严佳文
- 作品数：15 被引量：38H指数：3
- 供职机构：湖南农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湖南省科技计划项目国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学天文地球化学工程更多>>
- 柑橘内参基因筛选及转pthA基因甜橙的表达分析
- 柑橘溃疡病（citrus bacterial canker disease）是一种世界检疫性病害,对柑橘产量及品质影响极大,严重危害着柑橘产业的健康发展。胡春华等利用病原基因诱导植物获得抗性原理,将致病基因pthA的核定...
- 严佳文
- 关键词：柑橘内参基因甜橙分子鉴定
- 文献传递
- 利用番茄果实特异启动子E8改造‘外源基因清除’的表达载体及转化金柑研究
- 2015年
- 利用"外源基因清除"技术(‘Gene-Deletor’),将外源基因从转基因金柑果实中彻底清除,可以达到用转基因作物生产出非转基因食品的目的。本研究利用引物pE8F和pE8R从樱桃番茄中克隆果实特异启动子E8,通过SalⅠ和SmaⅠ双酶切置换掉"外源基因清除"载体(pCambia-LF-polseed-FLP,简称Y-A)中的花粉、种子特异启动子PAB5,重新构造"外源基因清除"载体Y-A-E8,利用农杆菌EHA105介导转化实生态金柑,获得转化植株,并通过nptⅡ基因特异引物nptⅡ-F和nptⅡ-R PCR检测阳性转化植株。载体Y-A-E8 SalⅠ和SmaⅠ双酶切结果表明,E8启动子成功替换启动子PAB5,Y-A-E8经EHA105介导转化成功获得11株转化植株且PCR检测到6株为Y-A-E8转基因植株。研究结果可为"外源基因清除"技术在转基因金柑方面的应用提供参考。
- 谢玉明李益严佳文姚润贤Alessandra Gentile邓子牛
- 关键词：金柑
- 柑橘与溃疡病侵染相关的基因表达分析
- 本研究旨在发掘,鉴定与柑橘溃疡病相关的基因,为阐释柑橘抗病及感病机理奠定基础.试验应用定量PCR技术分析了与抗病材料枸橼C-05抗性相关的候选基因CERK1、LYP1、LYP2以及与国内外研究者在感病材料甜橙中发现的,与...
- 严佳文黄龙刘利平汤丹舒巧巧邓子牛
- 转基因枳橙中GA20ox1与rol ABC基因互作关系的研究
- 2011年
- 以转rol基因枳橙实生苗为试验材料,研究其对赤霉素的敏感反应,用荧光定量RT-PCR分析GA20ox1基因和rol基因的表达,并检测幼芽中POD酶活性和植物内源激素含量的变化。结果表明转rol ABC基因枳橙既不属于GA缺陷型,也不属于GA不敏感型,幼芽中GAS、GAS(P<0.05)和IAA显著降低(P<0.01),POD酶活性显著提高(P<0.01)。转rol基因枳橙幼芽中GA20ox1基因mRNA水平相比对照显著下调(P<0.01)。在幼芽、嫩茎中,rol C基因与GA20ox1表达负相关。rol基因通过在幼芽中的高表达下调了GA20ox1基因转录表达,进而抑制了活性GAs在幼芽中的合成,顶端分生组织较低量的活性GAs限制植物茎伸长,在转rol ABC基因枳橙矮化性状建成中发挥重要作用。
- 袁飞荣李芳李芳蒋巧巧严佳文邓子牛
- 关键词：枳橙ROL基因表达植物激素
- 柑橘叶片蛋白质高效提取与溃疡病PthA蛋白质Western blot分析
- 2010年
- 利用三氯乙酸-丙酮法、Tris-HCl提取法、改良PBS法提取柑橘叶片蛋白质,对提取蛋白质进行SDS-PAGE电泳、质谱鉴定和Western blot分析,结果表明,用改良PBS法提取的蛋白质质量浓度达30μg/μL,其SDS-PAGE电泳条带清晰,无杂质干扰,能达到质谱对样品的要求.Western blot分析结果表明,与抗柑橘溃疡病相关的PthA蛋白质在转pthA-nls基因糖橙和转pthA-nls基因冰糖橙中成功表达,pthA-nls基因已整合进甜橙基因组,表达蛋白质具有免疫反应活性.
- 李娜李娜覃磊严佳文陈佩
- 关键词：柑橘叶片蛋白质溃疡病免疫印记
- 柑橘内参基因的稳定性评价被引量：26
- 2012年
- 【目的】为了筛选在柑橘中稳定表达的内参基因,以确保柑橘基因表达分析结果的可靠性。【方法】选取Actin、18SrRNA、rpII、GAPDH、UBQ10、UBQ1作为候选内参基因,以geNorm、Normfinder、BestKeeper以及RefFinder软件分析这6个基因在冰糖橙的根、茎、叶、果实以及干旱、低温、溃疡病、衰退病胁迫下叶片中的表达稳定性。【结果】结果表明,在不同柑橘器官及不同胁迫处理下的柑橘叶片中,候选内参基因的表达稳定性确实存在差异。在不同柑橘器官之间比较用UBQ10和rpII;干旱胁迫下用GAPDH、18SrRNA和Actin;低温胁迫下用UBQ10、Actin和18Sr-RNA;溃疡病菌侵染胁迫下用Actin、UBQ10和GAPDH;感染衰退病毒时用18SrRNA和rpII。【结论】为了获得较为稳定的表达分析结果,建议根据不同的试验内容选择不同的内参基因组合。
- 肖翠严佳文龙桂友戴素明李大志邓子牛
- 关键词：柑橘内参基因RT-QPCR基因表达分析
- 湖南地区柑桔类植物景观资源的分析及配置模式研究被引量：1
- 2013年
- 湖南地区柑桔资源丰富,为挖掘其在园林景观设计上的应用价值,分析了湖南地区柑桔类植物的生长习性和观赏特点,提出了适合这类植物的果林式、庭荫式、盆栽式和篱垣式等4种园林配置方式。
- 何丽波龙岳林熊兴耀严佳文邓子牛
- 关键词：柑桔园林配置
- 转基因枳橙中GA20ox1与rol基因互作关系的研究被引量：3
- 2011年
- 为分析转rolABC基因枳橙GA20ox1基因与rol基因表达的互作关系,进一步阐释其矮化性状形成的分子机制。以转rol基因枳橙实生苗为试验材料,研究其对赤霉素的敏感反应,用荧光定量RT-PCR分析GA20ox1基因和rol基因的表达,并检测幼芽中过氧化物酶活性和植物内源激素含量的变化。结果表明转rol基因枳橙既不属于GA缺陷型,也不属于GA不敏感型,喷施GA3能促进其茎伸长生长,但恢复不到野生型水平,幼芽中IAA(P<0.01)、GA1和GA4(P<0.05)显著降低,POD酶活性显著提高(P<0.01)。转rol基因枳橙幼芽中GA20ox1基因mRNA水平相比对照显著下调(P<0.01)。B、D系与野生型嫩茎中无明显差异,B、D系老叶中明显降低,E系中嫩茎和老叶中均明显增加。B、D和E系嫩叶中GA20ox1基因转录表达均较野生型高。在幼芽、嫩茎中,rolC基因与GA20ox1表达负相关。rol基因通过在幼芽中的高表达下调了GA20ox1基因转录表达,进而抑制了活性GAs在幼芽中的合成,顶端分生组织较低量的活性GAs限制植物茎伸长,在转rolABC基因枳橙矮化性状建成中发挥重要作用。
- 袁飞荣李芳蒋巧巧Alessandra Gentile严佳文邓子牛
- 关键词：枳橙基因表达植物激素
- 转pthA-nls基因糖橙快繁研究
- 通过对转pthA-nls糖橙与普通糖橙茎段进行萌芽培养、增殖及试管苗生根试验。摸索出适宜糖橙快繁各种培养基配方及培养条件。
结果表明，以MS+6-BA3mg/L的培养基适合于芽萌发，以MS+6-BA0.5mg/...
- 黄佳邓子牛严佳文李娜
- 关键词：快速繁殖培养基配方
- 文献传递
- 转基因甜橙定量PCR分析体系的建立
- 2010年
- 以转pthA-nls基因甜橙45d叶龄叶片、枳橙的根、茎、叶不同器官以及非转基因枳、枸橼、温州蜜柑、沙田柚的45d叶龄叶片为试材,采SYBR GreenⅠ荧光染料法,检验不同柑橘类型以及枳橙不同器官中β-actin基因表达的稳定性,并以β-actin基因作内参基因对pthA-nls基因pthA-nls基因甜橙中的表达量进行分析。结果表明:β-actin基因在柑橘的不同类型及同一类型的不同组织中表达均较恒定,可作为内参基因用于柑橘基因的定量PCR分析;同时,试验还应用建立的方法体系分析转pthA-nls基因甜橙,基本明确各转基因株系中目的基因表达水平。
- 严佳文杨莉袁飞荣张家银李娜李娜王晓君
- 关键词：Β-ACTIN基因甜橙定量PCR
