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万业宏: 作品数：32 被引量：41H指数：4; 供职机构：第四军医大学基础医学部神经科学研究所更多>>; 发文基金：国家自然科学基金军队医药卫生科研基金国家重点基础研究发展计划更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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抗角蛋白抗体进入活细胞的共聚焦显微镜观察: 目的:观察抗角蛋白抗体能否进入活细胞。方法:以鼠抗人多分子量角蛋白的IgG单克隆抗体作用于培养中的Tca8113,以黑素瘤细胞为无关细胞对照、抗乙肝病毒表面抗原抗体为无关抗体对照。细胞固定后以荧光标记的羊抗鼠IgG抗体结...; 武彩霞李巍刘玉峰李承新卢宁万业宏; 关键词：TCA8113细胞共聚焦显微镜; 文献传递

抗角蛋白16单克隆抗体对角质形成细胞增殖活性的影响被引量：4: 2001年; 目的研究抗角蛋白单克隆抗体(mAb)对体外培养的角质形成细胞增殖活性与细胞周期的影响。方法以无血清培养基体外原代培养角质形成细胞。应用3H-TdR掺入DNA合成测定法,观察抗角蛋白16mAb(anti-K16mAb)对角质形成细胞代谢增殖的影响。用流式细胞仪分析anti-K16mAb作用后角质形成细胞的细胞周期变化。结果mAb作用后,角质形成细胞样品的cpm降低,并呈抗体剂量依赖方式。流式细胞仪分析表明,处于S期的细胞比例由27%上升至42.2%,同时处于G1期与G2期的细胞比例分别相应下降。结论anti-K16mAb可抑制体外培养的角质形成细胞的增殖活性,且将细胞阻滞于S期,无法进入G2期与M期分裂增殖。; 万业宏李承新刘玉峰高天文夏汝山党育平武彩霞; 关键词：角蛋白16 角质形成细胞增殖活性

小剂量藜芦碱诱发大鼠脑海马CA1区锥体神经元异常放电癫痫脑片模型的特征(英文)被引量：4: 2005年; 背景:阵发性去极化漂移是癫痫活动的脑神经元的细胞学特征,过去认为其产生与突触传递异常有关。近年来,阵发性去极化漂移的内因机制得到进一步关注和重视。目的:观察小剂量藜芦碱诱发大鼠脑海马CA1区锥体神经元产生癫痫样活动的特征,探讨其可能的离子机制。设计:探索性观察实验。单位:解放军第四军医大学的神经科学研究所。材料:实验于2002-10/2004-10在解放军第四军医大学神经科学研究所完成。选择出生后14d 的健康SD 大鼠40只,所需试剂购自天津市医药公司和Sigm a 公司。干预:大鼠经腹腔麻醉后取脑切片,通过0.5μm ol/L 藜芦碱诱发癫痫样活动。在6张脑片上诱发产生阵发性去极化飘移样放电后,灌流液中加入80nmol/L 河豚毒素,在另外5张脑片上,用抗癫痫药物苯妥英(5μm ol/L)替换河豚毒素,观察在不同药物作用下细胞电生理特性的变化。主要观察指标:①细胞放电模式。②电压钳模式下通过细胞I-V 反应计算河豚毒素敏感性持续性钠电流的大小。结果:小剂量藜芦碱细胞外灌流后,随着神经元膜的超极化,大鼠CA1区锥体细胞表现出固定模式的阵发性去极化漂移串样放电,这种电活动可被小剂量(80nm ol/L)河豚毒素或(5μm ol/L)苯妥英所阻断。电压钳模式下测量阈下河豚毒素敏感性钠电流,在膜电位-55,-60,-65m V 范围内,癫痫放电神经元测值明显增大,表明小剂量藜芦碱可增强持续性钠电流,并具有电压依赖性。结论:小剂量藜芦碱可在大鼠脑海马CA1区锥体神经元上诱发出阵发性去极化漂移样癫痫活动。小剂量河豚毒素或苯妥英可阻断这种癫痫活动,其离子机制可能与持续性钠电流的增强有关。; 雷革胜朱俊玲万业宏王文挺胡三觉; 关键词：癫痫藜芦碱膜片钳

大鼠初级传入纤维与脊髓背角神经元间的动作电序列的突触传递(英文)被引量：1: 2004年; 外周感觉神经元通过动作电位序列对信号进行编码,这些动作电位序列经过突触传递最终到达脑部。但是各种脉冲序列如何通过神经元之间的化学突触进行传递依然是一个悬而未决的问题。研究了初级传入Aδ纤维与背角神经元之间各种动作电位序列的突触传递过程。用于刺激的规则、周期、随机脉冲序列由短簇脉冲或单个脉冲构成。定义“事件”(event)为峰峰间期(interspike interval)小于或等于规定阈值的最长动作电位串,然后从脉冲序列中提取事件间间期(in-terevent interval, IEI)。用时间-IEI图与回归映射的方法分析IEI序列,结果表明在突触后输出脉冲序列中可以检测到突触前脉冲序列的主要时间结构特征,特别是在短簇脉冲作为刺激单位时。通过计算输入与输出脉冲序列的互信息,发现短簇脉冲可以更可靠地跨突触传递由输入序列携带的神经信息。这些结果表明外周输入脉冲序列的主要时间结构特征可以跨突触传递,在突触传递神经信息的过程中短簇脉冲更为有效。这一研究在从突触传递角度探索神经信息编码方面迈出了一步。; 万业宏菅忠文治洪王玉英胡三觉; 关键词：互信息

基因工程技术制备的人源性抗Mr48×10^3角蛋白抗体Fab片段的纯化与活性鉴定: 2001年; 目的　用基因工程技术制备人源性抗角蛋白抗体Fab片段 ,并对其纯度、抗原结合活性及特异性等进行鉴定 .方法　将从半合成噬菌体抗体库中成功地筛选到的特异表达抗角蛋白 Fab片段的阳性克隆转化大肠杆菌 ,IPTG诱导表达 ,产物经金属鏊合层析纯化 ,并用 EL ISA鉴定抗原结合活性和特异性、SDS- PAGE鉴定纯度和蛋白印迹检测抗角蛋白抗体 Fab片段识别的抗原组分 .结果　可溶性表达的抗角蛋白抗体 Fab片段经金属鏊合层析可有效地纯化 ,蛋白印迹明确纯化产物为人 Fab片段 .所纯化的 Fab片段在非还原 SDS-PAGE中形成 Mr5 0× 10 3单一条带 ,在还原 SDS- PAGE中可见 Mr 2 3× 10 3,Mr 2 5× 10 3两条带 .EL ISA和 Western blot证实该片段具备良好的抗原结合活性和抗原特异性 .结论　成功表达并鉴定了人源性抗 Mr 4 8× 10 3角蛋白的 Fab可溶性片段 ,为人源性抗角蛋白抗体工程化、进一步研究该抗体的生物活性并提高其临床应用价值奠定了良好的基础 .; 李承新刘玉峰王刚李春英万业宏; 关键词：角蛋白人源性抗体 FAB

实验性神经起步点的不规则节律中的非稳定周期轨道被引量：6: 2001年; 在大鼠坐骨神经结扎模型中 ,记录到放电节律以周期加方式相互转化。在确认了周期二与周期三之间的不规则节律具有混沌性质后 ,借助峰峰间期序列的回归映象方法 ,使用了一种测度增强算法 ,确认了此混沌放电中的非稳定周期轨道结构。提示出非稳定周期轨道在神经不规则放电节律的动力学之中起着重要作用。; 菅忠任维胡三觉万业宏古华光杨继庆; 关键词：损伤神经自发放电混沌

天然抗角蛋白自身抗体与银屑病关系的实验研究被引量：1: 2002年; 目的　探讨天然抗角蛋白自身抗体 (antikeratinautoantibody ,AKautoAb)与银屑病的关系及AKautoAb在银屑病中的作用和意义。方法　应用自银屑病患者血清和鳞屑洗脱液内纯化的AKautoAb ,在体外观察其对培养角质形成细胞DNA合成及细胞代谢的影响。结果　银屑病患者血清内可纯化出AKautoAb ,但其纯化量明显低于正常人 ,鳞屑洗脱液中亦可纯化出AKautoAb ;纯化的AKautoAb在体外能抑制角质形成细胞的代谢活性 (P <0 .0 5 )。结论　存在于银屑病患者血清和鳞屑内的AKautoAb可能是一种具有保护作用的继发性反应。; 李承新刘玉峰迟素敏万业宏高天文; 关键词：角质形成细胞银屑病

天然抗角蛋白自身抗体对体外培养角质形成细胞细胞周期的影响(英文)被引量：4: 2001年; 目的　研究天然抗角蛋白自身抗体对体外培养角质形成细胞细胞周期的影响 .方法　亲和层析法从混和人血清中提取纯化天然抗角蛋白自身抗体 ,然后通过 SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳对纯化得到的抗体进行纯度分析 .利用 MTT比色法与流式细胞仪分析 ,观察纯化抗体对培养人角质形成细胞细细胞周期的影响 .结果　纯化的抗角蛋白自身抗体纯度已达到电泳级 .MTT比色法的结果表明天然抗角蛋白自身抗体对培养的人角质形成细胞细具有显著的剂量依赖性的抑制作用 .相关系数为 - 0 .797.流式细胞仪分析显示 ,浓度为0 .0 112 5 g· L- 1 的抗角蛋白自身抗体处理 72 h后 ,处于 G2 /M+S期的角质形成细胞细比例从 5 6 .2 %下降至 46 .7% ,而处于 G1 / G0 期的细胞比例相应从 43.8%升至 5 3.3% .结论　从正常人血清中提取的天然抗角蛋白自身抗体对体外培养的人角质形成细胞细的增殖具有抑制作用 ,使多数角质形成细胞细滞留于 G1 / G0; 李承新万业宏刘玉峰孙林潮; 关键词：抗角蛋白自身抗体人角质形成细胞细胞周期

家兔抗角蛋白自身抗体独特型抗体的产生及临床意义: 2001年; 目的观察长期注射大剂量同种异体抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)后，家兔血清中针对抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)独特型抗体的产生。方法肌肉注射亲和层析纯化的AK auto Ab(5 mg/kg)，隔日1次，连续90 d，用ELISA检测血清中的抗独特型抗体。结果注射AK auto Ab的家兔产生了针对AK auto Ab F(ab′)2片段的抗独特型抗体，于给药4 wk血清抗体滴度达高峰，以后逐渐降低。结论长期注射大剂量同种异体AK auto Ab的家兔可产生免疫耐受性。; 夏汝山刘玉峰李巍李承新万业宏党育平; 关键词：抗角蛋白自身抗体抗独特型抗体免疫耐受

神经元活动基本性质非线性特征的研究: 胡三觉徐健学鞠躬任维龚云帆万业宏龚璞林菅忠谢勇段建红杨晶; 该课题对大鼠的正常或受损神经元标本采用电生理技术分别引导单个神经元或神经纤维的放电序列以及突触后电位，运用非线性手段进行检测分析；建立相应神经元的理论模型，进行仿真与相空间数值计算；通过生物学实验结果与非线性理论分析的结...; 关键词：; 关键词：神经元非线性电生理

万业宏

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