陶杉杉
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 供职机构：中国药科大学生命科学与技术学院更多>>
- 发文基金：北京市科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 人干扰素α1b突变体IFNα1b/31K的构建及其生物学评价被引量：3
- 2010年
- 目的:构建干扰素α1b突变体IFNα1b/31K,以期获得高效低毒的新型药物分子。方法:根据合理药物设计,采用定点突变技术,将干扰素α1b第31位氨基酸残基突变为K,并构建表达IFNα1b/31K重组蛋白。纯化后,对其抗病毒活性、抗肿瘤细胞增殖活性和动物体内急性毒性进行考察。结果:IFNα1b/31K表达量占菌体总蛋白的30%以上。纯化后的IFNα1b/31K纯度大于95%,比活性约为IFNα1b的1.7倍,抗肿瘤增殖活性比IFNα1b降低,未见对实验动物的急性毒性作用。结论:成功设计构建并表达了高效低毒的IFNα1b突变蛋白分子。
- 陶杉杉毛德才刘金毅陈依军
- 关键词：干扰素Α1B低毒
- 集成干扰素突变体ⅡFN_(72C)的构建及其聚乙二醇定点修饰被引量：1
- 2010年
- 目的:设计构建集成干扰素突变体IIFN72C并进行聚乙二醇定点修饰,以获得高活性的长效干扰素分子。方法:利用蛋白质分子同源模建,选择在集成干扰素分子IIFN的第72位引入半胱氨酸残基构成集成干扰素突变体IIFN72C。诱导表达后经包涵体变复性和层析纯化,与单甲氧基聚乙二醇(mPEG-MAL)定点偶联。修饰产物经纯化后,以SDS-PAGE考察其纯度,用WISH-VSV系统进行生物活性测定。结果:IIFN72C以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,比活性与突变前相当;修饰产物大多数为单修饰体,纯化后纯度大于98%,比活性保留约为修饰前的8%。结论:成功设计并表达IIFN72C用于PEG定点修饰,修饰产物活性保留得以提高。
- 黄湘鹭陶杉杉徐晨李洁周建平
- 关键词：定点突变
