金永琴
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 供职机构：南京工业大学生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 乙醛还原酶工程菌的构建以及与葡萄糖脱氢酶工程菌偶联还原制备R-CHBE被引量：2
- 2010年
- R-4-氯-3-羟基丁酸乙酯(R-CHBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)立体选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究从赭色掷抱酵母细胞ZJU010中克隆出NADPH依赖型乙醛还原酶ARI基因(alr),构建重组大肠杆菌E.coliBL21/pET-alr,并与葡萄糖脱氢酶的基因工程菌(BL21/pET-gdh)进行偶联转化COBE。合理调整双菌双酶比例,当BL21/pET-alr和BL21/pET-gdh的湿菌重比为6∶1时,CHBE的产量达到最高,无需添加辅酶,转化22h摩尔转化率达到95.88%,产物R-CHBE的对映体过量值ee为96%,较好地实现了双酶偶联制备R-CHBE。
- 金永琴徐娴毛政何冰芳
- 关键词：葡萄糖脱氢酶
- 一菌双酶偶联NADPH再生不对称还原制备CHBE
- 本研究从Sporobolomyces.salmonicolor ZJU010中克隆醛基还原酶ARI基因，从蜡状芽抱杆菌克隆葡萄糖脱氢酶GDH基因；采用双启动子，利用这两种基因构建重组质粒，加入IPTG后在30℃诱导6h后...
- 徐吴金永琴何冰芳
- 关键词：酶工程生物催化重组质粒
- 一菌双酶法构建NADPH辅酶再生循环偶联还原制备R-CHBE
- 4-氯-3-羟基丁酸乙酯(ChBE)是多种药物的手性中间体,可由4-氯乙酰乙酸乙酯(COBE)选择性还原制备,而辅酶高效再生是绝大多数氧化还原酶实际应用的瓶颈。本研究将辅酶NADPh再生关键酶葡萄糖脱氢酶(GDh)和乙醛...
- 徐昊金永琴何冰芳
- 关键词：葡萄糖脱氢酶共表达手性中间体双酶法
- 文献传递
