郝飞
- 作品数:74 被引量:293H指数:8
- 供职机构:贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金:贵州省农业攻关项目贵州省农业科技攻关项目贵州省科学技术基金更多>>
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- 猪细小病毒非结构蛋白NS1基因的克隆、序列分析及蛋白质结构预测被引量:8
- 2013年
- 根据GenBank登录的猪细小病毒NADL-2株和China株序列,利用Oligo 6.0软件设计1对扩增NS1全基因的特异性引物,对从贵州省安顺地区检测到的PPV的NS1基因进行扩增、克隆、测序、序列分析和蛋白质结构预测分析。测序结果表明,扩增的目的基因长度为1986bp,共编码659个氨基酸,其中NS1基因的1287、1288和1298位碱基发生了缺失,导致429、430和433位氨基酸发生缺失。系统发生树结果表明,本试验测序的NS1基因与NADL-2弱毒株处在同一进化分支;氨基酸同源性与NADL-2弱毒株和Kresse毒株最高,均为98.6%。蛋白质结构预测分析结果表明,非结构蛋白NS1的分子质量为75269.76u,理论等电点pI为7.25,不稳定系数为41.57,推测其为不稳定蛋白质;脂肪指数为73.58,总体平均亲水性为-0.565,推测该蛋白质是一种亲水性蛋白质;该蛋白质含有丰富的α-螺旋、β-折叠、β-转角和无规则卷曲,柔性区域较多,呈连续分布;非结构蛋白NS1无跨膜区和信号肽;预测非结构蛋白NS1含有3个N-糖基化位点、3个cAMP和cGMP依赖性蛋白激酶磷酸化位点、5个蛋白激酶C磷酸化位点、22个酪蛋白激酶Ⅱ磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点、8个N-肉豆蔻酰化位点、1个酰胺化位点及1个ATP/GTP结合位点基序A(P-环);该蛋白质抗原表位较多,存在10个主要的抗原表位。
- 刘建汤德元罗险峰曾智勇李春燕甘振磊王凤郝飞王洪光
- 关键词:猪细小病毒NS1基因克隆蛋白质结构预测
- 规模化猪场猪瘟净化措施的研究被引量:13
- 2013年
- 猪瘟是由猪瘟病毒引起的一种高度接触性和致死性病毒性传染病,该病流行广泛,发病率和死亡率较高,是危害我国乃至世界养猪业的主要疫病之一。近年来我国猪瘟的流行和发展呈现新的变化,呈散发流行且有上升趋势,临床表现趋于非典型化,常发生迟发型、温和型猪瘟及带毒母猪综合征,这使得规模化猪场猪瘟的防制变得更为复杂艰难。如何对规模化猪场的猪瘟进行监测和净化,是当前和今后一段时期规模化养猪急需解决的问题。本研究分别在贵州省贵阳市和思南县选取一个规模化猪场作为示范场,通过制定科学的猪瘟净化方案,结合一系列措施实施开展猪瘟净化工作。结果表明,该净化方案可以有效提高猪群的整体健康水平,创造相应的经济效益,并可达到净化示范猪场猪瘟的目的,值得推广应用。
- 郝飞汤德元罗险峰曾智勇李春燕甘振磊王凤刘建王洪光
- 关键词:规模化猪场猪瘟
- 猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪副嗜血杆菌混合感染的诊断被引量:4
- 2012年
- 为弄清贵州某场猪发病猪的死亡原因,采用流行病学调查、临床症状观察、病理解剖诊断和RT-PCR检测核酸确诊等方法,对该场猪发病猪死亡原因进行了诊断。结果表明:流行病学调查和剖检病理初步诊断该猪场发病猪疑似猪繁殖与呼吸综合征病毒和细菌混合感染,RT-PCR检测核酸确诊发病猪为猪繁殖与呼吸综合征病毒感染,细菌培养、分离和生化特性鉴定确诊为猪副嗜血杆菌。造成该猪场猪发病死亡的原因为猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪副嗜血杆菌混合感染所致。
- 刘建汤德元曾智勇罗险峰李春燕甘振磊王凤郝飞
- 关键词:猪繁殖与呼吸综合征
- 猪博卡病毒病原学及其检测技术的研究进展
- 2015年
- 猪博卡病毒(PBo V)是细小病毒科细小病毒亚科博卡病毒属的新成员,该病毒于2009年首次由瑞典学者从表现为多系统衰竭综合征(PMWS)的发病断奶仔猪体内分离鉴定获得。目前,猪博卡病毒作为新发现的病原,已成为许多国家兽医科研人员的研究热点。文章主要针对猪博卡病毒病原学和检测技术的研究进行综述,重点介绍猪博卡病毒病原学的研究进展、PCR检测技术、Real-time PCR检测技术、多重PCR检测技术、半巢式PCR检测技术、套式PCR检测技术、间接免疫荧光检测技术、LAMP检测技术和免疫学诊断方法。
- 李达韦国渠汤德元李春燕曾智勇郝飞刘建王洪光
- 关键词:病原学
- 一种可促进猪增重并提高免疫功能的中药添加剂
- 本发明公开了可促进猪增重并提高免疫功能的中药添加剂,组方为:何首乌1000g、贯众1000g、山楂2000g、麦芽2000g、陈皮1000g、神曲2000g、白芍2000g、黄芪2000g、杜仲2000g、怀山药2000...
- 汤德元陶玉顺李春燕曾智勇甘振磊郝飞刘建
- 文献传递
- 猪细小病毒病诊断技术研究进展被引量:7
- 2012年
- 猪细小病毒病是由猪细小病毒(PPV)感染引起的猪的重要传染病之一。该病主要感染母猪特别是初产母猪及血清学阴性经产母猪,导致母猪流产、产死胎、畸形胎、木乃伊胎及病弱仔猪等,而感染母猪本身无明显症状。该病呈地方性流行,严重地影响着养猪业的发展。由于猪细小病毒常与其他病毒如猪圆环病毒2型和猪繁殖与呼吸综合征病毒混合感染,导致断奶仔猪多系统衰竭综合征。临诊上本病与猪伪狂犬病、猪乙型脑炎和猪布鲁氏菌病的症状极为相似,故仅靠临诊确诊较为困难。目前对本病的诊断方法主要有临床诊断、病原学诊断、血清学诊断以及分子生物学诊断等。特别是分子生物学诊断方法以其灵敏度高、特异性强而被人们所重视。主要针对该病近年来诊断方法的研究进展进行阐述,从而为猪细小病毒病的诊断提供参考。
- 刘建汤德元罗险峰李春燕甘振磊王凤郝飞
- 关键词:猪细小病毒分子生物学诊断
- 规模化猪场主要病毒性腹泻病的临床表现及病理变化
- 2012年
- 对规模化猪场危害最大的病毒性腹泻病主要有轮状病毒感染、猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻3种。对于该类疫病,猪群有时单一感染其中的某一病毒致病,有时混合感染多种病毒致病,但这些传染病一旦在规模化猪场暴发,就很难得到有效控制,将会带来严重的经济损失。对规模化猪场的主要病毒性腹泻病的临床表现及病理变化进行了综述,以期为规模化猪场预防和控制该类疫病的发生提供一些参考依据。
- 郝飞罗险峰汤德元曾智勇李春燕甘振磊王凤刘建
- 关键词:规模化猪场病毒性腹泻病病理变化
- 猪伪狂犬病基因工程疫苗的研究进展被引量:6
- 2013年
- 猪伪狂犬病(PR)是由疱疹病毒目伪狂犬病毒引起的多种家畜和野生动物发病的一种急性传染病。猪感染后表现为仔猪神经症状、严重的呼吸道疾病以及母猪发生流产、死产和产仔数下降等症状。现阶段该病存在潜伏感染、高感染率和高发病率等特点,给其防治带来了巨大困难,同时给世界养猪业造成了巨大的损失。在该病的防治过程中,疫苗免疫接种起着至关重要的作用。本文对当今广泛应用的猪伪狂犬病基因工程疫苗的研究现状和进展进行综述,以期为猪伪狂犬病的预防、净化和根除提供参考。
- 郝飞汤德元曾智勇李春燕罗险峰甘振磊刘建王洪光
- 关键词:伪狂犬病病毒基因工程疫苗
- 规模化猪场主要细菌性疫病的流行病学调查被引量:23
- 2014年
- 为掌握现代规模化猪场主要细菌性疫病的流行状况,本研究运用临床诊断和实验室方法对贵州省10家规模化猪场的220份样本进行了检测及细菌鉴定,以实现对副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌、猪丹毒杆菌等常见病原菌的调查。结果表明:10家规模化猪场中副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、猪链球菌及猪丹毒杆菌的阳性率分别为25.5%、17.5%、31.5%、9.5%,说明这些规模化猪场存在的细菌性疫病主要由副猪嗜血杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和猪链球菌感染引起,且发病率高,死亡率上升,严重影响着规模化养殖业的发展,因此做好这些疫病的预防工作十分必要。
- 王洪光汤德元曾智勇罗险峰李春燕郝飞刘建李达
- 关键词:规模化猪场副猪嗜血杆菌胸膜肺炎放线杆菌猪链球菌猪丹毒杆菌
- 伪狂犬病病毒Guizhou-DY株gE基因主要抗原表位区原核表达及免疫原性研究
- 2013年
- 根据GenBank公布的伪狂犬病病毒GDSH株(EF552427)的gE基因序列设计1对特异引物,对伪狂犬病病毒Guizhou-DY分离株的gE基因进行PCR扩增,将扩增产物克隆到pMD19-T载体上,构建重组质粒pMD19-TgE636,经双酶切鉴定、核苷酸序列分析后,将gE基因主要抗原表位区亚克隆到pET-32a(+)原核表达载体上,成功构建原核表达质粒pET-32a(+)-gE636,并将其转化至BL21(DE3)中,诱导表达目的蛋白,表达产物经SDS-PAGE电泳、Western blot分析,得到了约42.7 ku的条带,与预期大小相符,进一步提取、纯化目的蛋白,将目的蛋白加入弗氏佐剂免疫小鼠,免疫后采血检测抗体,结果显示目的蛋白能诱导小鼠产生一定的抗体,该研究为伪狂犬病亚单位疫苗的研究奠定了基础。
- 郝飞汤德元李春燕曾智勇罗险峰甘振磊刘建王洪光
- 关键词:伪狂犬病病毒GE基因原核表达免疫原性