陈炜烨
- 作品数：27 被引量：92H指数：6
- 供职机构：广东省中医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ImageJ软件在重组质粒pET32a-CDK2中蛋白表达的应用被引量：6
- 2014年
- 目的应用Image J软件探索细胞周期依赖性蛋白激酶2(CDK2)在重组质粒pET32a-CDK2中的蛋白表达条件。方法将重组质粒pET32a-CDK2转入表达菌株BL21(DE3),然后在不同时间点(0、1、2、3、4h)和不同浓度(0.5、1、2 mmol/L)异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)下诱导表达目的蛋白CDK2,对CDK2采用SDS-PAGE法进行蛋白电泳,并应用Image J软件对电泳条带进行灰度分析。结果 CDK2诱导表达量在不同时间点差异有统计学意义(P<0.001),其中0h与1h、2h、3h、4h诱导表达量的差异均有统计学意义(P=0.007,P<0.001,P<0.001,P<0.001);1h与3h和4h诱导表达量的差异均有统计学意义(P=0.001);而2h和1h、3h、4h诱导表达量的差异均无统计学意义(均有P>0.05);不同浓度IPTG下的CDK2诱导表达量差异无统计学意义(P=0.336,P=0.240,P=1.000)。结论根据Image J软件分析结果,采用0.5 mmol/L浓度IPTG 2h的条件,节约诱导时间和试剂用量。
- 陈炜烨刘冬冬徐建华陈丹娜何敏张战锋黄宪章
- 关键词：IMAGE原核表达
- 前清蛋白定量检测限和功能灵敏度的评价及临床应用被引量：2
- 2014年
- 目的对Roche Modular P全自动生化分析仪检测前清蛋白(PA)的空白限(LoB)、检测限(LoD)、定量检测限(LoQ)以及功能灵敏度(FS)进行评价。方法参照美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP-17A文件,将空白样品生理盐水及系列低浓度样品在Roche Modular P全自动生化分析仪上进行检测确定该方法的空白限、检出限和定量检测限。依据国内通用方法确定功能灵敏度。结果 PA的空白限为16.35mg/L,检测限为18.23mg/L,定量检测限暂无法评价,功能灵敏度为25.00mg/L。结合其可报告范围的低值,确定其临床的报告范围及报告方式。结论建立了PA在Roche Modular P全自动生化分析仪上检测的定量检测限,为临床诊断和治疗提供了更有价值的信息,对不同评价的方法进行比较,明确了不同方法实际应用的优点以及局限性。
- 万泽民张秀娟李磊王云秀吴晓宾陈炜烨张成王建兵柯培锋
- 关键词：前清蛋白免疫散射比浊法检测限
- CRP与hsCRP在脑血管疾病风险评估中的一致性研究
- 目的：探讨CRP与hsCRP检测在脑血管疾病风险评估中的一致性.方法：在广州城区采用巢式抽样的流行病学调查方法共得到1487名志愿者的血清,对1487份血清同时测定CRP与hsCRP.根据CDC/AHA推荐的hsCRP浓...
- 万泽民陈炜烨吴晓宾王云秀林海标王建兵柯培锋黄宪章
- PET32a-CDK2重组质粒的构建与表达被引量：5
- 2011年
- 目的构建含有细胞周期依赖性激酶2(CDK2)的PET32a-CDK2重组质粒,利用原核表达体系表达CDK2蛋白。方法从人白细胞中提取总RNA,采用聚合酶链反应从总RNA中扩增出CDK2基因,并将其插入PET32a质粒,构建重组质粒,化学法转化大肠杆菌DH5α进行克隆。将克隆得到的PET32a-CDK2重组质粒转化入表达菌株BL21,通过异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导其蛋白表达,SDS-PAGE和Western-Blot鉴定蛋白表达情况。结果菌落PCR及DNA测序证实CDK2基因已正确克隆到载体中;重组质粒成功转入表达菌株BL21(DE3),SDS-PAGE和Western-Blot结果显示表达菌经IPTG诱导后表达出52 kD左右的蛋白。结论成功构建重组质粒,并且CDK2全长蛋白在原核表达菌BL21中成功表达。
- 黄宪章张战锋陈炜烨何敏庄俊华
- 关键词：CDK2重组质粒原核表达
- 不同采血管、标本处理过程以及存放时间对NSE检测结果的影响被引量：10
- 2016年
- 目的探究不同采血管、标本处理过程以及存放时间对神经元特异性烯醇化酶(NSE)检测结果的影响。方法随机选取广东省中医院50例住院患者,空腹采静脉血,每份血液标本同时分装于2个试管,试管1为无添加剂干燥管(红管),试管2为促凝剂分离胶管(黄管),用罗氏E601全自动电化学发光免疫分析仪测定两管血清NSE水平。每管标本共测定3次,测定时间分别为标本采集后1、24、48h。其中1h和24h之间,标本经历了4℃保存24h、标本稍混匀和再离心的处理过程;24h和48h之间,标本只经历了4℃保存24h,随后直接上机检测NSE。结果红黄两管血清NSE水平在1h时结果,差异无统计学意义(P>0.05);红管在24h时结果的均差值及阳性率显著高于1h结果的均差值及阳性率,且差异有统计学意义(P<0.05);红管的48h结果的均差值及阳性率与24h相比,差异无统计学差异(P>0.05)。黄管标本的3次(1、24、48h)NSE测定结果的均差值及阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。结论促凝剂分离胶管(黄管)对NSE血清测定结果的稳定性优于无添加剂干燥管(红管)。
- 黄妩姣田春华朱伟才晁艳陈炜烨柯培锋
- 关键词：神经元特异性烯醇化酶
- 流式细胞术积分系统对骨髓增生异常综合征的诊断价值被引量：1
- 2020年
- 目的评估流式细胞术及流式细胞术积分系统(FCSS)对骨髓增生异常综合征的诊断价值。方法收集2014年1月至2019年8月初诊MDS患者资料41例,非MDS患者20例,并对其数据进行统计分析。结果MDS与非MDS患者进行比较,原始细胞、单核细胞比例均显著增加(均P<0.05),原始细胞群比例在MDS-MLD、MDS-EB1、MDS-EB2亚型间逐渐升高,在MDS-MLD与MDS-EB1、MDSMLD与MDS-EB2、MDS-EB1与MDS-EB2亚型间比较差异均有统计学意义(均P<0.05),粒细胞在MDS-MLD与MDS-EB2、MDS-EB1与MDS-EB2亚型间比较差异均有统计学意义(均P<0.05),淋巴细胞、有核红细胞群比例亚型间比较差异均无统计学意义(均P>0.05)。当FCSS≥2分时,FCSS对MDS诊断的特异性为90.25%,敏感性为85.40%。结论应用流式细胞术及FCSS对诊断MDS有很大的临床意义,且实用性强。
- 欧阳芬叶淑娴程招敏陈炜烨
- 关键词：骨髓增生异常综合征免疫表型
- 应用Image J软件探索重组质粒pET32a-CDK2的蛋白表达条件
- 陈炜烨徐建华陈丹娜卢妙莲何敏彭桉平张战锋黄宪章
- 临床标本在验证生化试剂批间结果一致性中的应用
- 2014年
- 目的探讨临床标本在验证不同批号生化试剂对临床检验结果是否具有一致性的作用。方法分别使用新旧两个批号试剂对5个不同浓度的新鲜血清标本、Roche配套质控品和Biorad质控品的13常规临床生化项目进行测定，并对结果进行统计学分析。计算各项目更换试剂批号前后之间的偏移，以美国临床医学检验部门修正法规（CLIA’88）允许总误差的1／3为标准，判断结果是否在允许范围内。结果各项目在更换试剂批号后质控结果差异无统计学意义（P〉0．05），而临床标本中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、尿酸（UA）、总胆固醇（TC）和载脂蛋白A（APOA）等四个项目的测定结果却有统计学意义（P〈0．05），但其偏移却在1／3CLIA’88可接受范围内，分别为2．57％、4．41％、1．81％和3．84％，可以满足临床需要。结论由于质控品基质效应的存在，质控品的结果并不能真实反应更换试剂批号后临床标本结果的一致情况，为了解决这个问题，建议最好同时使用质控品和临床标本进行更换试剂前后的比对。
- 王云秀雷艳梅文翠坤林海标万泽民陈炜烨吴晓宾庄俊华王建兵
- 关键词：临床标本质控品基质效应
- 狼疮性肾炎患者Th1、Th17及Th22细胞亚群的变化及临床意义被引量：3
- 2014年
- 目的研究狼疮性肾炎（LN）患者外周血辅助性T细胞1（Th1）、辅助性T细胞17（Th17）和辅助性T细胞22（Th22）及其细胞因子干扰素一1（IFN一1）、白细胞介素17（IL－17）和白细胞介素22（1L－17）的表达情况及其临床意义。方法流式细胞术检测20例LN患者组和20例健康对照组外周血中Th1、Th17和Th22细胞比例；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清中相关细胞因子IFN－1、IL－17及IL－22水平，并进行相关性分析。结果相较健康对照组，LN组外周血中Th17细胞比例增高（P〈0．05），Th22细胞比例减低（P〈0．05），而Th1细胞比例无差异（P〉0．05）；LN组血清中IL－17水平增高（P〈0．05），IL－22水平减低（P〈0．05），而IFN－γ水平无差异（P〈0．05）；Th17细胞比例分别与血清IL－17、系统性红斑狼疮疾病活动指数（SLEDAI）呈正相关（r=0．721，P〈0．05；r=0．225，P〈0．05），而Th22细胞比例与血清IL－22水平呈正相关（r=0．489，P〈0．05）与SLEDAI评分无相关性（r=0．241，P〉0．05）。结论Th17及Th22在LN患者中异常表达可能导致患者自身免疫功能紊乱，促进疾病病理损伤。
- 柯培锋彭桉平陈炜烨黄宪章
- 关键词：辅助性T细胞17
- 超敏cTnT、超敏cTnI、CK-MB质量和CK-MB活性诊断AMI的灵敏度、特异度以及准确度分析被引量：7
- 2015年
- 目的 评价超敏肌钙蛋白T（cTnT）、超敏肌钙蛋白I（cTnI）以及肌酸激酶同工酶质量（CK-MBmass）和肌酸激酶同工酶活性（CK-MB活性）检测在诊断急性心肌梗死（AMI）中的灵敏度、特异度以及准确度,为临床选择适当的诊断AMI指标提供依据.方法 按不同的采血时间点,采用电化学发光法、化学发光法以及透射比浊法测定AMI组、稳定型心绞痛（SAP）组与健康对照组的血清超敏cTn和CK-MB水平,并对结果进行统计学分析,计算各指标的灵敏度、特异度以及准确度.结果 在0、3、6h不同的采血时间点,超敏cTnT诊断AMI的敏感度分别是62.89％、95.88％、100％,特异度分别是98.76％、98.76％、98.76％,准确度分别是79.21％、97.19％、99.44％;超敏cTnI诊断AMI的敏感度分别是72.16％、96.91％、98.76％,特异度分别是98.76％、97.53％、97.53％,准确度分别是84.27％、97.19％、98.31％;CK-MB质量诊断AMI的敏感度分别是27.00％、63.92％、92.78％,特异度分别是92.59％、90.12％、88.89％,准确度分别是55.62％、75.84％、91.01％;CK-MB活性诊断AMI的敏感度分别是28.86％、71.13％、93.81％,特异度分别是87.65％、83.95％、81.48％,准确度分别是55.62％、76.97％、88.20％.结论 超敏cTn诊断AMI的灵敏度、特异度和准确度明显高于CK-MB质量和CK-MB活性;超敏cTn应用于AMI的诊断和鉴别诊断,可以大大提高急性AMI的早期诊断率.
- 张成韩光彭桉平何敏陈炜烨万泽民吴晓宾王云秀王建兵
- 关键词：肌酸激酶同工酶
