黎兵
- 作品数:3 被引量:3H指数:1
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- 胰岛素样生长因子-1对奶牛成骨细胞增殖及分化的影响被引量:1
- 2010年
- 研究了外源性胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对体外培养的奶牛成骨细胞增殖、分化及矿化的影响。应用组织块移行法分离奶牛成骨细胞,姬姆萨染色及碱性磷酸酶(ALP)染色进行鉴定。MTT法检测不同质量浓度IGF-1对成骨细胞增殖的影响,比色法检测及放射免疫法(RIA)分别测定细胞基质ALP活性及骨钙素(OC)水平,评价细胞分化功能。结果显示,1~200μg/LIGF-1均能促进奶牛成骨细胞增殖,100μg/L组具有最大刺激效应,且IGF-1干预组细胞光密度值(D值)从第1天到第5天逐渐增加,第7天降低。与对照组相比,10μg/L与100μg/LIGF-1均可显著增强ALP活性及OC水平,增幅达20%~180%(P<0.05或者P<0.01)。结果表明,IGF-1是奶牛成骨细胞增殖和分化代谢促进剂,因此推测IGF-1可以成为动物骨代谢性疾病潜在治疗手段。
- 李素华尹红斌郭定宗周文君黎兵
- 关键词:胰岛素样生长因子-1骨代谢性疾病成骨细胞奶牛
- 新生奶牛成骨细胞的体外培养、鉴定及生物特性被引量:2
- 2008年
- 取新生奶牛肋骨,剪成1 mm3大小骨片,胰蛋白酶消化5次,D-Hank’s液彻底冲洗后,骨片置于含15%FBS的DMEM中培养,获取单层细胞。采用倒置显微镜下观察细胞形态,改良钙-钴法染色,检测碱性磷酸酶(ALP)活性、骨钙素(OC)mRNA丰度及骨钙素蛋白浓度等方法,对细胞进行鉴定。通过MTT法绘制生长曲线,研究细胞增殖特性,茜素红染色观察细胞钙化功能。结果显示,采用本法所获得的细胞具有典型的成骨细胞形态和特性:ALP染色呈阳性,活性水平较高;培养7 d后可检测到骨钙素mRNA表达,12 d后细胞上清液中可检测到骨钙素蛋白;诱导培养2周后细胞可形成钙化结节。提示采用胰蛋白酶消化,组织块移行法所培养的细胞具有成骨细胞特性。本方法可获得高纯度、高活性的奶牛成骨细胞。
- 李素华郭定宗黎兵赵圣杨世锦尹红斌向金梅
- 关键词:成骨细胞细胞培养奶牛
- IGF-I对体外培养的奶牛成骨细胞骨形成的影响
- 目的:观察不同浓度IGF-I对体外培养的成骨细胞骨形成功能的影响。
方法:无菌取出新生奶牛的肋骨采用组织块培养法获取成骨细胞,进行原代、传代培养,取第二代细胞通过形态学观察、碱性磷酸酶染色、钙化结节染色等方法鉴...
- 黎兵
- 关键词:胰岛素样生长因子I成骨细胞钙化结节体外培养
- 文献传递