接免疫荧光（IFA）方法证明构建的疫苗可表达FATM和M蛋白。pcDNA3．1His—FATM单独免疫小鼠，血清抗体滴度为1：44；与pcDNA3．1His-M联合免疫后，血清抗体滴度为1：64。ELISPOT检测证明，联合免疫组小鼠脾细胞产生IFN．7的效应CD8＋T细胞数为42±8．9，高于单独免疫组32±7．4的水平。结论DNA疫苗pcDNA3．1His—FATM可以诱导产生特异性的体液和细胞免疫，与pcDNA3．1His-M联合免疫，可以提高免疫水平。
- 刘文培郑丽舒段招军谢志萍张骞张万菊侯云德
- 关键词：变性肺病毒疫苗DNA免疫抗体生成
- Taqman荧光定量RT—PCR在呼吸道感染患者临床标本非SARS冠状病毒检测中的应用被引量：1
- 2013年
- 目的建立检测四种常见人非SARS冠状病毒核酸特异的快速、敏感的TaqManqRT—PCR检测方法，应用于急性呼吸道感染患儿的感染分析。方法分别应用TaqManqRT—PCR与普通RT—PCR平行检测248份呼吸道标本，对方法的灵敏性、特异性和稳定性以及临床标本的适用性进行比较评价，阳性标本以体外转录RNA为标准品进行病毒载量定量。结果本方法可对HKU1、NL63、229E、OC43四种冠状病毒进行特异性诊断，与其他病毒无交叉反应，检测灵敏度可达10拷贝／μl，检测线性范围可达10^1～10^8拷贝／μl，248份标本中HKU1、NL63、229E、OC43阳性率依次为1．2％，0．8％，1．2％，1．6％，其中OC43荧光RT—PCR法检出率高于普通RT—PCR，其余三种病毒两种方法检测结果一致。非SARS冠状病毒阳性标本均检出于12月至次年5月。结论建立的TaqManRealtimeRT-PCR法具有特异性强、灵敏性高的特点，是开展非SARS冠状病毒的临床检测与疾病监测的有效技术手段。
- 孙亚萍周杰英曹海燕谢志萍段招军
- 关键词：冠状病毒属荧光抗体技术
- 新型冠状病毒614D和614G假病毒生物学特性研究
- 2022年
- 目的利用HIV慢病毒包装系统构建新型冠状病毒(2019 novel coronavirus,2019-nCoV)原始株614D和突变株614G假病毒,并初步研究其生物学特性。方法将重组表达质粒pCDNA3.1-614D和pCDNA3.1-614G分别与慢病毒质粒psPAX2和pLenti CMV Puro LUC瞬时共转染293T细胞,72 h后收集上清,进行20%蔗糖垫层超速离心,检测假病毒的滴度、形态、S蛋白表达和中和活性。结果间接免疫荧光检测可见S蛋白特异性荧光,Western blot分析可见2019-nCoV 614D和614G假病毒S蛋白表达,透射电镜下可见假病毒颗粒具有明显刺突。614D和614G假病毒的滴度分别为1.12×10^(4)和2.52×10^(4) TCID_(50)/ml,均能够中和S蛋白兔多克隆抗体,表明假病毒具有特异性。结论本研究成功构建了2019-nCoV 614D和614G假病毒,为建立基于假病毒的体外中和抗体检测平台奠定基础。
- 麻粉莲雒晓艺王超宋敬东谢志萍丛姗姗黄益曼郑丽舒
- 关键词：新型冠状病毒假病毒中和活性
- 2007年7月-2011年8月湖南地区急性呼吸道下感染患儿中腺病毒型别的监测
- 目的了解湖南地区急性下呼吸道感染患儿腺病毒(ADV)感染状况及不同的腺病毒型别的流行趋势。方法 2007年9月-2011年8月,利用聚合酶链反应(PCR),对湖南省人民医院儿科医学中心收集的因急性呼吸道感染住院的患儿鼻咽...
- 谢乐云高寒春钟礼立张兵肖霓光周琼华张菲赵辛段招军谢志萍
- 重症腺病毒肺炎与难治性肺炎支原体肺炎临床特征比较
- ：探讨和比较儿童重症腺病毒肺炎和难治性肺炎支原体肺炎的临床特征.方法：回顾性分析2007年9月至2010月8月在我院儿科收治的65例重症腺病毒肺炎和28例难治性支原体肺炎患儿的临床资料,对其临床特点以及辅助检查,纤维支气...
- 谢乐云谢志萍高寒春钟礼立张兵黄寒梁沫肖霓光林琳彭力段招军
- 关键词：难治性肺炎支原体肺炎儿童患者
