陈卫民
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 供职机构：四川大学生命科学学院微生物与代谢工程四川省重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金教育部“新世纪优秀人才支持计划”四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 盐藻LHCB3蛋白的表达纯化及抗体制备
- 2011年
- 为了解盐生杜氏藻(Dunaliella salina)主要光捕获蛋白LHCB蛋白的功能,将已获得的盐藻Lhcb3基因构建到原核表达载体pET32a-DsLhcb3,通过优化表达条件,建立了高效的重组系统.pET32a-DsLhcb3在大肠杆菌中的优化表达条件为1 mmol/L IPTG在37℃下诱导4 h.采用镍离子亲合层析纯化获得LHCB3蛋白,并以此为抗原制备了多克隆抗体,经琼脂糖扩散检测效价,在1:16处有明显沉淀.提取盐藻总蛋白,经过制备的LHCB3抗体杂交,在29 000处获得两条明显的杂交条带,为进一步研究盐藻LHCⅡ蛋白表达机理奠定了基础.
- 赵锐金楠陈卫民马根徐青锐乔代蓉曹毅
- 关键词：盐生杜氏藻表达纯化抗体
- 盐胁迫下Dslhcb3和cao基因的表达及类囊体磷酸化状态转化被引量：2
- 2011年
- LHCⅡ在在类囊体膜中除了进行光能的吸收和传递之外,在维持类囊体膜的结构,调节激发光能在两个光系统之间的分配,光保护以及对各种环境的适应等过程中都起着重要的作用.为揭示盐藻LHCB在盐胁迫下的作用机制,以盐生杜氏藻(Dunaliella salina为材料,应用实时PCR的方法和蛋白电泳技术,研究lhcb3和叶绿素a加氧酶cao基因在低盐胁迫下的表达变化,以及盐藻类囊体膜的磷酸化水平和磷酯酶的变化.结果表明,在低盐环境下,lhcb3和cao基因的表达活性都呈降低的总趋势,这可能是盐藻适应不浓度盐环境胁迫的不反应.类囊体膜蛋白磷酸化水平先是降低,之后有所升高.时,发现磷酸酯酶有着相的变化趋势,并在12 h时最高.由此认为低盐条件下,类囊体膜蛋白在前期磷酸化水平的降低与磷酸酯酶活性降低有关,但在12 h后磷酸化水平有所升高,可能是细胞内平衡调节的结果,即磷酸激酶活性增强的结果.
- 文韬尚慧毅高志强陈卫民李璟李世林乔代蓉曹毅
- 关键词：盐藻实时PCR磷酸酯酶类囊体膜
- 不同光照下盐生杜氏藻光捕获蛋白基因lhcb和叶绿素a合成酶基因cao的表达变化被引量：5
- 2010年
- 由于光捕获天线蛋白(LHCⅡ)编码基因(lhcb)家族同源性较高,以往研究只能从总体上反映家族基因的变化,对各个编码基因的表达研究较少.本研究以光合单细胞生物盐生杜氏藻(Dunaliella salina)为材料,应用实时PCR的方法,系统研究了lhcb基因家族成员在光环境转换过程中的表达变化.结果表明,当由正常培养光环境转移到高光条件下时,lhcb基因家族成员的表达整体上受抑制,但各个基因的表达变化趋势随时间变化不尽相同.在强光照下,lhcb1、lhcb2.1、lhcb2.23h时有最低的表达积累量,而lhcb3却有较高的表达量.细胞转入黑暗环境后,各个基因的转录水平升高,变化趋势基本相同,在3h时均有较高的表达量,只有lhcb2.1在1h时的表达量最高.叶绿素加氧酶编码基因cao的变化与lhcb3基本相同.LHCⅡ蛋白量在高光下降低,在黑暗条件下升高.叶绿素含量在高光条件下明显下降,叶绿素a/b值升高,黑暗条件下则相反.
- 陈卫民张书费保进李伟于荣清徐辉乔代蓉曹毅
