闻新棉
- 作品数:43 被引量:89H指数:5
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- 两种定量聚合酶链反应模式检测乳腺癌组织中缓激肽释放酶表达的比较
- 2009年
- 目的比较两种荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乳腺癌组织中激肽释放酶6(KLK6)基因的表达。方法分别用TaqMan探针和SYBR GreenⅠ荧光染料作为荧光指示剂,实时荧光定量PCR检测KLK6在乳腺癌中的相对表达水平,应用统计软件分析两种检测模式的差异。结果两种检测模式的检测结果均显示乳腺癌中KLK6的表达均高于正常组织,KLK6的相对表达水平无显著性差异。结论在扩增产物特异的条件下应用SYBR GreenⅠ检测的效果同TaqMan探针,SYBR GreenⅠ染料应用范围广泛,成本低。
- 闻新棉胡成进陈英剑
- 关键词:TAQMAN探针SYBR乳腺癌
- KLK6在乳腺癌组织与细胞中的表达与功能研究
- Kallikrein 是一类编码具有丝氨酸蛋白酶活性的基因家族,KLK6 是该家族成员之一。最近报道KLK6 基因在卵巢癌中可能具有疾病诊断与预后判定的潜在价值,还可能是有用的治疗靶点。本论文是想通过检测乳腺癌组织与正常...
- 闻新棉
- 关键词:乳腺癌实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 雌孕激素对人卵巢癌细胞KLK5 mRNA表达和增殖的影响被引量:3
- 2008年
- 目的探讨雌孕激素对其受体阳性人卵巢癌HO8910细胞中组织激肽释放酶5(KLK5)基因mRNA表达的调控。方法取对数生长期的HO8910细胞,雌激素组分别加入10-10、10-9、10-8、10-7mol/L的17-β雌二醇(17-βE2),孕激素组分别加入10-7、10-6mol/L的黄体酮(P),对照组加入无水乙醇,培养72h。用实时荧光定量逆转录PCR检测各实验组和对照组中KLK5mRNA表达变化。用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖。结果作用72h后,17-βE2各实验组(10-10、10-9、10-8、10-7mol/L)HO8910细胞KLK5mRNA水平均高于乙醇对照组(P<0.01);P各实验组(10-7、10-6mol/L)HO8910细胞KLK5mRNA水平均低于乙醇对照组(P<0.01)。经MTT检测17-βE2各实验组HO8910细胞光吸收度A值与乙醇对照组相比明显增加(P<0.01);P各实验组细胞光吸收度A值与乙醇对照组相比明显降低(P<0.01)。结论雌激素对KLK5mRNA的表达具有上调作用,同时能促进卵巢癌HO8910细胞的增殖;而孕激素作用正相反。
- 孙晓明陈英剑胡成进张芳闻新棉徐军
- 关键词:雌激素类孕激素类
- 乳腺癌klk6基因表达的实时荧光定量法的建立及初步应用被引量:12
- 2005年
- 目的建立人乳腺癌相关基因组织型激肽释放酶基因家族成员Kallikrein6(klk6)mRNA荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQPCR)检测方法,以检测正常乳腺和乳腺癌组织中klk6基因表达水平。方法以GAPDH作参照,用SYBRGreenI荧光定量技术,建立检测klk6mRNA的FQPCR方法;并检测32份正常乳腺和乳腺癌组织标本的循环阈值(Ct),然后,通过REST软件分析klk6mRNA的表达水平。结果FQPCR方法对GAPDH和klk6mRNA的扩增效率分别为0.90和0.95,批内变异系数(CV)分别为1.0%~2.1%和0.8%~1.2%,批间CV分别为3.2%和3.9%。正常乳腺和乳腺癌组织的klk6对GAPDH的相对表达量分别为0.017±0.009和0.040±0.017。用REST软件分析,提示乳腺癌组织klk6表达水平上调。结论建立的klk6mRNAFQPCR检测方法简便,特异,重复性好,可信度高,可用于klk6基因表达水平与肿瘤相关性研究。
- 胡成进沈茜陈英剑闻新棉
- 关键词:实时荧光定量法荧光定量逆转录聚合酶链反应乳腺癌相关基因正常乳腺癌组织标本
- 乳腺癌中KLK6 mRNA的表达及其临床病理和生物学意义
- 目的:对正常乳腺组织和癌组织KLK6 mRNA水平进行定量,分析其表达与临床病理特征的关系,并探讨乳腺癌细胞株MCF-7中KLK6基因被沉默后细胞增殖周期及细胞凋亡的变化。方法:应用实时荧光定量RT-PER检测48例乳腺...
- 胡成进陈英剑闻新棉孙晓明杨道理
- 关键词:乳腺癌荧光定量PCRSIRNA
- 文献传递
- 整合子及其耐药基因盒在临床分离多重耐药志贺菌中的分布被引量:4
- 2013年
- 目的分析整合子类型、耐药基因盒在志贺菌中的分布及其与耐药性之间的关系。方法采用最低抑菌浓度(MⅠC)测定志贺菌药物敏感性,PCR扩增Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ类整合子及其耐药基因盒,限制性内切酶及DNA测序确定各基因序列。结果在分离的62株志贺菌中,57株存在多重耐药现象,占91.9%。在多重耐药株中,Ⅰ类、Ⅱ类整合子基因阳性株分别为52和55株,分别占91.2%和96.5%(其中仅含Ⅰ类整合子2株,仅含Ⅱ类5株,Ⅰ类、Ⅱ类整合子均含的50株)。未检测到Ⅲ类整合子基因。典型Ⅰ类整合子8株,耐药基因盒为dfrV和dfrA17-aadA5;非典型Ⅰ类整合子44株,耐药基因盒均为blaOXA-30-aadA1。6株福氏志贺菌中存在典型和非典型Ⅰ类整合子共存现象。Ⅱ类整合子耐药基因盒均为dfrA1-satl—aadA1。结论本研究分离的志贺菌存在严重多重耐药,多重耐药株中普遍携带非典型Ⅰ类整合子和Ⅱ类整合子的耐药基因盒,部分菌株存在典型和非典型Ⅰ类整合子共存现象。
- 闻新棉边锋芝郑秀峰孙玉国张延芳江超苑广盈
- 关键词:志贺菌属整合子
- 乳腺癌组织KLK5 mRNA的表达及其与临床病理特征的关系
- 本研究拟在建立定量检测KLK5 mRNA表达水平的基础上,对48例不同病程的乳腺癌患者的癌组织及相应的正常组织进行检测,并分析其表达与部分临床病理特征的关系,以探讨其临床意义。
- 陈英剑孙晓明胡成进闻新棉
- 关键词:乳腺癌基因表达临床病理学
- 文献传递
- 自身免疫病患者增殖诱导配体基因mRNA表达水平的研究被引量:4
- 2006年
- 目的建立检测增殖诱导配体(a proliferation—inducing ligand,APRIL)mRNA的SYBRGreenⅠ实时定量PCR方法,了解系统性红斑狼疮(SLE)、类风湿性关节炎(RA)等自身免疫病患者外周血单个核细胞(PBMC)中APRIL的表达水平及其与自身免疫性疾病发病机制、预后之间的关系。方法构建克隆载体pGEM—TEasy—APRIL作为定量模板,定量检测58例自身免疫病(SLE、RA)确诊病人和20例健康献血者的外周血APRIL mRNA表达量,以APRIL mRNA和内参GAPDH mRNA表达量的比值作为APRIL表达水平的指标。结果自身免疫病患者的APRIL mRNA表达范围3.95~192.0,均值为29.68±4.5。20例正常对照者APRIL mRNA的表达范围3.1-18.7,均值为10.56±2.0。自身免疫病患者APRIL mRNA的表达水平高于正常对照组;久治不愈或疗效差者APRIL mRNA表达水平显著高于初发患者及治疗后缓解患者,但后两组差异无显著性意义。结论自身免疫性疾病(SLE、RA)患者的APRIL mRNA表达水平升高,疗效差、久治不愈患者表达水平更高。
- 王燕闻新棉窦恒利仲人前
- 关键词:增殖诱导配体自身免疫病SYBR
- 乳腺癌组织KLK5 mRNA的表达水平及其与临床病理特征的关系
- 目的建立人KLK5 mRNA荧光定量检测方法,对正常乳腺组织和癌组织KLK5 mRNA进行定量,分析其表达与部分临床病理特征的关系,探讨其临床意义。方法设计特异引物,应用非特异荧光染料SYBR Green I,建立特异的...
- 陈英剑孙晓明胡成进闻新棉
- 文献传递
- 一株携带blaCTX-M-15不发酵乳糖致病性大肠埃希菌026:K60的检测及临床分析
- 2013年
- 在发展中国家,致病性大肠埃希菌是引起婴幼儿细菌性腹泻的主要病原菌。2010年10月笔者从济南市第四人民医院一腹泻患儿大便中分离到一株携带blaCTX-M-15舶致病性大肠埃希菌026:K60,且此菌株不发酵乳糖,比较罕见,现报告如下。
- 边锋芝闻新棉苑广盈孙玉国郑秀峰江超
- 关键词:细菌性腹泻病原菌婴幼儿