马海立
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：湖南师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：湖南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 金鱼PP2A-B′家族δ基因cDNA的克隆及表达分析被引量：1
- 2009年
- 通过3′-RACE及5′-RACE技术克隆得到了金鱼蛋白磷酸酶2A(protein phosphatase2A,PP2A)调节亚基B′家族δ(Delta)基因的cDNA全序列.结果显示,金鱼δ基因cDNA全长2415bp,编码一个含555个氨基酸的蛋白.序列分析表明,该基因编码的蛋白与已知其他物种对应的B′家族蛋白质均有着很高的同源性.RT-PCR分析证明,该基因mRNA表达水平在大脑中为最高,肝脏、精巢、卵巢、肾脏和鳃中次之,鳍中最少.在不同胚胎时期中,两细胞期、多细胞期、囊胚期和原肠胚期表达最高,其他时期相对较低.在蛋白水平上,精巢、卵巢、大脑和心脏中最高,肝脏中次之,肾脏、鳃和鳍中最少.在胚胎中,两细胞期、多细胞期、囊胚期、原肠胚期和神经胚期及视原基期表达最高,脑泡分化和眼色素期表达量最少.由此可以推测PP2AB′-δ基因在金鱼不同组织和胚胎发育的不同时期中可能起着多种重要作用.
- 付虎马海立郑春兵吕家韩喻向前李炽彭云磊廖高鹏刘文彬肖亚梅刘筠李万程
- 关键词：PP2A蛋白磷酸化
- 金鱼蛋白磷酸酶2A-B″家族Alpha和Gamma调节基因的cDNA克隆及mRNA表达被引量：8
- 2009年
- 以金鱼卵巢组织作为材料,运用RT—PCR和cDNA末端快速扩增(RACE)技术克隆得到蛋白磷酸酶2A(PP2A)调节亚基B″家族中γ基因(G5PR)cDNA全序列和α基因(PR130)cDNA部分序列.结果显示γ基因cDNA全长1885bp,编码一个含457个氨基酸的蛋白质.而α基因cDNA长1781bp,编码的多肽共含426个氨基酸,系α亚基的部分蛋白序列.它们与已知其他物种对应的B″家族蛋白质均有着很高的同源性.结构预测分析发现,α和γ两条多肽均存在PP2A调节亚基B″家族成员共有的两个EF-HAND结构域.用RT-PCR的方法检测了这两个基因在金鱼不同组织和胚胎发育不同时期的mRNA表达水平.结果表明,γ亚基在金鱼多种组织和各个胚胎发育时期中均有较高表达且表达量比较平均,仅在卵巢和精巢组织中最为丰富.与γ亚基表达模式相比,α亚基表达呈现明显的组织和胚胎发育阶段差异性,在卵巢和肌肉组织中最高,在肾脏和鳃中最低,在原肠胚、神经胚、脑泡分化和体色素等胚胎发育时期的表达较弱,而在其他时期中的表达较强.据此,推测α、γ两调节亚基可能在金鱼不同组织和胚胎发育过程中起着特定的作用.此外,进一步的分析发现,α基因除参与PP2A全酶功能外还可能具有独立的功能.
- 郑春兵马海立付虎陈合格刘文彬肖亚梅刘筠李万程
- 蛋白磷酸酶PP-1c在不同倍性鱼6种组织中的分化表达模式被引量：3
- 2009年
- 以异源四倍体鲫鲤及其二倍体父/母本(湘江野鲤/红鲫)和子代三倍体湘云鲫等为实验材料,运用W estern-blotting技术及荧光免疫组织化学技术等实验手段,分析了PP-1的催化亚基在上述不同倍性鱼体内的表达模式:蛋白水平检测发现PP-1c在不同倍性鱼的大脑、心脏、肌肉、肾脏、肝脏和性腺6种主要器官组织中均有表达,且不同的组织中显示了明显的差异表达模式,而PP-1c在这4种不同鱼的肌肉组织中的表达差异更显著,其中在异源四倍体鲫鲤中表达最低,在父/母本红鲫中的表达水平相对较高,子代三倍体湘云鲫中的表达最高,这种差异性可能从生化的角度说明了子代与父母本之间的变异性。免疫荧光组化实验结果显示,从整体水平来看,4种不同鱼的同一组织中,PP-1c的表达模式是非常相似的,这可能从蛋白和细胞的水平说明了异源四倍体鲫鲤与其二倍体父/母本及子代三倍体湘云鲫之间的遗传相似性。但对于同一组织的不同细胞的具体表达部位是有差异的,具有细胞特异性。
- 刘文彬刘姣马海立郑春兵付虎袁丹肖亚梅刘少军刘筠李万程
- 关键词：免疫荧光组织化学
- 黄鳝成体性腺组织生殖干细胞的体外培养及鉴定被引量：1
- 2009年
- 通过黄鳝成体性腺组织的体外培养，探讨黄鳝成体性腺生殖干细胞体外分离培养与鉴定的方法．分离黄鳝性腺组织进行植块培养，倒置相差显微镜下观察细胞生长状况．利用H．E、油红0染色、碱性磷酸酶（AP）细胞化学染色等方法对培养细胞进行鉴定．黄鳝成体性腺组织原代培养3～5d，可见组织周围有细胞迁出，并形成生长晕．15d左右，生长晕直径可达3～3．2mm，生长晕中的细胞主要包括：成纤维细胞、神经样细胞、类生殖干细胞三种类型．成纤维细胞呈不对称的长梭形，突起短而多，细胞核较浅，核仁明显，有2～3个核仁，是生长晕的主要细胞成分．神经样细胞具有放射丝状细胞突起，油红O染色呈阳性反应．类生殖干细胞呈圆形，单核或多核，核质比大，AP染色呈现出阳性反应．探索了适于黄鳝成体性腺组织体外培养的条件和方法，并对原代培养的细胞进行了初步鉴定，为进一步利用体外培养的黄鳝成体性腺生殖干细胞开展黄鳝性逆转分子机制研究奠定了基础．
- 廖高鹏赵梅马海立彭新星秦萍萍李万程肖亚梅
- 关键词：黄鳝性腺生殖干细胞碱性磷酸酶细胞培养
- 金鱼SG2NA和Striatin基因的分子克隆及其发育表达分析
- 以金鱼为模式动物,应用RT-PCR结合RACE,从金鱼脑组织克隆了SG2NA和Striatin基因cDNA全长。序列分析显示,金鱼中SG2NA和Striatin基因与人类等其它物种,有着很高的相似性,并且存在相同的功能基...
- 马海立
- 关键词：分子克隆胚胎发育蛋白磷酸酶2A
- 文献传递
