郑敏巧
- 作品数：25 被引量：84H指数：6
- 供职机构：温州医科大学附属温岭医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划温岭市科技局基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人博卡病毒外壳蛋白（VP3）的重组表达及间接ELISA检测方法的建立被引量：1
- 2007年
- 人博卡病毒（Human Bocavims）是2005年Tobias Allander等从小儿下呼吸道感染分泌物中分离到的新细小病毒，我们曾报道中国分离的人博卡病毒（WLL-1株）的全基因组序列。为了进一步检测分析人博卡病毒感染情况，我们重组表达了人博卡病毒WLL-1株的外壳蛋白（VP3）并建立了间接ELISA检测方法。
- 林峰曾爱平郑敏巧金大智吴锋
- 关键词：间接ELISA检测人博卡病毒外壳蛋白小儿下呼吸道感染
- 2006-2010年628株铜绿假单胞菌的临床分离率及耐药性分析被引量：6
- 2011年
- 目的了解医院铜绿假单胞菌的耐药变化,作为抗菌药物合理使用和有效控制的参考依据。方法从不同临床标本中分离出628株铜绿假单胞菌,并采用琼脂糖稀释法对其耐药性进行回顾性分析,获得不同抗菌药物耐药率。结果在获得的菌株中,痰液中检出率最高,为80.10%;5年内,该菌对12种抗菌药物的耐药率均呈显著性增长,其中仅有亚胺培南耐药率<20.0%。结论亚胺培南是控制该菌的首选药物;临床医师根据耐药变化,合理选择抗菌药物,控制耐药菌株的流行及医院感染。
- 郑敏巧王焰兵朱林丁玎陈剑锋黄恩佩曾爱平
- 关键词：铜绿假单胞菌抗菌药物耐药
- 人博卡病毒母婴感染的临床前瞻性研究被引量：8
- 2007年
- 目的调查本地区人博卡病毒母婴感染情况。方法用ELISA检测母婴血清人博卡病毒IgG抗体及用荧光定量PCR检测母婴血清人博卡病毒DNA。结果316例母婴配对标本中,孕妇血清人博卡病毒IgG抗体阳性的有127例,阳性率为40.20%(127/316);新生儿脐带血人博卡病毒IgG抗体阳性有93例,阳性率为29.43%(93/316)。新生儿人博卡病毒IgG抗体阳性占母亲人博卡病毒IgG抗体阳性的百分比为73.23%(93/127)。母婴同时人博卡病毒IgG抗体阳性为93例。316例母婴配对标本人博卡病毒DNA均为阴性。结论人博卡病毒IgG抗体可从孕妇经胎盘传给新生儿,但是否存在人博卡病毒母婴垂直传播尚有待于进一步研究。
- 郑敏巧林峰郑美云陈弘曾爱平吴峰
- 关键词：疾病传播抗体病毒
- 二甲双胍治疗2型糖尿病合并高脂血症65例观察
- 2008年
- 郑敏巧饶高峰陈恩福
- 关键词：糖尿病合并高脂血症二甲双胍治疗动脉粥样硬化降血糖作用流变性
- 8.浙江地区青霉素耐药肺炎链球菌PBPs基因及氨基酸序列研究
- 本文揭示了对肺炎链球菌(SP)耐药机制的研究表明,三种高分子量的青霉素结合蛋白(penicillin-bindingproteinPBPs)PBP1A、PBP2B、PBP2X的变异是导致肺炎链球菌产生对青霉素耐药的主要原...
- 林峰郑敏巧曾爱平丁玎文思远王升启
- 关键词：肺炎链球菌青霉素耐药性
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- 博卡病毒VP2基因在昆虫细胞sf9中表达及临床标本筛查被引量：2
- 2009年
- 目的表达人博卡病毒（HBoV）vP2蛋白，用于临床标本HBoV的筛查。方法将VP2基因重组于杆状病毒基因组，重组的杆状病毒感染昆虫细胞sf9，用HA抗体进行Western Blot鉴定重组融合vP1蛋白表达。通过电镜观察重组蛋白颗粒。以vR2蛋白作为抗原对176例临床样本进行免疫印迹筛查。结果在昆虫细胞中vB蛋白的表达量约占细胞总蛋白的60％以上，VP2蛋白相对分子质量为60×10^3。电镜观察博卡病毒vP，蛋白形成病毒样颗粒（VLP），其大小在20nm左右；采用免疫印迹技术从临床标本中筛查出4例患者HBoV阳性，阳性率达到2.28％（4／176）。结论本研究成功的在昆虫细胞中表达了博卡病毒VR蛋白；表达vP2蛋白具有一定抗原性，为开展人博卡病血清学研究方法建立提供基础。
- 滕灵方林峰郑美云郑昌华吴锋曾爱平黄恩佩莫一涵郑敏巧李旭阳侯建毅
- 关键词：基因表达调控免疫印迹法
- 利用人支气管上皮细胞系分离和培养人博卡病毒被引量：4
- 2009年
- 目的研究人博卡病毒（HBoV）在呼吸道感染中致病性及机理。方法利用人支气管上皮细胞系进行HBoV分离及培养，通过电镜对培养细胞中HBoV的形态及感染细胞进行研究，并采用逆转录PCR（RT-PCR）方法，检测HBoV在细胞中转录产物mRNA，同时对扩增产物进行测序及分析。结果将含有HBoV阳性痰液标本无菌接种人支气管上皮细胞系，出现2例致使细胞发生明显的病变（CPE）。电镜观察在细胞质中散在六角形或圆形的病毒粒子，大小18-26nm之间，大部分是20nm。RT-PCR扩增产物经电泳检测与预期结果相符是295bp，扩增产物测序结果与GenBank中HBoV序列比较，核苷酸同缘性99％，氨基酸同缘性100％。结论HBoV感染人支气管上皮细胞后能够在该细胞内增殖，并产生特征性生物学改变。本研究为今后HBoV致病性及免疫应答谱研究奠定基础。
- 林峰滕灵方郑美云郑昌华吴锋李桦郑敏巧曾爱平黄恩佩莫一涵侯建毅
- 关键词：支气管上皮细胞细胞
- 幽门螺杆菌的培养及药物敏感试验分析被引量：10
- 2007年
- 目的分析温州地区幽门螺杆菌(Hp)临床分离株对多种常用抗幽门螺杆菌抗生素的药敏和耐药情况。方法收集我院2289例胃病患者的标本,取其胃黏膜活组织进行幽门螺杆菌培养,对培养到的Hp菌采用抗生素药敏试验纸片琼脂扩散法作药物敏感试验。结果Hp培养阳性率依次为消化性溃疡50.00%,活动性胃炎40.77%,胃癌31.87%,萎缩性胃炎17.92%。898例Hp阳性患者的药物敏感试验结果表明左氧氟沙星的耐药率最低,暂未发现耐药株,其次为庆大霉素(1.11%)、克拉霉素(13.14%)、羟氨苄青霉素(13.36%)、呋喃唑酮(32.29%),甲硝唑的耐药率最高(100%)。结论Hp感染与多种胃病关系密切,临床上对Hp感染的患者可选择左氧氟沙星、庆大霉素、克拉霉素、呋喃唑酮及羟氨苄青霉素治疗,不宜选用甲硝唑。
- 郑敏巧吴锋莫一涵曾爱平丁玎
- 关键词：药物敏感试验
- 检测人博卡病毒抗体间接酶联免疫吸附法的建立及临床应用被引量：1
- 2010年
- 目的建立间接酶联免疫吸附法（ELISA）检测人博卡病毒（HBoV）抗体，探讨其临床应用的可行性。方法以重组表达的HBoV融合蛋白VP2作为包被抗原，建立检测HBoV抗体的间接ELISA，优化该检测方法的最佳条件，观察其精密度、敏感度和特异性，并与荧光定量PCR方法对比检测40份临床样本，同时采用免疫印迹法（Westernblot）确认其符合率。结果所建立的间接ELISA最佳抗原包被浓度为2mg／L，酶标二抗工作浓度为1：5000，血清标本最佳稀释度为1：200。该方法平均批内变异系数为6．87％，平均批间变异系数为4．67％。40份临床样本间接ELISA检测结果与荧光定量PCR及免疫印迹结果一致，符合率100％。结论利用VP2融合蛋白作为抗原，建立的检测血清HBoV抗体间接ELISA方法特异性强、重复性好，可用于HBoV抗体的定量和定性检测。
- 林峰滕灵方郑敏巧郑昌华吴锋黄恩佩侯建毅
- 关键词：抗体酶联免疫吸附测定临床实验室技术
- 三种食源性致病菌的多重PCR检测
- 2007年
- 目的:建立一种痢疾志贺菌、沙门菌和单增李斯特菌的多重PCR诊断方法。方法:根据伤寒沙门菌VipR基因、痢疾杆菌侵袭性质粒抗原H(ipaH)基因和单增李斯特菌溶血素hlyA基因序列作为目的基因片段痢疾志贺菌、沙门菌和单增李斯特菌的特异性抗原基因序列,分别设计一对引物,优化各种工作条件,建立一种多重PCR诊断方法。结果:本法特异性好,敏感性可达104拷贝,整个实验过程在3 h～5 h内完成。结论:建立的方法在理论和实际应用上都有优越性,且一次可检测出三种病原菌,可用于临床诊断。
- 郑敏巧金大智刘琪琦曾爱平吴锋
- 关键词：多重PCR检测痢疾志贺菌沙门菌单增李斯特菌
