陈志瑾
- 作品数：67 被引量：187H指数：8
- 供职机构：第三军医大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市科技攻关计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- 重组人肽抗生素hPAB-β及其突变体的活性测定与筛选
- 2003年
- 饶贤才陈志瑾金晓琳黎庶胡晓梅朱军民黄建军胡金川谭银玲胡福泉
- 关键词：突变体活性测定基因工程基因表达
- 酵母表达肽抗生素hPAB-β的纯化及其抗单纯疱疹病毒活性分析
- 肽抗生素/(Peptide antibiotics/)为生物体基因编码的小肽,通常由12～60个氨基酸残基构成,分子量小于5kDa。它们在动、植物中的广泛分布,提示其在生物体的生长及抗感染中发挥重要作用。虽然发现了一些阴...
- 陈志瑾
- 关键词：高密度发酵表达纯化病毒培养抗病毒活性
- 文献传递
- 酵母表达肽抗生素hPAB-β抗单纯疱疹病毒活性分析
- 肽抗生素(Peptide antibiotics)为生物体基因编码的小肽,通常由12～60个氨基酸残基构成,分子量小于5kDa。它们在动、植物中的广泛分布,提示其在生物体的生长及抗感染中发挥重要作用。虽然发现了一些阴离子...
- 陈志瑾饶贤才丛延广杨杰王冬梅胡珍原薇薇
- 文献传递
- 鞭毛抗原与细菌的群集运动被引量：1
- 2006年
- 群集运动是指在培养基表面某些运动细菌依赖鞭毛的群体迁移行为,涉及繁殖体细胞分化成群集细胞,发生形态、代谢以及蛋白表达等显著变化。菌细胞密度、表面接触和生理学信号均可成为群集运动的刺激因素。群集运动的关键是鞭毛的生物合成,flhDC鞭毛操纵子是支配分化和迁移的细菌调控网络的焦点。
- 陈志瑾丛延广饶贤才
- 关键词：群集运动分子机制鞭毛抗原
- 甲型副伤寒沙门菌减毒疫苗株的制备
- 本实验室以甲型副伤寒沙门菌CMCC50093为野生株，先经实验室培养初步筛选，进而采用自杀载体pYG4，通过同源重组的方式敲除yncD基因，获得一株甲型副伤寒沙门菌减毒疫苗株候选。通过与野生株生物学性状比较分析，该疫苗株...
- 熊坤陈志瑾胡晓梅胡启文饶贤才丛延广
- 关键词：生物学性状
- 文献传递
- 结核分枝杆菌38kDa-U1融合抗原的表达、纯化及其抗原活性测定
- 2006年
- 丛延广刘利陈志瑾饶贤才胡晓梅李明黎庶胡勇胡福泉
- 关键词：结核分枝杆菌融合抗原层析纯化活性测定基因拼接抗体反应
- 末端酶介导的双链DNA病毒核酸组装
- 2006年
- 病毒是一类非细胞结构的微生物,专性宿主细胞内寄生,以复制方式进行增殖。在病毒复制的过程中,组装是其特有的过程。不同类型病毒之组装的机制有很大差异,目前对双链DNA(dsDNA)病毒的组装机制研究较多,包括位点特异性组装和满头组装两种方式,采用何种方式进行组装与其基因组编码的末端酶有关。该文介绍末端酶介导的dsDNA病毒组装的有关进展。
- 陈志瑾申晓冬张克斌饶贤才
- 关键词：双链DNA病毒
- 金葡菌TG-TPase嵌合基因在甲醇营养型酵母中的表达被引量：1
- 2009年
- 目的设计耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)耐药相关TG-TPase嵌合基因,构建其真核表达质粒,为嵌合基因的高效、分泌型表达奠定基础。方法在序列结构分析的基础上,设计引物从MRSA菌株中扩增其耐药性相关转糖基酶(TGase)和转肽酶(TPase)活性片段,进一步用酶切连接等分子生物学操作构建TG-TPase嵌合基因,亚克隆至酵母表达质粒pPIC9K中,转化DH5α大肠埃希菌。经酶切、PCR和核苷酸测序鉴定正确的重组质粒用SalⅠ线性化,整合入甲醇营养型毕赤酵母GS115中,在DNA和基因转录水平鉴定出阳性重组酵母。结果采用PCR从MRSA基因组中扩增得到了873bp的TGase片段和1044bp的TPase片段。以酶切连接构建的TG-TPase嵌合基因经酶切、PCR鉴定,能获得约1900bp的融合片段,与预期结果相符,测序表明序列和阅读框均正确。线性化的重组质粒转化GS115后,得到5个高拷贝阳性转化子,经诱导表达和PCR鉴定,这些转化子能转录出目的基因的mRNA。结论成功构建了含TG-TPase嵌合基因的重组毕赤酵母工程菌,为进一步高效制备嵌合蛋白、进而利用其酶学活性进行抗耐药性金葡菌抑制剂的筛选创造前提。
- 杨杰饶贤才侯瑞胡晓梅陈志瑾丛延广谭银铃朱军民周莹冰胡福泉
- 关键词：MRSATGASE毕赤酵母
- 洛阳地区男性泌尿生殖道支原体感染流行病学调查及耐药性变迁被引量：4
- 2010年
- 目的研究男性泌尿生殖系统炎症患者解脲支原体(UU)和人型支原体(MH)感染及对抗菌药物耐药情况的变迁,以了解本地区男性支原体的感染流行状况并指导临床合理选择使用抗菌药物。方法采用病原培养法和PCR方法对2009年1月～12月在我院门诊就诊的450例泌尿生殖系统炎症患者泌尿生殖道标本进行UU和MH检测,同时进行体外药物敏感试验,并与2000年进行比较,对UU和MH的感染及体外药物敏感性的变化情况进行分析。结果 2000年131例高危人群检测结果中UU46例占35.1%,MH18例占13.7%,UU和MH混合感染24例占18.3%;2009年450例高危人群检测结果中UU151例占33.6%,MH60例占13.3%,UU和MH混合感染78例占17.3%。2009年与2000年相比,男性泌尿生殖系统UU和MH对可乐比妥和阿奇霉素的耐药率明显增高,对交沙霉素的耐药率有所改善,而强力霉素和美满霉素的耐药率相对稳定;敏感性较高的依次是强力霉素、美满霉素和交沙霉素。结论 UU和MH已成为男性泌尿生殖系统炎症的主要病原体且以UU为主。男性泌尿生殖系统感染患者的就医人数2009年比2000年显著增多,提示人们的自我保护意识明显加强。2009年与2000年相比,UU、MH的感染率以及UU和MH的混合感染率虽然变化不大,但一段时间以来都维持在较高的水平,应引起人们的高度重视。UU和MH的耐药率较高,且随着时间的变化其耐药性也随之改变。因此,临床治疗支原体感染时应尽量根据药敏结果选择敏感药物。强力霉素、美满霉素和交沙霉素可作为本地区临床经验用药的首选药物。
- 李华信陈志瑾马周建邬冬冬范俊芳
- 关键词：泌尿生殖道支原体感染耐药性
- HSV-1 UL15 exon-Ⅱ的原核表达及抗体制备
- 2009年
- 目的构建pQE-HSV-1 UL15 exonⅡ原核表达载体,在大肠埃希菌中高效表达并免疫家兔制备抗体。方法以HSV-1感染后的Vero细胞总RNA为模板,通过RT-PCR扩增HSV-1 UL15 exon-Ⅱ基因,克隆入原核表达载体pQE-31;重组质粒经酶切、测序鉴定无误后转化大肠埃希菌JM109,IPTG诱导表达;SDS-PAGE检测蛋白表达情况;表达蛋白用Ni-NTA亲和层析纯化及透析复性处理后免疫家兔制备特异性抗体,抗体的免疫原性用Western blotting进行检测。结果通过RT-PCR扩增获得了HSV-1 UL15 exon-Ⅱ全长基因;构建的pQE-HSV-1 UL15 exonⅡ重组质粒经酶切及测序鉴定无误;阳性转化菌株经IPTG诱导后SDS-PAGE电泳显示表达蛋白的相对分子质量约为43 000,与理论值一致,蛋白表达率约为35%～40%;表达蛋白经纯化及透析复性后免疫家兔获得的抗血清经Western blotting鉴定具有较好的特异性和敏感性。结论成功构建了pQE-HSV-1 UL15exonⅡ原核表达载体,诱导蛋白表达并进一步用表达的蛋白制备了特异性抗体,为HSV-1末端酶全长基因表达情况的鉴定及最终构建抗病毒组装药物的分子筛选模型奠定了前期实验基础。
- 陈灿煌黎庶金晓琳朱晓艳胡晓梅周莹冰丛延广朱军民陈志瑾胡福泉
- 关键词：原核表达抗体制备
