龚亮
- 作品数：12 被引量：47H指数：4
- 供职机构：华南农业大学资源环境学院农药与化学生物学教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金霍英东青年教师基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 昆虫化学感受蛋白被引量：12
- 2009年
- 化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)是广泛存在于各种昆虫的疏水性蛋白,被认为在昆虫嗅觉行为中执行了运载非挥发性气味分子到达相应受体的功能。文章从序列特征、二级和三维结构、结合配体、表达特征、生理功能和进化地位等方面进行较详细的介绍,并从理论和实践角度探讨CSPs的研究前景和重点。
- 龚亮陈永程功钟国华
- 小菜蛾RISP和RpS16基因结构及表达研究
- 线粒体(mitochondrion)和核糖体(ribosome)，是存再于大多数真核生物细胞中的细胞器。昆虫的一切生命活动都与之密切相关。目前，RNAi(RNA interference)技术已广泛应用于功能基因组学的研...
- 龚亮
- 关键词：核糖体害虫防治基因沉默沉默效应同源克隆
- 小菜蛾线粒体复合物Ⅲ铁硫蛋白基因5′上游调控区域的克隆及序列分析
- 2011年
- 利用Tail-PCR技术克隆了小菜蛾线粒体复合物Ⅲ铁硫蛋白亚基的基因组DNA序列,全长5 013 bp,GenBank登录号为HM210791。研究表明,该基因具有3个内含子,大小分别为96 bp、577 bp和549 bp,且其内含子两端具有典型的GT-AG结构。生物信息学分析表明,该基因5′上游调控区域不仅包括TATA-box等启动子核心序列,而且含有BR-C Z4、Hb、Dfd、CF2-II和HSF等转录因子结合位点。进一步鉴定了该基因的转录起始位点、启动子序列和CPG岛区域。为小菜蛾线粒体复合物Ⅲ铁硫蛋白亚基的转录调控机制和具体的生理功能研究提供一定基础。
- 龚亮张彦博耿鹏胡美英
- 关键词：小菜蛾TAIL-PCR
- RNAi及其在害虫防治中的应用被引量：5
- 2014年
- RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由非编码的小分子双链RNA引发的序列特异性转录后基因沉默现象,普遍存在于线虫、真菌、昆虫和动植物等多种生物中。近年来,RNAi技术在昆虫中的成功应用为一系列新颖的、环境友好的害虫防治策略提供了理论依据。文章综述了RNAi技术的作用机制、dsRNA吸收机制及在害虫防治等领域的研究成果,并展望了该技术的应用前景。
- 齐江卫龚亮王会冬桑松胡美英翁群芳
- 关键词：RNAI双链RNA基因沉默害虫防治
- 家蝇细胞凋亡起始酶Caspase-1基因的克隆及在不同虫态的表达被引量：1
- 2009年
- 为了研究Caspases家族在昆虫发育变态中的作用,通过RT-PCR扩增并结合RACE技术,克隆得到家蝇Muscadomestica Caspase-1基因1条,命名为Mdom-Caspase-1(GenBank中cDNA序列号为EU854472,氨基酸序列号为ACF71490)。该基因全长1295bp,阅读框序列870bp,共编码289个氨基酸,理论分子量32.83kDa,等电点8.67。Mdom-Caspase-1蛋白有5个保守的半胱氨酸位点QACQG,具有Caspase的典型特征;整个分子呈现亲水性,有8个区域共89个氨基酸为亲酯性,蛋白质二级结构主要由11个α螺旋区、7个β-折叠区、17个β-转角区组成。昆虫间Caspase-1分子具有明显的保守性,Mdom-Caspase-1与黑腹果蝇Drosophila melanogaster、埃及伊蚊Aedes aegypti和致倦库蚊Culex quinquefasciatus的Caspase-1氨基酸序列相似性为65%～77%。RT-PCR半定量分析结果表明,Mdom-Caspase-1基因在家蝇各个虫态中均有表达,但在卵期、3龄幼虫、预蛹、蛹和羽化5d的雌虫中的表达量明显高于其他虫态。这些结果提示Caspase-1可能与昆虫发育变态关系密切,为进一步研究昆虫Caspase-1功能、设计Caspase-1抑制剂提供了分子基础。
- 程功龚亮陈永胡美英钟国华
- 关键词：家蝇细胞凋亡CASPASE-1克隆表达量
- 小菜蛾气味受体蛋白PlxyOr83b基因的克隆及表达被引量：2
- 2011年
- 【目的】克隆小菜蛾Plutella xyostella气味受体Or83b基因,并进行原核表达,为研究小菜蛾寄主选择行为的分子机理,开发昆虫行为调节剂提供基础。【方法】提取小菜蛾的总RNA,反转录获得总cDNA,采用RT-PCR方法扩增目的基因,将其克隆至T载体并测序,然后将目的基因克隆到大肠杆菌Escherichia coli表达载体pET-32a(+)中表达。经酶切、PCR及测序鉴定正确后转化BL21(DE3)菌株,用IPTG诱导表达,通过SDS-PAGE,Western印迹鉴定表达蛋白。【结果】获得了编码小菜蛾Or83b的cDNA序列,该基因阅读框长1 413 bp,编码471个氨基酸,预测的等电点为7.19,命名为PlxyOr83b(GenBank登录号为GQ923610);成功构建了pET-PlxyOr83b原核表达重组质粒,目的基因获得高效表达,其融合蛋白分子量为32.0 kD,Western blot检测结果进一步表明PlxyOr83b在大肠杆菌DE3中得到正确表达。【结论】成功克隆和表达了小菜蛾气味受体基因PlxyOr83b,该基因与其他昆虫Or83b基因基本一致。
- 李珣刘晶晶龚亮陈永钟国华
- 关键词：小菜蛾气味受体基因克隆原核表达
- 水稻纹枯病菌粗毒素提取及活性初步研究被引量：15
- 2009年
- [目的]研究水稻纹枯病菌的致病机制及毒素的活性成分。[方法]将水稻纹枯病菌Rhizoctonia solani在改良R ichard培养基中培养,培养滤液经离心、灭菌、活性炭粒吸附层析、甲醇洗脱、蒸馏水洗脱、浓缩得培养液粗提物、甲醇粗提物以及水粗提物,并对3种粗提物进行活性测定。[结果]3种粗提物均为黄褐色膏状物;活性测定表明,3种粗提物对水稻胚根、胚芽都有明显的生长抑制作用,对水稻4叶期幼苗都有致萎作用,对水稻离体叶片也有不同程度的毒害作用,能产生与病原菌侵染类似的云纹状褪绿斑。[结论]水稻纹枯病菌毒素的活性组分可能有多种成分。
- 黄文文向准龚亮钟国华
- 关键词：水稻纹枯病粗毒素生物活性
- 系统RNA干扰及在昆虫中的应用被引量：2
- 2012年
- 系统性是RNA干扰(RNA interference,RNAi)在植物和线虫中的一个重要特性,即RNAi沉默信号可以在细胞和组织间进行传递,近年来研究发现某些昆虫中也存在系统RNAi现象。RN Ai技术对很多领域的发展具有重要的促进作用,包括功能基因组学和害虫防治等领域。综述线虫,昆虫的系统性RNAi研究概况以及RNAi在昆虫领域的应用现状,并展望其应用前景。
- 王会冬龚亮胡美英洪鹏
- 关键词：RNA干扰昆虫
- 水稻纹枯病菌粗毒素提取及活性初步研究被引量：4
- 2009年
- 1材料与方法
1．1材料供试水稻品种为金优602，购于广东省良种引进服务有限公司。供试菌株为水稻纹枯病菌菌株GD-11，取自该实验室的菌种保藏室。
- 黄文文向准龚亮钟国华
- 关键词：水稻纹枯病菌粗毒素活性供试菌株良种引进菌种保藏
- 甜菜夜蛾PAP基因克隆及在高温胁迫下其表达量的变化被引量：2
- 2011年
- 紫色酸性磷酸酯酶(purple acid phosphatase,PAP)在生物逆境胁迫中具有至关重要的作用,而在昆虫中此类基因极少见于报道。首次克隆和分析了甜菜夜蛾PAP基因cDNA 3’末端序列,在GenBank登录后,获得序列号为HM566114,其长为759个碱基对,推测编码252个氨基酸。此多肽序列具有高度保守性,其相似性分别为:埃及伊蚊(Aedes aegypti)84%;黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)52%,赤拟谷盗(Tribolium castaneum)50%。为了研究高温对甜菜夜蛾PAP基因表达量的影响,利用RT-PCR技术,检测30℃,35℃,40℃胁迫下甜菜夜蛾2龄幼虫体内PAP基因表达量的变化,其中设对照组为25℃。结果表明:高温对甜菜夜蛾2龄幼虫PAP基因表达具有明显的诱导作用,30℃,35℃,40℃分别处理10,20 h的表达量均显著高于对照组25℃分别处理的10,20 h(P<0.05)。相比于对照组,在30℃处理20 h的表达量最高,表明PAP基因的表达与其抗高温能力之间存在一定的关系。
- 胡振龚亮张彦博胡美英
- 关键词：甜菜夜蛾CDNA克隆半定量RT-PCR
