高鑫
- 作品数：2 被引量：5H指数：2
- 供职机构：南京大学医学院更多>>
- 发文基金：南京市医学科技发展项目南京市科技发展计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 敲除牙龈卟啉单胞菌菌毛次要组分FimCDE的载体构建被引量：3
- 2013年
- 目的:构建重组质粒pPHU281-C-Spec-E,用于敲除菌毛蛋白次要组分基因fimCDE。构建fimCDE缺陷的牙龈卟啉单胞菌,为进一步研究FimCDE在感染中的作用奠定基础。方法:厌氧罐培养牙龈卟啉单胞菌菌株ATCC33277,提取基因组DNA后,PCR扩增获得含有人工设计的酶切位点的fimC基因的上游片段及fimE的下游片段,将其克隆到自杀质粒pPHU281内,命名为pPHU281-C-E;再将抗大观霉素的抗性基因插入到C及E片段之间,最终获得重组质粒pPHU281-C-Spec-E。结果:酶切及DNA序列分析验证重组质粒pPHU281-C-Spec-E构建成功。结论:成功构建了含有牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白次要组分基因fimC上游及fimE下游片段的重组质粒pPHU281-CSpec-E,可用于构建菌毛蛋白次要组分FimCDE缺陷的的突变体。
- 黎景景高鑫李宽钰王文梅
- 关键词：牙龈卟啉单胞菌
- 牙龈卟啉单胞菌感染对单核细胞与人脐静脉内皮细胞黏附的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gigivalis,Pg）感染单核细胞后是否增加单核细胞对人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）的黏附并探讨其分子机制,为从牙周病的角度预防动脉粥样硬化的发生提供新的研究思路.方法 应用厌氧罐培养Pg,以感染复数为1∶100感染人单核细胞株THP-1.感染0（对照组）、8和24h后与HUVEC共培养1h,去除未黏附的THP-1后观察THP-1对HUVEC的黏附,再培养23 h后用酶联免疫吸附测定法检测相应细胞因子的表达及黏附分子的变化.结果 Pg感染24h后,THP-1对HUVEC的黏附较对照组提高了13.8％ ～35.2％ （P =0.006）;细胞间黏附分子1的表达量[（164.9±9.1） ng/L]显著高于对照组[（132.5±7.7） ng/L] （P =0.005）;单核细胞趋化蛋白1的分泌量[（221.0±4.9）ng/L]显著高于对照组[（183.2±3.1）ng/L]（P=0.012）;细胞分泌白细胞介素8的量[（787.2±10.3） ng/L]亦显著高于对照组[（587.2±5.1）ng/L] （P=0.002）.结论 Pg感染促进单核细胞与HUVEC的黏附;Pg感染可能是动脉粥样硬化发生的危险因素.
- 张彩霞宋洁黎景景高鑫孙卫斌李宽钰
- 关键词：单核细胞内皮细胞细胞粘附分子
