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丁娟: 作品数：14 被引量：22H指数：3; 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>; 发文基金：国家自然科学基金教育部基金湖北省科技攻关计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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IP和SP在自发性高血压大鼠耳蜗中的表达与意义被引量：1: 2004年; 目的　通过研究两种神经肽VIP(血管活性肠肽 )、SP(P物质 )在自发性高血压大鼠耳蜗中的表达 ,探讨VIP、SP在高血压性内耳疾病中的作用。方法　采用免疫组织化学SABC法 ,观察VIP、SP在自发性高血压大鼠耳蜗中的表达 ,并利用图象分析系统测量阳性表达区域平均光密度值 ,进行定量分析。结果　基底转螺旋神经节细胞数目高血压组明显少于正常组 (P <0 0 1) .螺旋神经节细胞胞浆中和血管纹处均有VIP和SP表达。在螺旋神经节细胞胞浆中 ,VIP和SP的含量两组间差异无显著性意义 (P >0 0 5 ) ;在血管纹中 ,VIP的表达高血压组高于正常组 (P <0 0 5 ) ,而SP的含量差异无显著性意义(P >0 0 5 )。结论　VIP和SP都是听觉传导通路的神经递质 ,而且VIP还参与耳蜗微循环的神经体液调节。; 丁娟龚树生常青; 关键词：耳蜗自发性高血压血管活性肠肽 SP 神经肽

喉鳞癌中碱性成纤维细胞生长因子及其双受体系统的研究被引量：2: 2006年; 陈广理罗凌惠丁娟刘英鹏王建亭龚树生; 关键词：碱性成纤维细胞生长因子受体系统硫酸乙酰肝素蛋白多糖喉鳞癌酪氨酸激酶受体 SULFATE

血管内皮生长因子及碱性成纤维细胞生长因子在喉癌细胞Hep-2中的表达被引量：3: 2006年; 目的研究血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(basicfibroblast growth factor,bFGF)在喉癌细胞Hep-2中的表达,及其与喉癌细胞生长、浸润及转移的关系。方法培养Hep-2和正常永生化表皮细胞HaCaT,提取总细胞RNA,应用逆转录聚合酶链反应检测VEGF mRNA和bFGF mRNA在Hep-2和HaCaT细胞中的表达。结果VEGF mRNA在Hep-2细胞中高表达,平均相对积分吸光度值为(0.839±0.063);VEGF mRNA在HaCaT细胞中低表达,平均相对积分吸光度值为(0.305±0.066),差异有极显著性意义(t=14.94,P<0.01)。bFGF mRNA在Hep-2细胞中高表达,平均相对积分吸光度值为(0.792±0.058);bFGF mRNA在HaCaT细胞中低表达,平均相对积分吸光度值为(0.296±0.049),差异有极显著性意义(t=17.54,P<0.01)。结论VEGF及bFGF与喉癌细胞的生长、浸润及转移有密切关系。; 陈广理龚树生罗凌惠丁娟刘英鹏鄢开胜陈沛; 关键词：血管内皮生长因子碱性成纤维细胞生长因子喉癌HEP-2细胞逆转录聚合酶链反应

利诺吡啶对豚鼠耳蜗外毛细胞和支持细胞钾电流的影响被引量：1: 2003年; 目的　观察KCNQ家族钾通道特异性阻滞剂利诺吡啶 (linopirdine)对豚鼠耳蜗单离外毛细胞和Deiters细胞 (支持细胞 )总钾电流的影响 ,初步探讨KCNQ家族钾通道在耳蜗外毛细胞和Deiters细胞的分布。方法　运用膜片钳技术 ,在全细胞模式下记录正常细胞外液中 8个外毛细胞和5个Deiters细胞的总钾电流 ,并观察 10 0 μmol/L利诺吡啶对外毛细胞和Deiters细胞总钾电流的影响。结果　在正常细胞外液中 ,单离外毛细胞可记录到四乙基二乙胺敏感的外向性钾电流和静息膜电位附近激活的内向性钾电流 (theK+ currentactivatedatnegativepotential,IKn)两种钾电流 ,而单离Deiters细胞中只记录到外向整流性钾电流。加入 10 0 μmol/L利诺吡啶后 ,外毛细胞中的四乙基二乙胺敏感的钾电流减小 ,IKn被完全抑制 ;而Deiters细胞中的外向整流性钾电流大小无变化。结论KCNQ家族钾通道存在于豚鼠耳蜗外毛细胞 ,其介导的钾电流是四乙基二乙胺敏感的钾电流的组成部分 ,并构成全部的IKn;但KCNQ家族钾通道不存在于豚鼠耳蜗Deiters细胞。; 常青龚树生丁娟唐明Jürgen Hescheler; 关键词：耳蜗毛细胞钾离子通道膜片钳技术

胞外钙对豚鼠耳蜗Deiters细胞钾电流的调制: 2005年; 为观察胞外钙对豚鼠耳蜗单个离体Deiters细胞钾电流的调控作用并探讨其机制,实验记录了:Deiters细胞在正常细胞外液和无钙外液中的全细胞钾电流(whole cell K+ currents,Ik),并分析了其电生理学特性的改变。结果观察到,Deiters 细胞与在正常细胞外液中相比,在祛除细胞外液中的Ca2+后,IK电流幅值明显增加,弦电导值亦明显增加,但其平衡电位未明显改变。在无钙外液中,Ik电流的反转电位向超极化方向明显移位,更接近于按照Nernst方程得出的K+理论平衡电位;而且其稳态激活曲线亦向超极化方向明显移位,但其激活趋势与正常相比无明显改变。此外,观察了Deiters细胞中钙抑制性钾电流的电流-电压关系和电导-电压关系,发现两者均呈“S”形,提示此钙抑制性钾电流可能存在2种不同的钾电导成分。由此,推测可能有两种机制参与胞外钙对Deiters细胞钾电流的调控:(1)Deiters细胞中的IK通道可能存在一个Ca2+敏感结构域,胞外Ca2+可能通过改变此结构域而对IK电流产生调制;(2)Deiters细胞中可能存在一种新型的双相门控性钾通道或钾通道耦联型受体或是一种新型的钾通道亚型,祛除胞外Ca2+可激活此新型钾电导而对IK电流产生调制。由此推测,在听觉形成过程中,胞外钙浓度下降可以对Deiters细胞的全细胞钾电流产生调制,从而更有利于Deiters细胞内K+外流,进而有效地缓冲外毛细胞周围的K+浓度;而且还可以使Deiters细胞产生更快的复极化并有利于维持其静息状态。; 常青龚树生丁娟唐明JürgenHescheler; 关键词：耳蜗调制

血管内皮生长因子及受体在喉癌细胞Hep-2中的表达及意义被引量：3: 2005年; 目的:探讨血管内皮生长因子(VEGF)及受体Flt1和KDR在喉癌细胞Hep2中的表达及其与喉癌细胞的生长、浸润及转移的关系。方法:培养Hep2和Hacat细胞,提取总细胞RNA,应用RTPCR方法检测VEGFmRNA在Hep2和Hacat细胞中的表达;Flt1mRNA和KDRmRNA在Hep2细胞中的表达。结果:VEGFmRNA在Hep2细胞中高表达,在Hacat细胞中低表达,其差异有统计学意义(P<0.01)。在Hep2细胞中有flt1mRNA表达,平均积分吸收度(A值)为0.73886±0.13779;未检测到KDRmRNA表达。结论:VEGF及其受体与喉癌细胞的生长、浸润及转移有密切关系。; 陈广理丁娟罗凌惠刘英鹏鄢开胜陈沛宋鹏付勇龚树生; 关键词：喉肿瘤血管内皮生长因子

豚鼠耳蜗部分外支持细胞的分离法: 2004年; 目的 :探讨豚鼠耳蜗部分外支持细胞 (Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞 )的分离方法 ,并建立细胞活性的鉴别标准。方法 :选取健康杂色豚鼠 5只 ,解剖出耳蜗基底膜 ,采用酶解加机械吹打法分离Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞。结果 :可以获得较多数量、活性良好、长短不一的Deiter细胞和Hensen细胞 ,8h内细胞活性较好 ;但外柱细胞数量较少 ,存活时间较短。评价Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的活性标准 :①细胞膜无膨胀或扭曲 ;②细胞核无肿胀、移位 ;③在相差显微镜下细胞呈半透明状态 ,存在双折射现象 ;④细胞内无呈布朗运动的颗粒。结论 :熟悉耳蜗的解剖特性、分离出完整的基底膜 ,增加酶的浓度和加大机械吹打力度是获取活性良好的Deiter细胞、Hensen细胞和外柱细胞的关键 ;评价外毛细胞活性的 4项标准同样可用于判断Deiter细胞。; 常青龚树生丁娟唐明Hescheler J; 关键词：耳蜗细胞分离

非甾体类消炎药治疗肿瘤机制: 2004年; 传统观点认为非甾体类消炎药 (NSAID)是通过抑制环氧合酶 2 (COX 2 )的活性 ,产生一系列抑制肿瘤生长的生物学效应。近几年研究发现NSAID还可通过其他途径抑制肿瘤生长 ,如直接诱导肿瘤细胞凋亡、改变肿瘤细胞周期等。; 丁娟龚树生; 关键词：药物疗法肿瘤

利诺吡啶对豚鼠耳蜗外毛细胞和Deiters细胞钾电流的抑制(英文): 2004年; 为探讨KCNQ家族钾通道在耳蜗外毛细胞和Deiters细胞的功能性表达,我们观察并记录了 KCNQ家族钾通道阻滞剂利诺吡啶对豚鼠耳蜗单离外毛细胞(outer hair cells,OHCs)和Deiters细胞总钾电流的影响。采用酶孵育加机械分离法分离豚鼠耳蜗单个OHCs和Deiters细胞:运用膜片钳技术,在全细胞模式下记录正常细胞外液中8个外毛细胞和5个Deiters细胞的总钾电流,并观察100μmol/L和200μmol/L利诺吡啶对外毛细胞和Deiters细胞总钾电流的影响。结果观察到,在正常细胞外液中的单离外毛细胞,可记录到四乙基二乙胺敏感的外向性钾电流和静息膜电位附近激活的内向性钾电流(the K+ current activated at negativepotential,IKn)两种钾电流,而在单离Deiters细胞中只记录到外向整流性钾电流。在细胞外液中,加入100μmol/L利诺吡啶后,OHCs中的四乙基二乙胺敏感的钾电流峰电流成分被抑制,稳态电流幅值减小,且电流的失活时间常数明显延长;在细胞外液中加入100μmol/L和200μmol/L利诺吡啶后,OHCs的内向性钾电流IKn被完全抑制;而细胞外液中利诺吡啶终浓度为200μmol/L时,Deiters细胞的外向整流性钾电流幅值无明显变化。由此我们推测,KCNQ家族钾通道存在于豚鼠耳蜗外毛细胞,其介导的钾电流是四乙基二乙胺敏感的钾电流的组成部分。; 龚树生常青丁娟; 关键词：KCNQ 钾通道外毛细胞膜片钳技术

串珠素反义cDNA质粒转染对喉癌细胞Hep-2增殖能力的影响被引量：2: 2006年; 目的:研究串珠素反义cDNA质粒转染对喉癌细胞Hep-2增殖能力的影响。方法:利用阳离子脂质体作为载体,把重组真核表达载体串珠素反义cDNA质粒pAP转染喉癌细胞Hep-2,通过RT-PCR、Westernblot及MTT法检测转染后Hep-2细胞串珠素mRNA、蛋白质表达及细胞增殖水平,并观察转染后Hep-2细胞对碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的反应性。将Hep-2细胞分3组:①未转染的Hep-2细胞组(WT组);②空载体phβApr-neo1转染组(neo组);③串珠素反义cDNA质粒pAP转染组(pAP组)。结果:将质粒pAP成功地转入Hep-2细胞,获得了稳定表达串珠素反义cDNA基因的细胞系。串珠素mRNA和蛋白质水平在pAP组低表达,在WT组和neo组高表达,均差异有统计学意义(均P<0.01)。在0.1%FCS的RPMI1640培养基培养下,WT组、neo组和pAP组细胞的增殖率均降低,但pAP组细胞的增殖与WT组和neo组细胞相比明显减低;在0.1%FCS加1μg/LbFGF的RPMI1640培养液培养下,WT组和neo组细胞增殖接近正常,但pAP组细胞的增殖能力较弱。结论:串珠素反义cDNA质粒转染可以有效抑制喉癌细胞Hep-2的增殖能力。; 陈广理龚树生丁娟刘英鹏罗凌惠王建亭陈沛鄢开胜; 关键词：喉肿瘤串珠素反义CDNA 转染

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