郝秀静
- 作品数：47 被引量：62H指数：4
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- 以转酮醇酶基因为靶标检测绵羊肺炎支原体的组合物、试剂盒和方法
- 本发明公开以转酮醇酶基因为靶标检测绵羊肺炎支原体的组合物、试剂盒和方法。本发明的组合物的检测靶标为绵羊肺炎支原体的转酮醇酶基因，可以针对该基因中的多种不同片段，并且通过实验验证了本发明的组合物可设计出多种不同具体组合情形...
- 李敏郝秀静金华马春骥王玉炯
- 文献传递
- 用于检测绵羊肺炎支原体的组合物、试剂盒和方法
- 本发明公开用于快速检测绵羊肺炎支原体的组合物、试剂盒和方法。本发明通过设计绵羊肺炎支原体的转酮醇酶基因的特异性引物、探针，完成了绵羊肺炎支原体的精确检测。本发明对检测过程中最佳反应时间与最佳反应温度、检测的特异性、敏感性...
- 李敏郝秀静金华马春骥王玉炯
- 文献传递
- 猪肺脏气道上皮干细胞的特异抗体筛选与抗原表达研究
- 2013年
- 猪肺脏气道上皮主要由基底细胞,克拉拉细胞,纤毛细胞,杯状细胞等上皮细胞类型组成,筛选猪气道上皮干细胞的相关特异性抗体,观察其特异抗原的表达,将有助于对猪气道上皮干细胞的分离、鉴定和生物学特性的研究。试验中,制备远端气道上皮细胞的冰冻切片与细胞爬片,利用免疫荧光染色法,分析不同物种来源的抗体对猪气道上皮细胞的免疫染色反应;同时利用Oct3/4、Sox2、CD133和SSEA-1等10种上皮干细胞相关抗体分析猪气道上皮干细胞表面抗原表达情况。通过试验,筛选出在猪气道上皮干细胞相关抗体,并发现气道组织冰冻切片未检测到这10种抗体相关的阳性细胞,而在细胞爬片中观察到CD49f和CD117阳性细胞数量较多。免疫荧光共染发现这些CD49f和CD117阳性细胞同时也表达基底细胞表面标记Keratin 14。这可能是正常情况下猪气道上皮干细胞数量极为稀少,表面抗原表达量低而不易检测到,在肺脏气道上皮受到外环境刺激时(如消化),上皮干细胞开始增殖以完成损伤修复作用发生数量上的增殖。综上所述,利用Keratin 14和CD49f或CD117(c-kit)双标染色法可以鉴定猪肺脏气道上皮干细胞的候选亚群来用于其生物学特性与功能的研究。
- 杨佳丽石娟马凌洁包少文郝秀静曾瑾李勇刘晓明
- 关键词：干细胞
- 猪肺炎支原体的免疫原蛋白及疫苗的研究进展被引量：3
- 2013年
- 猪肺炎支原体是引起猪支原体肺炎的主要病原,严重危害着养猪业的发展。本文综合国内外猪肺炎支原体主要免疫原及疫苗的研究进展,从而为猪肺炎支原体致病机理的进一步研究及该病的防治提供新思路。
- 崔娟娟郝秀静张斯民侯玉婷李敏
- 关键词：猪肺炎支原体疫苗
- 奶牛乳腺炎表皮葡萄球菌耐药性及生物被膜形成相关基因的研究被引量：7
- 2015年
- 目的在分离奶牛乳腺炎表皮葡萄球菌的基础上,分析表皮葡萄球菌的耐药性、生物被膜形成能力及生物被膜形成相关基因的特点,为研究表皮葡萄球菌生物被膜的形成及其毒力因子引起奶牛乳腺炎的发病情况及机制奠定基础。方法通过K-B药敏纸片法对分离的表皮葡萄球菌进行敏感性检测,用刚果红平板法筛选被膜阳性菌,结晶紫染色法检测生物被膜形成能力,利用激光共聚焦显微镜(CLSM)观察和分析生物被膜的形成形态,应运PCR法对ica AB、ica A、ica B、ica C、icaR、aap、bap、fbe、atl E、sig B、sar A和agr基因进行扩增。结果本实验采集了368份患奶牛乳腺炎的乳样,分离得到15株表皮葡萄球菌,产生物被膜阳性菌7株,检出率46.7%。分离株对青霉素的耐药性最高,对阿米卡星、头孢噻肟、林克霉素等的耐药性较强,但对环丙沙星和万古霉素的敏感性较高。形态学观察发现48 h时生物被膜厚度和结构更为复杂。bap、ica AB、aap、sar A、fbe、atl E、sig B和agr 8种基因在分离株中扩增出与预期大小一致的片段。结论本实验结果表明表皮葡萄球菌是引起奶牛乳腺炎的一种主要致病菌,其生物被膜阳性菌株比例较高,阳性菌株的耐药性明显高于被膜阴性菌,同时atl E、sig B、agr和fbe 4种毒力因子均存在于生物被膜阳性菌中。
- 朱娇玲乔霞李雪郝秀静周学章
- 关键词：奶牛乳腺炎表皮葡萄球菌生物被膜
- 甘草酸单克隆抗体的制备与ELISA方法的建立被引量：1
- 2016年
- 目的制备特异性的甘草酸单克隆抗体。方法通过活性酯法分别制备了甘草酸免疫抗原GA-KLH和包被抗原GA-OVA;用免疫抗原免疫Balb/c小鼠,采用间接竞争ELISA法筛选后,成功获得了能稳定分泌甘草酸单克隆抗体的杂交细胞株3D6;用阳性细胞株刺激小鼠,获得了高效价的、特异性很高的甘草酸单克隆抗体。结果经检测与甘草酸主要结构类似物甘草次酸的交叉反应率低于0.5%,与熊果酸、齐墩果酸等甘草酸结构类似物无交叉反应;将该方法应用于甘草样品实测,采用HPCL法验证,结果表明:所采用的ELISA分析方法测定的数据与HPLC分析方法有很好的相关性(r^2=0.9977)。结论为甘草酸ELISA快速检测试剂盒的开发奠定了良好的基础。
- 宋孚洋郝秀静张东涛马臣杰彭励丁晓莉
- 关键词：甘草酸单克隆抗体酶联免疫法甘草
- Ⅰ.提高玉米赖氨酸含量的研究;Ⅱ.玉米Zm401基因与花芽脱落的相关研究
- 本实验对具有优良农艺性状和较高配合力的玉米自交系X178，以及杂交组合X08/178、X04/178，剥取幼胚，进行组织培养，诱导胚性愈伤组织，筛选状态好的愈伤用于玉米的遗传转化。
将含有高赖氨酸蛋白基因AtM...
- 郝秀静
- 关键词：赖氨酸蛋白基因玉米遗传转化
- 文献传递
- 用于检测牛支原体的组合物、试剂盒和方法
- 本发明公开用于检测牛支原体的组合物、试剂盒和方法。本发明通过设计牛支原体的LppA基因的特异性引物、探针完成了牛支原体的精确检测，该引物探针组合能够做到牛支原体标准株及野生株种内的保守性以及牛支原体与其他致病菌种间的特异...
- 郝秀静李敏韩杨马春骥
- 甘草酸检测试剂盒的组装与效果评价
- 2015年
- 目的:研制甘草酸间接竞争酶联免疫试剂盒。方法:通过棋盘滴定法确定了抗原最佳包被浓度为1μg/m L,一抗稀释度为1:8000,并以此成功组装了甘草酸快速检测试剂盒。结果:使用试剂盒检测了甘草酸样品,并与HPLC测定结果进行对比,发现灵敏度有了显著提高,达到了纳克级别。试剂盒的回收率高于96%,变异系数低于4.5%。结论:开发出的试剂盒稳定性良好,不同批次产品间检测值没有显著差异,有效的缩短了检测时间和检测成本,为甘草酸快速检测提供了一种新方法。
- 宋孚洋张东涛郝秀静马臣杰彭励任树勇
- 关键词：甘草酸检测试剂盒酶联免疫吸附法
- 玉米成熟胚愈伤诱导及再生体系建立被引量：2
- 2014年
- 合适的受体材料是玉米成功转化的关键,本实验试图通过成熟玉米来诱导愈伤,为转化提供材料。选取生产上常用的几个玉米系为材料,参考相关文献,摸索组织培养条件将成熟胚诱导愈伤,来获得再生植株。
- 郝秀静张虹
- 关键词：玉米成熟胚愈伤诱导植株再生
