丁莉
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 供职机构：南京工业大学生物与制药工程学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程更多>>
- Thermus thermophilus HB8葡萄糖异构酶在大肠杆菌中表达被引量：1
- 2006年
- 为了增加高热稳定性的葡萄糖异构酶的得率,采用PCR技术扩增得到Thermus thermophilusHB8葡萄糖异构酶基因xylA,连接到表达载体pET-22b(+)上,获得重组质粒pET-22b(+)-xylA。将重组质粒转化到大肠杆菌Rosetta(DE3)中,经IPTG诱导后,通过半胱氨酸-咔唑法测葡萄糖异构酶酶活。重组菌经诱导培养,SDS-PAGE电泳结果显示出明显的分子量约为44 kD特异性蛋白质条带,比酶活约为18.562 U/mg,比野生型菌株提高了2倍。
- 丁莉许伟严明许琳
- 关键词：THERMUSTHERMOPHILUS葡萄糖异构酶克隆
- Thermus thermophilus木糖异构酶复合物模型的建立与分析(英文)被引量：2
- 2006年
- Thermus thermophilus木糖异构酶在高果糖浆的工业生产及木糖发酵重组菌的构建方面具有极其广阔的应用前景．本文主要运用结构分析和分子对接及计算软件,确定了Mg^2及木糖异构酶天然底物D-木糖在1BXB晶体结构中的定位,构建出1BXB复合物模型并进行评价与分析．通过对1BXB复合物模型1与1XIC的结构进行比较,发现所构建模型中D-木糖周围的残基在木糖异构酶中高度保守,并且D-木糖的定位与取向与1XIC中底物分子基本一致．
- 许伟严明丁莉李艳许琳
- 关键词：嗜热栖热菌木糖异构酶对接
- 嗜热木糖异构酶在大肠杆菌中的表达、纯化及性质研究被引量：2
- 2009年
- 为获得具有高热稳定性的木糖异构酶,运用基因工程技术,从嗜热栖热菌Thermus thermophilus HB8中克隆到嗜热木糖异构酶基因xylA。测序结果表明,该基因与GenBank数据库中相比271位的碱基A突变为G,导致氨基酸序列中N91D突变。将该基因克隆到载体pET22b(+),并在E.coli BL21(DE3)中进行高效表达。通过热变性和强阴离子交换两步对该酶进行纯化,并对酶学性质进行了研究。结果表明,该酶最适温度为80℃,最适pH为8.0,80℃下半衰期为225 min。在60℃,pH7.5该酶的Km为15.20 mmol/L,Vmax为69.54μmol/min,kcat为50.62/s,kcat/Km为3.33L/s·mmol。研究结果为嗜热木糖异构酶的进一步工业应用奠定了基础。
- 许伟丁莉严明许琳
- 关键词：木糖异构酶嗜热栖热菌纯化酶学性质
- 3-羟基异丁酸脱氢酶的新功能:催化3-羟基丙酸脱氢
- 本研究克隆了来自腊状芽孢杆菌ATCC14579的3-羟基异丁酸脱氢酶(MmsB)基因，在大肠杆菌DE3中成功表达，表达产物经过疏水层析和离子交换色谱纯化，在体外测定了其催化3-HP的活性。表明了3-HIBADH在体内可能...
- 姚天然丁莉严明
- 关键词：3-羟基丙酸氧化脱氢催化活性
- 在酿酒酵母中共表达XYLA和XKS1基因后利用木糖的初步研究被引量：6
- 2006年
- 为了使酿酒酵母较好地利用木糖产生乙醇,将来自Thermus thermophilus的木糖异构酶基因XYLA和酿酒酵母自身的木酮糖激酶基因XKS1,构建到酵母表达载体pESC-LEU中,导入酿酒酵母YPH499中,同时成功表达了两种酶基因。该菌以木糖为唯一碳源进行限氧发酵,木糖的利用率为9.64%,为宿主菌的4.17倍,产生2.22 mmol.L-1的乙醇。同时初步探讨了两种酶基因的表达量对酿酒酵母发酵木糖生成乙醇的影响。木糖异构酶对木糖的利用起关键性的作用,木酮糖激酶的过量表达不利于乙醇生成。
- 李永建严明丁莉许伟许琳yh
- 关键词：木糖异构酶木酮糖激酶木糖酿酒酵母
- XYLA和XKS1在酿酒酵母中的表达及其对木糖利用的影响
- ＜正＞随着石油危机的出现,乙醇作为可再生资源中比较理想的液态燃料正受到人们的越来越多的关注。自然界中木质纤维素资源极为丰富,其主要成份之一是半纤维素。半纤维素容易被酸或者酶水解成木糖,水解产物中的85％～90％为木糖。因...
- 李永建丁莉许伟严明许琳
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