高守一
- 作品数：78 被引量：233H指数：8
- 供职机构：中国疾病预防控制中心传染病预防控制所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- El Tor型霍乱弧菌口服活疫苗候选株IEM108的构建被引量：1
- 2003年
- 目的 构建能够诱导抗菌抗毒素免疫和抵抗CTXΦ转染的霍乱弧菌生物安全性口服活疫苗候选株。方法 以不产毒的ElTor型霍乱弧菌疫苗候选株IEM10 1为出发菌株 ,以管家基因thyA为选择压力 ,在IEM10 1的thyA基因缺失株IEM10 1 T中 ,通过质粒 染色体致死平衡系统表达霍乱毒素B亚单位基因ctxB和介导CTXΦ噬菌体免疫的rstR基因。在家兔模型中 ,通过检测血清杀弧菌抗体和抗CTB的IgG抗体来评价该新建疫苗候选株的免疫原性 ;以对家兔攻毒试验后肠段积液量来评价其保护力。结果 含ctxB、rstR和大肠杆菌来源的thyA基因的重组质粒在IEM10 1 T中稳定存在 ,GM1 ELISA检测ctxB基因能够很好表达。动物试验表明 ,该新建疫苗候选株能刺激机体产生高滴度的血清杀弧菌抗体和抗CTBIgG抗体 ,能较好抵抗至少 4 μg纯品CT和不同毒株的攻击。结论 应用质粒 染色体致死平衡系统构建了能抵抗CTXΦ转染和稳定表达ctxB的生物安全性抗菌抗毒口服活疫苗候选株 ,其在家兔模型中有较好的免疫原性和保护力。
- 梁未丽阚飙于凤刚祁国明刘延清高守一
- 关键词：霍乱弧菌免疫原性
- 霍乱弧菌中存在不含霍乱毒素基因的噬菌体CTXΦ基因组被引量：28
- 1999年
- 目的近年研究发现产毒霍乱弧菌的毒素基因ｃｔｘＡＢ由其溶原性噬菌体ＣＴＸΦ编码，这种丝状噬菌体可携带ｃｔｘＡＢ传递给无毒素基因的霍乱菌株。研究认为ｃｔｘＡＢ基因与ＣＴＸΦ基因组中的其它基因是严格共存的。然而在本实验室研究中，于不含ｃｔｘＡＢ基因的ＥｌＴｏｒ型霍乱弧菌（ＥＶＣ）中发现部分菌株含有ＲＳ基因同源序列，为此对这些菌株作ＣＴＸΦ基因组的进一步研究。方法以ＣＴＸΦ基因组中的ｃｔｘＡ、ｃｔｘＢ、ｚｏｔ、ａｃｅ、ｃｅｐ和ＲＳ１结构基因制备探针，对ｃｔｘＡＢ－菌株染色体作Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ检测，并用ＰＣＲ方法检测ＣＴＸΦ的感染受体毒素共调菌毛（Ｔｃｐ）的ｔｃｐＡ基因。结果发现有４株分离自河水的霍乱毒素基因阴性ＥＶＣ菌株仍含有溶原噬菌体ＣＴＸΦ的基因组，为ｃｔｘＡ－ｃｔｘＢ－ｚｏｔ＋ａｃｅ＋ｃｅｐ＋ＲＳ＋菌株，另有一株分离自病人的ＥＶＣ菌株仅表现为ＲＳ＋。这些菌株均含ｔｃｐＡ基因。结论ｃｔｘＡＢ基因并不一定与ＣＴＸΦ其它基因共存于一个菌株中。
- 阚飙祁国明刘延清刘彩莲刘彩莲
- 关键词：霍乱弧菌霍乱毒素
- 7株O139霍乱弧菌CT基因阴性菌的生物学性状研究
- 1999年
- 目的拟从毒力基因ｃｔｘ阴性的Ｏ１３９霍乱弧菌中筛选疫苗候选株。方法用常规鉴定技术、Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ技术和兔肠段结扎试验检测了７株霍乱肠毒素（ＣＴ）基因阴性的Ｏ１３９霍乱弧菌的一般特性、毒性和毒性基因；通过小肠免疫家兔，用ＰＢＬ－ＥＬＩＳＡ、ＥＬＩＳＡ和杀弧菌抗体试验评价抗原性；用家兔主动保护试验和乳鼠被动保护试验研究保护效果。结果７株菌都具有Ｏ１３９霍乱弧菌的一般特性，均不引起肠段积液，毒力基因ｃｔｘ、ｚｏｔ、ａｃｅ和ＲＳ１探针杂交结果均为阴性。Ｂ１３和９４００１免疫后０～２８天血清抗体ＩｇＧ效价一直上升，而９４００２免疫后１４天最高；９４００２的血清杀弧菌抗体峰值最高。Ｂ１３免疫家兔后可保护１０５ＣＦＵ毒株的攻击，９４００１和９４００２免疫后可保护１０５～７ＣＦＵ毒株的攻击，９４００２加强免疫后能保护１０７ＣＦＵ毒株的攻击。Ｂ１３免疫血清１４稀释后对乳鼠的保护率为２０％，９４００１和９４００２的免疫血清１１６稀释后的保护率为５０％。结论７株Ｏ１３９霍乱弧菌属于毒力基因遗传单元缺失，无毒或毒性低，其中９４００２的免疫原性和保护效果较好。
- 于纪桂刘延清祁国明高守一章丽娟
- 关键词：霍乱弧菌免疫性
- 结核分枝杆菌分子分型技术研究进展被引量：5
- 2010年
- 吕冰高守一万康林
- 关键词：结核分枝杆菌感染分子分型技术分子流行病学全基因组序列H37RV
- 嗜酸乳杆菌对致泻性大肠埃希氏菌上皮细胞粘附和侵袭的抑制作用被引量：27
- 1999年
- 目的研究嗜酸乳杆菌ＤＯＭＬａ菌株是否对致泻性大肠埃希菌对上皮细胞粘附和侵袭能力具有抑制作用。方法使用了Ｈｅｐ－２细胞粘附实验和Ｈｅｐ－２细胞侵袭实验。结果发现嗜酸乳杆菌ＤＯＭＬａ菌株对Ｈｅｐ－２细胞粘附平均达２２２．４８±３０．７个细菌／细胞。ｔｈｙＡ基因突变菌株ＤＯＭＬａＦ８４对Ｈｅｐ－２细胞的粘附为６１．９６±１０．２７个细菌／细胞。将嗜酸乳杆菌ＤＯＭＬａ菌株与肠产志贺氏样毒素且具有侵袭力的大肠埃希氏菌（ＥＳＩＥＣ）Ｆ１７１菌株共同孵育后，可将后者的粘附和侵袭菌数分别由２７３．４±２４．７个细菌／细胞和１３．４±４．９个细菌／细胞，降低到６５．３±１３．１个细菌／细胞和６．８２±１．６个细菌／细胞，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。将ＤＯＭＬａ菌株与肠侵袭性大肠埃希氏菌（ＥＩＥＣ）８４０１菌株共同孵育后，可将后者对Ｈｅｐ－２细胞的粘附和侵袭数分别由２６９．２±２６．５个细菌／细胞和３４．０±５．３个细菌／细胞降到７０．７±１４．０个细菌／细胞和６．８２±２．９个细菌／细胞，差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论嗜酸乳杆菌ＤＯＭＬａ菌株对ＥＳＩＥＣＦ１７１菌株和ＥＩＥＣ８４０１菌株的Ｈｅｐ－２细胞的粘附和侵袭能力?
- 傅晓丽徐建国高守一
- 关键词：嗜酸乳杆菌细菌粘附大肠杆菌感染性腹泻
- 一种霍乱弧菌新菌株及其活菌苗
- 本发明提供了一种可制备理想菌苗的新的霍乱弧菌菌株，该菌株缺失了毒力因子的结构基因，又保持其表面抗原结构，对人体和动物无毒，有良好的免疫能力。本发明还提供了由该菌株制备的口服活菌苗。
- 刘延清祁国明王世霞于永茂段广才章丽娟高守一
- 文献传递
- 霍乱弧菌O139群CTXφ和nct-CTXφ基因组共存新型结构
- 2009年
- 目的霍乱弧菌(VC)O139群CTXφ和nct-CTXφ基因组共存新类型的结构研究。方法分别扩增CTXφ或nct-CTXφ基因组串联体的第一个基因组末端和第二个起始端之间的基因,扩增片段再经RsaI和BglII酶切、型特异引物PCR方法,区分rstR-ig2类型;扩增TLC和RS区之间片段并区分rstR-ig2类型;扩增RTX与CTXφ或nct-CTXφ核心区之间片段。结果O139群VC代表菌株及CTXφ和/或nct-CTXφ的rstR-ig2类型(以上标表示)如下,FJ9510株CTX ETφ、FJ98352株CTXETφ+nct-CTX calcφ、FJ99364株CTXETφ+nct-CTX newO139φ+nct-CTX calcφ、JS9803株CTXETφ+nct-CTX newO139φ、JX94484株CTXETφ+nct-CTX newETφ;不同rstR-ig2类型CTXφ和nct-CTXφ基因组zot基因3′末端46bp序列中20个位点不同,推测的15个氨基酸序列中11个位点不同;O139群VC CTXφ基因组附近序列均为TLC和RTX基因簇,而nct-CTXφ基因组附近均为未知或新类型序列。结论阐明O139群VC CTXφ和nct-CTXφ基因组共存新类型主要变异区及染色体插入位点附近结构。
- 芮勇宇阚飙高守一王前裘宇容
- 关键词：霍乱弧菌噬菌体
- O139群霍乱弧菌中溶原性噬菌体CTXФ的诱导及转染性研究被引量：8
- 2003年
- 目的 探讨新出现的O139群霍乱弧菌中溶原性噬菌体CTXΦ的来源及其是否可产生感染性的噬菌体颗粒 ,从而造成毒素基因的水平转移。方法 用DNA破坏剂丝裂霉素C诱导噬菌体CTXΦ基因组被四环素抗性基因标记的O139菌株BJ30 ,继而体外转染古典型标准菌株 5 6 9B和O395 ,对获得的四环素抗性的转导菌株进行转染噬菌体基因组的鉴定。结果 序列同源性分析表明 ,BJ30菌株中的rstR基因与O1群ElTor型菌株的rstR基因完全一致 ;丝裂霉素C诱导获得了感染性噬菌体颗粒 (CTX TcΦ) ,并成功感染O1群霍乱弧菌 5 6 9B和O395 ,转染率分别为 1.0 4× 10 - 4 和 3.2 7× 10 - 6 。结论 O139群霍乱弧菌能产生感染性CTXΦ颗粒 ,ElTor型菌株不是产生CTXΦ的唯一来源。
- 梁未丽阚飙祁国明刘延清高守一
- 关键词：霍乱弧菌CTXΦ
- 霍乱弧菌抗菌抗毒口服活疫苗候选株的构建被引量：1
- 2000年
- 目的 构建霍乱弧菌抗菌抗毒口服活疫苗候选株 ,并在家兔模型中评价它们的免疫原性及主动保护力。方法 应用染色体 质粒致死平衡系统 ,在无毒的霍乱弧菌中表达霍乱毒素基因 ,继而在家兔模型中进行免疫原性的比较。结果 构建的分别含有突变无毒的ctx 和ct B基因的IEM10 4和IEM10 5菌株免疫家兔后 ,刺激机体产生抗菌与抗毒抗体 ,前者的特异性抗体滴度较后者高 ,家兔主动保护试验中对纯霍乱毒素 (CT)攻击保护前者也高于后者。结论 构建的霍乱疫苗候选株IEM10 4和IEM10 5在家兔模型中均能产生较好的抗菌与抗毒免疫 ,IEM10 4对家兔的免疫原性和主动保护力略高于IEM10 5。
- 夏晓滨刘延清祁国明高守一
- 关键词：疫苗免疫原性候选株
- 霍乱弧菌新类型TCP氨基酸序列生物信息学分析
- 2009年
- 目的研究4种新类型霍乱弧菌(VC)毒力协同调节菌毛(TCP)氨基酸序列进行生物信息学特征。方法基因序列及氨基酸序列利用DNAStar和BLAST进行分析。结果对4种新类型tcpA推测的氨基酸序列的α螺旋、β折叠、疏水性、抗原表位等特征进行分析,并与国外发现的4种类型比较,N末端约100个氨基酸序列的抗原表位等特征高度一致,而C末端约60个氨基酸序列的抗原表位等特征差别较大。在对tcpA基因扩增及测序时,扩增片段包括tcpB基因5#端部分基因及其启动子区,序列分析表明,不同类型tcpB的启动子区差别较大,不同类型tcpB5#端部分基因存在多个位点突变,但均未导致氨基酸变异。结论4种新类型TCP和国外发现的4种类型的C末端抗原表位差别较大,保护性抗原表位主要位于C末端,提示不同类型TCP抗原交叉保护性较弱。
- 芮勇宇阚飙高守一王前裘宇容
- 关键词：霍乱弧菌
