赵志
- 作品数：8 被引量：7H指数：2
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- 5-杂氮-2′-脱氧胞苷降低了乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外迁移能力被引量：2
- 2010年
- 目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对高转移性人乳腺癌MDA-MB-231细胞体外迁移能力的作用及可能的机制。方法实验分为对照组与5-Aza-CdR处理组,分别通过Transwell趋化迁移及划痕实验、半定量逆转录PCR(SqRT-PCR)、甲基化特异性PCR(MSP)等方法检测MDA-MB-231细胞的体外迁移能力、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)与CXC趋化因子受体-4(CXCR4)基因表达、BRMS1与CXCR4启动子区甲基化状况。结果对照组与处理组细胞穿过Transwell聚碳酸酯滤膜的数量分别为1 290.00±214.64与673.00±44.00,处理组细胞穿膜数量明显减少(P<0.05);24、36、48 h时间点对照组与处理组细胞划痕愈合率分别为20.34±0.69、59.31±0.38、91.77±0.13与20.19±0.67、49.32±0.24、69.47±0.46,其中36 h与48 h时间点处理组愈合率明显降低(P<0.05);对照组与处理组BRMS1的相对于内参GAPDH的灰度值(IDV)分别为0与0.39±0.001,处理组BRMS1 mRNA表达明显上调(P<0.05),5-Aza-CdR使BRMS1启动子区甲基化的CpG岛B完全去甲基化,对照组与处理组CXCR4的相对于内参GAPDH的IDV分别为0.58±0.003与0.58±0.01,两组比较差异无统计学意义(P>0.05),CXCR4启动子区CpG岛1的非甲基化状态亦无明显改变。结论 5-Aza-CdR通过去甲基化机制重新激活肿瘤转移抑制基因BRMS1的表达,从而降低了MDA-MB-231细胞体外迁移能力。
- 沈三弟吴爱国赵志
- 关键词：基因甲基化迁移
- 5-杂氮-2′-脱氧胞苷对实验性乳腺癌肺转移的影响
- 2010年
- 目的探讨5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对乳腺癌MDA-MB-231细胞实验性肺转移的影响及可能的机制。方法将MDA-MB-231细胞分为对照组与5-Aza-CdR处理组,通过半定量RT-PCR(SqRT-PCR)与甲基化特异性PCR(MSP)方法检测两组细胞的乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1),CXC趋化因子受体-4(CXCR4)基因的mRNA表达及启动子区甲基化的状况。分别将两组细胞通过边缘尾静脉注射至BALB/c nu/nu裸鼠体内(每组5只)。5周后,用荧光定量RT-PCR(FqRT-PCR)检测裸鼠肺组织内的目的基因HPRT及内参GAPDH的mRNA丰度。结果对照组和处理组细胞的BRMS1相对灰度值(IDV)分别为0与0.39±0.001,处理组BRMS1 mRNA表达较对照组明显上调(P<0.05),5-Aza-CdR使BRMS1启动子区甲基化的CpG岛B完全去甲基化;CXCR4相对IDV分别为0.58±0.003与0.58±0.01,两组间差异无统计学意义(P>0.05),CXCR4启动子区CpG岛1的非甲基化状态亦无明显改变。对照组与处理组细胞的裸鼠肺脏HPRT和GAPDH的Ct值分别为:24.75±1.55,16.19±0.69与27.61±1.67,17.48±0.96,2-ΔΔCt=0.34,处理组裸鼠肺脏HPRTmRNA丰度明显低于对照组,肺组织内转移癌较少。结论 5-Aza-CdR通过去甲基化机制重新激活肿瘤转移抑制基因BRMS1的表达,从而降低了MDA-MB-231细胞实验性肺转移能力。
- 沈三弟吴爱国赵志
- 关键词：乳腺肿瘤基因甲基化
- Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞后的体外实验研究
- 2010年
- 目的:探讨Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞后对MCF-7细胞的影响。方法:利用脂质体将真核表达载体pIRES2-EGFP-Noxa瞬时转染至乳腺癌MCF-7细胞。通过RT-PCR检测转染后mRNA的表达情况。MTT比色法测定细胞增殖的抑制。Hoechst33342检测细胞的凋亡情况。结果:Noxa基因转染后在乳腺癌MCF-7细胞中成功表达,其转染后24、48、72h后mRNA表达量逐渐增高。Noxa基因的表达使得乳腺癌MCF-7细胞出现增殖抑制,其24、48、72h抑制率之间的差异具有显著性(P<0.05)。Hoechst33342染色显示Noxa基因转染后细胞出现凋亡,其24、48、72h凋亡率与阴性对照组相比,差异具有显著性(P<0.05)。结论:Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞后能够抑制细胞增殖并促进其凋亡。
- 赵志吴爱国沈三弟
- 关键词：乳腺肿瘤转染
- Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制和促凋亡作用
- 乳腺癌的发生发展是一个多基因、多步骤的演变过程。据资料统计,我国乳腺癌发病率占全身各种恶性肿瘤的7—10%,随着人口城市化的加速,乳腺癌发生率及病死率有逐年上升的趋势,特别在沿海城市,发病率较以前有明显的增长,是严重影响...
- 赵志
- 关键词：乳腺癌转染凋亡
- 老年特发性膜性肾病患者临床特点及初始治疗效果分析
- 2024年
- 目的探讨老年特发性膜性肾病(IMN)患者的临床特点及初始治疗效果。方法回顾性分析年龄≥60岁,肾活检证实为膜性肾病住院患者的临床特点并分析随访1年的治疗效果。结果本研究共纳入91例老年IMN患者,男性51例(56.0%),女性40例(44.0%),年龄中位数为67岁,尿蛋白肌酐比值(uPCR)中位数为4454.3 mg/g,尿白蛋白肌酐比值(uACR)中位数为2258.5 mg/g,24 h尿蛋白值中位数为5098.2 mg/24 h,24 h尿白蛋白值中位数为2800.6 mg/24 h,估算肾小球滤过率(eGFR)平均值为(60.5±20.4)ml·min^(-1)·1.73m^(-2)。肾活检后1年获得缓解(包括完全缓解和部分缓解)共61例(67.0%)。其中缓解组的uPCR、uACR均高于不缓解组(5462.5比2271.1 mg/g,P<0.001;2774.4比1320.0 mg/g,P=0.001),同时缓解组的24 h尿蛋白值和24 h尿白蛋白值均高于不缓解组(6526.4比3210.4 mg/g,P=0.002;3067.7比2102.4 mg/g,P=0.007),且缓解组使用免疫抑制剂治疗的比例高于不缓解组(85.2%比33.3%,P<0.001)。对不同治疗方案进行两两比较,激素联合环磷酰胺、激素联合钙调神经磷酸酶抑制剂或激素联合吗替麦考酚酯3者的缓解率均高于保守治疗(88.2%比31.0%,P=0.001;80.0%比31.0%,P<0.001;100.0%比31.0%,P=0.007),而免疫抑制治疗3组两两比较缓解率差异无统计学意义(P>0.05)。进一步分析发现激素联合环磷酰胺、激素联合钙调神经磷酸酶抑制剂或激素联合吗替麦考酚酯与保守治疗相比,3组的uPCR、uACR和血清胱抑素C(CysC)均高于保守治疗组,血清总蛋白和白蛋白均低于保守治疗组(P<0.05)。结论老年IMN患者多数合并症较多,对于尿蛋白水平较高的高危患者早期给予免疫抑制治疗可获得更高的初始尿蛋白缓解率。临床上需根据患者临床特点,衡量免疫抑制治疗的利弊,更好地为老年IMN患者实施个体化治疗。
- 梁锦秀夏方肖郝文科胡文学吴燕华余枫赵志刘伟
- 关键词：肾病肾病综合征特发性膜性肾病免疫抑制治疗
- Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制和促调亡作用
- 乳腺癌的发生发展是一个多基因、多步骤的演变过程。据资料统计,我国乳腺癌发病率占全身各种恶性肿瘤的7—10％,随着人口城市化的加速,乳腺癌发生率及病死率有逐年上升的趋势,特别在沿海城市,发病率较以前有明显的增长,是严重影响...
- 赵志
- 关键词：乳腺癌发病机制基因治疗
- 文献传递
- 5-杂氮-2′-脱氧胞苷对乳腺癌MCF-7细胞体外迁移能力的影响及机制探讨
- 2010年
- 目的观察5-杂氮-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对非浸润性人乳腺癌MCF-7细胞体外迁移能力的影响,并探讨其机制。方法将MCF-7细胞分两组,观察组用含5.0μM5-Aza-CdR的培养液处理4 d,对照组加入等体积的DMSO。采用细胞划痕实验观察细胞体外迁移能力,采用RT-PCR、甲基化特异性PCR(MSP)法检测CXC趋化因子受体-4(CXCR4)、乳腺癌转移抑制基因-1(BRMS1)mRNA及其启动子区甲基化状态。结果与对照组比较,观察组36、48 h细胞划痕愈合率明显升高,MCF-7细胞的CXCR4 mRNA表达量明显增加(P<0.05);5-Aza-CdR使CXCR4启动子区甲基化的CpG岛1完全去甲基化,BRMS1启动子区CpG岛B的非甲基化状态亦无明显改变。结论 5-Aza-CdR增强了MCF-7细胞的体外迁移能力,可能与其去甲基化机制上调了促转移基因CXCR4表达有关。
- 沈三弟吴爱国邵国利赵志
- 关键词：趋化因子受体-4基因甲基化
- Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制和促凋亡作用被引量：5
- 2010年
- 目的探讨Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制和促凋亡作用。方法利用脂质体将真核表达载体pIRES2-EGFP-Noxa瞬时转染至乳腺癌MCF-7细胞,通过RT-PCR检测转染后Noxa基因mRNA的表达,Western blot检测转染后蛋白的表达,MTT比色法测定细胞增殖的抑制,流式细胞仪检测细胞的凋亡和细胞周期的变化,Hoechst33342染色检测细胞的凋亡情况。结果 Noxa基因转染后在乳腺癌MCF-7细胞中成功表达。转染后mRNA及蛋白表达持续上升,其转染后24h、48h、72hmRNA的相对灰度值分别为(0.347±0.031)、(0.703±0.041)、(1.044±0.033),差异具有统计学意义(P<0.05)。转染24h、48h、72h后蛋白表达的相对灰度值为(1.171±0.086)、(1.013±0.088)、(0.886±0.063),差异具有统计学意义(P<0.05)。Noxa基因的表达使得乳腺癌MCF-7细胞出现增殖抑制,其24h、48h、72h抑制率分别为(23.9±4.2)%、(36.6±3.0)%、(47.0±3.3)%,差异具有统计学意义(P<0.05)。流式细胞仪检测显示MCF-7细胞DNA合成受到抑制,细胞周期主要抑制在G0/G1期。其转染24h、48h、72h的G0/G1期分别为(68.1±2.5)%、(72.6±1.5)%、(75.6±0.9)%,与阴性对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05);其24h、48h、72h凋亡率分别为(11.5±0.9)%、(19.6±0.8)%、(25.4±0.7)%,组间差异有统计学意义(P<0.05)。Hoechst33342染色显示Noxa基因转染后细胞出现凋亡,其24h、48h、72h凋亡率分别为(7.3±4.1)%、(16.8±3.3)%、(23.8±2.3)%,与阴性对照组相比,其差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 Noxa基因转染乳腺癌MCF-7细胞后能够抑制细胞增殖并促进其凋亡。
- 赵志吴爱国沈三弟
- 关键词：乳腺癌转染凋亡
