陈慧萍
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：郑州大学医学院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 利用基因芯片分析碱性成纤维细胞生长因子诱导脐血干细胞CD34~＋与CD133~＋细胞基因表达的差异被引量：3
- 2010年
- 背景:迄今为止,人们利用基因芯片对碱性成纤维细胞生长因子诱导CD34+和CD133+干细胞分化后细胞生物学性状、功能调控、基因变化及其表达差异等方面的认识尚不足,有待深入研究。目的:利用基因芯片比较脐血CD34+和CD133+细胞基因表达的差异,并探讨碱性成纤维细胞生长因子体外诱导脐血CD34+和CD133+造血干/祖细胞分化的基因表达变化,及其对碱性成纤维细胞生长因子反应性差异。方法:利用MiniMACS免疫磁珠法从脐静脉血单个核细胞中分离出CD34+和CD133+干/祖细胞,经含碱性成纤维细胞生长因子、B27的DMEM/F12细胞营养液培养10~15d,提取培养前后细胞总RNA,利用Oligo GEArray芯片和GEArray表达分析软件进行芯片数据分析。流式细胞仪检测CD34+和CD133+造血干细胞回收率。碱性成纤维细胞生长因子诱导前后CD34+、CD133+细胞形态变化。变性琼脂糖凝胶电泳测定RNA浓度和纯度。基因芯片检测结果。结果与结论:①对20份脐血分别进行CD34+和CD133+细胞分选,分选CD34+细胞纯度为(77.52±5.06)%,回收率为(2.74±1.59)%;CD133+细胞纯度为(79.16±3.37)%,回收率为(1.12±0.94)%。②新分选出的CD34+细胞呈球形,经碱性成纤维细胞生长因子培养15d后,多数细胞形态未发现显著变化,部分细胞出现贴壁生长,可见突起和梭形细胞。CD133+细胞呈球形,经碱性成纤维细胞生长因子培养15d后,细胞明显扩增,由圆球形变为不规则形,部分细胞出现贴壁生长。③CD34+干细胞培养前后总RNA提取质量分别为2236ng和1796ng;CD133+干细胞培养前后总RNA提取质量分别为2518ng和2191ng。④在所检测的263个干细胞相关基因中,脐血CD133+细胞与CD34+细胞基因表达差异2倍以上的基因有10种,其中5种基因表达前者高于后者,5种基因表达前者低于后者;碱性成纤维细胞生长因子诱导培养后,CD133+细胞有32种基因表达显著高于CD34+细胞,在检测的263个基因中
- 陈慧萍李倩如张静杜英杨波李国喜胡祥董子明
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子CD34CD133基因芯片
- bFGF诱导脐血CD_(34)^+干细胞基因表达变化的研究被引量：3
- 2010年
- 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)体外诱导脐血CD34+造血干细胞分化的基因表达变化,理解脐血CD34+造血干细胞的生物学特性,为体外诱导分化和临床应用打下基础。方法利用MiniMACS免疫磁珠法从脐静脉血单个核细胞中分离出CD34+造血干细胞,经含干细胞因子(SCF)、bFGF、B27的DMEM/F12细胞营养液培养10～15d,提取培养前后细胞总RNA,利用Oligo GEArray芯片和GEArray表达分析软件进行芯片数据分析。结果在所检测的263个基因中,发现10个基因培养后比培养前显著上调,20个基因显著下调。这些基因主要涉及干细胞特异性标志、细胞周期、干细胞分化标志、以及与干细胞相关的信号转导、细胞因子及其受体等。结论bFGF通过一些特定基因的变化影响脐血CD34+干细胞增殖分化,有助于从基因水平理解bFGF对CD34+干细胞增殖分化的影响,促进bFGF诱导的CD34+细胞在临床上的应用。
- 张静陈慧萍李倩如杨波杨鹏辉李国喜胡祥杜英
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子CD34基因芯片脐血
