金萍
- 作品数：14 被引量：22H指数：2
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- 相关领域：农业科学生物学经济管理更多>>
- 今年上半年规模化养猪场猪病的特点
- 2005年
- 刘有昌王传彬孙明金萍康立平杨欣艳闫瑾胡燕王莉
- 关键词：规模化养猪场猪病亚临床感染养猪生产临床症状
- 口蹄疫病毒3A、3B、3C基因克隆、表达及其抗体消长规律的研究被引量：2
- 2005年
- 成功克隆到O型口蹄疫病毒(FMDV)太保毒株3ABC基因片段中的3A、3B、3C基因,并将它们插入pGEX-4T-1或24B11表达载体构建了重组表达质粒,经Westernblotting分析表明,表达的3A、3B蛋白可与FMDV阳性血清发生特异性反应,但表达的3C蛋白没有反应。以纯化的3A、3B表达蛋白为抗原建立间接ELISA,对4组背景清楚的试验牛血清进行检测,结果表明3A、3B表达蛋白与非免疫对照组(C组)和灭活疫苗反复免疫组(CI组)牛血清均不发生反应,与未免疫直接攻毒组(D组)和免疫后攻毒组(I组)牛血清均发生反应;D组和I组3A、3B表达蛋白抗体持续时间最长可达90d以上,3A和3B表达蛋白最早检出相应抗体的时间分别为攻毒后第5天和第10天。
- 王传彬王宏伟孙明田克恭陈西钊遇秀玲金萍许燕辉赵心力马力峰特米尔巴根
- 关键词：口蹄疫病毒基因克隆和表达抗体消长O型口蹄疫病毒抗体消长规律基因克隆
- H7N2禽流感病毒分离株研究:Ⅰ.两株鸡源H7N2禽流感病毒分离鉴定
- 采用鸡胚培养法,从病鸡组织中获得了两株分离物,均可凝集鸡红细胞;经纯化后负染作电镜观察,可见球形、外被囊膜的病毒颗粒,直径约90～100nm;经血凝抑制试验和神经氨酸酶试验鉴定为H7N2亚型禽流感病毒,分别命名为A/Ch...
- 王传彬田克恭王宏伟孙明遇秀玲金萍陈西钊
- 关键词：禽流感病毒HA1基因
- 种猪群伪狂犬病野毒感染的监测被引量：7
- 2006年
- 刘有昌金萍康立平王传彬杨欣艳王莉内
- 关键词：伪狂犬病病毒种猪群野毒种畜禽宿主仔猪
- 口蹄疫病毒非结构蛋白VPg1-2、VPg2-3、VPg3基因的克隆、表达及VPg1-2抗体持续时间的研究被引量：1
- 2007年
- 目的表达口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth Disease Virus,FMDV)非结构蛋白VPg1-2、VPg2-3、VPg3,用于FMDV感染与灭活疫苗动物鉴别诊断和其蛋白功能研究。方法对O型口蹄疫病毒太保毒株3ABC基因片段中的VPg1-2(3B1-2)、VPg2-3(3B2-3)、VPg3(3B3)基因进行扩增和亚克隆,并将它们分别插入pGEX-4T-1表达载体构建了重组表达质粒,经IPTG诱导后,进行Western blotting分析。以纯化的VPg1-2表达蛋白为抗原建立间接ELISA,对背景清楚的实验牛血清进行检测。结果表达的VPg1-2、VPg2-3蛋白可与FMDV阳性血清发生特异性反应,表达的VPg3蛋白没有反应。VPg1-2表达蛋白与对照组(C组)和灭活疫苗反复免疫组(CI组)牛血清均不发生反应,与未免疫直接攻毒组(D组)血清均发生反应,与部分免疫后攻毒组(I组)(4/7)血清发生反应,与部分I组(3/7)血清不发生反应;D组和I组VPg1-2表达蛋白抗体持续时间最长可达90 d以上,最早检出相应抗体的时间为攻毒后第10天。结论表达的VPg1-2抗原用于健康牛群、免疫后未感染牛群以及未免疫感染牛群的鉴别诊断的特异性、敏感性达到100%,对免疫后感染牛群进行检测时可能有一定的漏检现象。
- 孙明王宏伟田克恭王传彬陈西钊遇秀玲金萍曹振许燕辉赵心力
- 关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白抗体消长
- H7N2禽流感病毒分离株研究:Ⅰ.两株鸡源H7N2禽流感病毒分离鉴定
- 采用鸡胚培养法,从病鸡组织中获得了两株分离物,均可凝集鸡红细胞;经纯化后负染作电镜观察,可见球形、外被囊膜的病毒颗粒,直径约90～100nm;经血凝抑制试验和神经氨酸酶试验鉴定为H7N2亚型禽流感病毒,分别命名为A/Ch...
- 王传彬田克恭王宏伟孙明遇秀玲金萍陈西钊
- 关键词：禽流感病毒HA1基因
- 文献传递
- H7N2禽流感病毒CK/HB/1/02株NA全基因序列分析被引量：2
- 2007年
- 采用RT—PCR扩增了国内H7N2禽流感病毒（AIV）CK／HB／1／02分离株的完整神经氨酸酶（NA）基因节段，测定了其核苷酸序列，并与GenBank中AIVNA基因序列进行了同源性比较和氨基酸编码分析，绘制了NA基因的系统发育进化树。结果表明，AIVCK／HB／1／02分离株NA基因的完整序列长度为1467bp，包括5’-末端和3’-末端的非编码区，其最大阅读框（ORF）编码469个氨基酸，第61～65位氨基酸序列为-NITGI-。不同于国内H9N2AIV的特殊遗传标记。谊病毒NA基因的核苷酸序列与GenBank中人类流感病毒A／Leningrad／134／57（H2N2）的NA基因同源性最高，为93．3％；其次为香港的鸭源、人源、猪源H3N2病毒（89％～93％）；而与我国北京、广东、香港和韩国的H9N2AIV以及芙国的H7N2AIV的同源性较低（85％～88％）。在N2基因系统发育进化树中。CK／HB／1／02分离株处于欧亚分支内，与H2N2人流感病毒的亲缘关系较近；与北美HTN2AIV处在不同分支，遗传距离较远。
- 王传彬孙明金萍王宏伟遇秀玲陈西钊田克恭
- 关键词：禽流感病毒NA基因同源性
- H7N2禽流感病毒分离株血凝素蛋白全基因的序列分析被引量：1
- 2005年
- 为进一步分析H7N2禽流感病毒(AIV)分离株血凝素(HA)基因的特性,参照已发表序列设计了1对引物,采用RT-PCR获得了1条约1.7 kb的DNA片段,测序后进行了同源性比较、HA基因系统发育进化树分析和氨基酸编码分析.结果表明,所测的2个分离株的HA基因全长1 664 bp,编码除信号肽以外的HA蛋白的全部544个氨基酸,其中包括HA1的323个氨基酸,HA2的221个氨基酸.2个分离株HA基因核苷酸序列的同源性为99.4%;与GenBank中AIV标准株A/Afri.Star./Eng-Q/983/79(H7N1)的同源性最高,分别为99.4%和99.0%;与美国A/Chicken/NewYork/13142-5/94(H7N2)株同源性很低(仅65.0%),而与以色列、意大利H7N2 AIV的同源性较高(为96%～97%);2个分离株在HA基因进化树中均处于H7亚型AIV的欧亚群系分支内.推导氨基酸的序列分析表明,其HA蛋白裂解位点的氨基酸序列为-GR-GLF-,仅包含1个碱性氨基酸(R-)残基,符合低致病力AIV的基因特征.
- 王传彬孙明田克恭金萍王宏伟遇秀玲陈西钊
- 关键词：HA基因同源性
- H_7N_2禽流感病毒分离株研究:Ⅰ.两株鸡源H_7N_2禽流感病毒分离鉴定
- 采用鸡胚培养法,从病鸡组织中获得了两株分离物,均可凝集鸡红细胞;经纯化后负染作电镜观察,可见球形、外被囊膜的病毒颗粒,直径约90-100nm;经血凝抑制试验和神经氨酸酶试验鉴定为H7N2亚型禽流感病毒,分别命名为A/Ch...
- 王传彬田克恭王宏伟孙明遇秀玲金萍陈西钊
- 关键词：禽流感病毒HA1基因
- 单抗阻断ELISA检测口蹄疫病毒NSP抗体方法建立
- 目的建立检测口蹄疫病毒(FMDV)非结构蛋白(NSP)抗体的单抗阻断ELISA方法,为进一步研究检测试剂盒提供基础。方法用亲和层析法纯化抗FMD NSP单克隆抗体,并标以辣根过氧化物酶,再以FMD NSP抗原包被微量反应...
- 王传彬田新生王宏伟孙明曹振遇秀玲金萍陈西钊田克恭
- 关键词：口蹄疫病毒非结构蛋白单克隆抗体阻断ELISA
