贺晓萌
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：厦门大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金厦门市科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学理学医药卫生更多>>
- 基于Hsp90 ATPase活性的抑制剂筛选模型研究被引量：4
- 2010年
- 热休克蛋白90(Heat shock protein,Hsp90)作为分子伴侣,参与调控肿瘤细胞多条信号通路,对肿瘤细胞生长有重要作用.以pGEX-4T-1为载体,构建了Hsp90表达载体于宿主大肠杆菌中表达.通过孔雀绿磷钼酸铵-无机磷检测法,测定异源表达的Hsp90 ATPase活性.实验得出Hsp90对ATP的米氏常数(Km)为369.1μmol/L,在Hsp90和ATP浓度分别为0.18,1 mmol/L时转换效率常数(kcat)为1.6 min-1,最大反应速率(Vmax)为1.0μmol/(L.min).基于该方法,建立Hsp90 ATPase活性抑制剂筛选模型,以Geldanamycin和Radicicol为阳性对照,发现Rifamycin、Rugulosin及My-coE也有较强的Hsp90 ATPase抑制活性.该方法可用于筛选抗肿瘤候选化合物的研究,同时也可为具有ATPase活性蛋白的抑制剂筛选提供参考.
- 陈俊杰郭秋菊贺晓萌杨世新陈澄张连茹
- 关键词：PGEX-4T-1HSP90ATPASE活性
- Rugulosin:潜在的Hsp90抑制剂
- ＜正＞研究发现Hsp90在肿瘤细胞内具有较高的表达量,并参与调控多种原癌基因相关蛋白(如Bcr-abl,Akt,C-Raf等的代谢.寻找Hsp90的抑制剂已成为抗肿瘤药物研发的重要方向.Rugulosin最初分离自Pen...
- 陈俊杰于淼王若鹏杨世新贺晓萌黄恋谢忠张连茹
- 关键词：HSP90抑制剂
- 文献传递
- Rugulosin对N-Hsp90的抑制与结合作用被引量：3
- 2011年
- 研究表明,来源于真菌的Rugulosin对热休克蛋白90(Hsp90)的三磷酸腺苷酶(ATPase)活性有较强的抑制作用.本文通过Western Blot实验发现,Rugulosin对Hsp90的客户蛋白Akt和Raf-1具有一定的降解作用.进一步应用荧光、ForteBio Octet、圆二色和紫外-可见吸收等波谱法研究Rugulosin与Hsp90 N端的ATP结合结构域(N-Hsp90)的相互作用机制发现,Rugulosin与N-Hsp90之间存在较强的相互作用,二者通过氢键等作用力形成静态复合物,二者间的距离约为3.4 nm.其解离常数KD由荧光实验和ForteBio Octet实验计算,分别为22.4和85.9μmol/L;Rugulosin使N-Hsp90的α-螺旋含量由15.0%降至11.6%;紫外-可见吸收光谱实验结果同样表明,Rugulosin使N-Hsp90的二级结构发生了改变.该研究对于Rugulosin的进一步开发以及将其作为分子探针进行与Hsp90相关的信号通路的研究具有重要的意义.
- 陈俊杰易玉婷于淼薛少龙熊茜茜贺晓萌张连茹
- 关键词：HSP90荧光光谱圆二色光谱表面等离子体共振
