伍志强
- 作品数：102 被引量：127H指数：6
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- 发文基金：国家自然科学基金北京市自然科学基金北京市科技新星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- LRP16反馈增强ERα介导转录激活活性的研究
- 2007年
- 目的:探讨LRP16对雌激素受体α(ERα)介导转录激活活性的反馈增强作用。方法:ERα模式启动子调控的荧光素酶报告子(3×ERE-Luc)或GC富含的ER反应性LRP16启动子S10(-101bp到-14 bp)调控的荧光素酶报告子(pGL-3-S10)与雌激素受体α(ERα)真核表达载体、LRP16真核表达载体(pcDNA3.1-16)共转染MCF-7细胞,测定3×ERE-Luc和pGL-3-S10的相对荧光素酶活性;3×ERE-Luc或pGL-3-S10与ERα真核表达载体、针对LRP16的小干扰RNA(LRP16-siRNA374、LRP16-siRNA668)或对照小干扰RNA(control-siRNA)共转染MCF-7细胞,测定3×ERE-Luc和pGL-3-S10的相对荧光素酶活性。结果:LRP16增强3×ERE-Luc和pGL-3-S10的相对荧光素活性,抑制LRP16表达显著削弱了3×ERE-Luc和pGL-3-S10的相对荧光素活性,并呈现剂量依赖性,该效应依赖于雌激素对ERα的激活。结论:ERα调控的靶基因LRP16反馈增强ERα介导的转录激活活性,是ERα的一个共激活因子。
- 臧丽母义明韩为东伍志强巴建明陆菊明潘长玉
- 关键词：LRP16雌激素受体Α共激活因子
- FHL2调控Id2功能活性的研究
- 2009年
- 目的:探讨FHL2对Id2蛋白功能的调控效应。方法:将E47、5xE-Box-Luc、pRL-SV40、Id2以及FHL2表达载体分别共转染MCF-7、293T以及SH-SY5Y细胞,双荧光素酶报告基因方法检测不同转染组细胞中的相对荧光素酶活性。结果:三个细胞系中E47均显著上调了报告基因的表达,Id2抑制了E47的转录激活活性,而FHL2通过与Id2相互作用显著消弱了Id2对E47功能的抑制效应。结论:通过相互作用FHL2抑制了Id2蛋白的功能活性,FHL2是一个新的Id2蛋白功能抑制子。
- 伍志强韩为东赵亚力司艺玲杨洁田丽媛孟元光
- 关键词：FHL2ID2
- FHL2与Id蛋白相互作用的表位分析
- 2009年
- 目的:鉴定FHL2与Id家族蛋白成员之间的相互作用及分子表位。方法:GST-pulldown方法检测。结果:FHL2与Id家族的4个成员蛋白均存在直接的相互作用关系,FHL2蛋白中的第二个LIM结构域在FHL2/Id相互作用中是必需的,Id蛋白N端结构区域在介导FHL2/Id相互作用中是必需的。结论:FHL2是一个新识别的Id蛋白广谱相互作用因子,FHL2可能参与Id介导的多种生物学效应以及肿瘤发生与进展。
- 韩为东赵亚力伍志强司艺玲杨洁田丽媛孟元光
- 关键词：FHL2ID基因表达调控
- LRP16通过增强ERα介导的转录激活活性促进乳腺癌MCF-7细胞增殖被引量：3
- 2006年
- 目的:探讨LRP16基因促进MCF-7细胞增殖的分子生物学机制。方法:(1)将ERα模式启动子调控的荧光素酶报告子(3×ERE-Luc)与ER,αLRP16真核表达载体共转染MCF-7细胞,测定3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性;(2)将3×ERE-Luc,ERα真核表达载体、针对LRP16的小干扰RNA(LRP16-siRNA374,LRP16-siRNA668)或对照小干扰RNA(control-siRNA)共转染MCF-7细胞,测定3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性;(3)用Northern印迹与W estern印迹方法检测抑制LRP16基因后MCF-7细胞中ERα下游靶基因对雌激素刺激的反应性。结果:(1)LRP16增强3×ERE-Luc的相对荧光素酶活性,并呈现剂量依赖性,该效应依赖于雌激素对ERα的激活;(2)North-ern印迹结果显示,抑制LRP16表达限制了雌激素对ERα下游靶基因表达水平的刺激上调,包括E2F1、视黄酸受体(RARα)、c-fos和MTA3,但没有影响组织蛋白酶D(cathepsin D)的反应性;W estern印迹结果显示,抑制LRP16限制了雌激素对细胞周期蛋白D1(cyc lin D1)的刺激。结论:(1)雌激素反应性靶基因LRP16反馈增强ERα介导的转录激活活性;(2)LRP16基因通过增强ERα介导的转录激活活性调节其下游靶基因的表达,主要通过改变cyc linD1的水平促进MCF-7细胞的增殖。
- 臧丽韩为东母义明伍志强李琦赵亚力陆菊明潘长玉
- 关键词：LRP16基因细胞周期蛋白D1
- HeLa细胞中LRP16影响电离辐射诱导的NF-κB核转位被引量：3
- 2011年
- 前期研究显示抑制LRP16的表达可以明显增加肿瘤细胞对辐射诱导凋亡的敏感性,但具体机制尚不清楚.大量研究表明,NF-κB信号通路在肿瘤产生辐射抵抗中起着重要的作用.为研究LRP16影响肿瘤细胞对辐射敏感性的可能机制,首先通过免疫荧光技术检测电离辐射刺激后不同时间点NF-κB的核转位情况;然后分别过表达和抑制LRP16的表达,采用Western印迹方法检测NF-κB在核蛋白与浆蛋白中的表达情况、IκB-α总体蛋白水平及磷酸化水平.结果发现,电离辐射后1 h,可见NF-κB明显入核;过表达LRP16可以促进NF-κB入核、提高IκB-α的磷酸化水平、促进IκB-α的降解;反之,抑制LRP16的表达可以抑制NF-κB入核、降低IκB-α的磷酸化水平、阻碍IκB-α的降解.上述研究结果表明,在HeLa细胞中LRP16可以影响电离辐射诱导的NF-κB核转位,该研究为LRP16参与肿瘤细胞产生辐射抵抗现象提供一种可能的机制.
- 马晓星伍志强段玉坤赵亚力李小雷韩为东孟元光
- 关键词：LRP16NF-ΚB电离辐射核转位
- 抑制LRP16基因的表达显著下调TNF-α介导的NF-κB转录活性被引量：1
- 2011年
- LRP16是1个雌激素(E2)通过其受体α(ERα)诱导表达的靶基因.研究表明,LRP16可以作为多种核受体(包括AR、ERα)的转录共激活因子.采用荧光素酶报告检测显示,抑制LRP16基因表达显著削弱了TNF-α(10 ng/mL)介导的NF-κB转录活性;采用免疫荧光和Western印迹法研究抑制LRP16对NF-κB/p65亚基核转位的影响,结果显示,抑制LRP16表达并不能参与影响p65亚基核转位.上述结果提示,LRP16可能以核激活因子角色参与了NF-κB介导的信号途径.RT-PCR实验检测抑制LRP16基因表达对TNF-α诱导NF-κB靶基因调控作用,检测的靶基因包括IκB、A20、IL-8、FLIP、XIAP.结果表明,在这些靶基因中只有XIAP、cIAP2产生了明显的下调趋势.因此,LRP16是NF-κB的1个共激活因子,通过调控NF-κB与靶基因的结合能力,从而增强了NF-κB的转录活性.
- 李小雷伍志强马晓星赵亚力韩为东
- 关键词：LRP16SIRNANF-ΚB转录调控
- 自体骨髓间充质干细胞的扩增方法
- 本发明涉及一种骨髓间充质干细胞培养扩增方法，具体地说是利用培养基与少量自体血清的复配，找出细胞生长最佳的环境，以及在方法中对细胞融合度的严格控制，最终实现快速培养骨髓间充质干细胞的目的，并且自体血清的使用弥补了胎牛血清存...
- 赵亚力郝好杰韩为东司艺玲伍志强
- 文献传递
- LRP16通过调控E-钙黏着蛋白的表达促进MCF-7细胞的侵袭生长被引量：26
- 2006年
- LRP16在原代乳腺癌组织中表达水平与雌激素受体α(ERα)表达状态以及腋窝淋巴结侵袭数目密切相关.为研究LRP16基因对乳腺癌MCF7细胞侵袭生长的影响,并探讨涉及的分子机制,采用基质胶黏附实验与Transwell方法,检测内源性LRP16表达抑制MCF7细胞的体外黏附、侵袭生长与迁移特征.结果表明,抑制LRP16在MCF7细胞中的表达,降低了细胞的体外黏附、侵袭与迁移能力;采用FVB小鼠进行的实验性转移试验结果显示,抑制LRP16显著降低了MCF7细胞的肺转移结节数目;为探索可能的分子机制,采用Western印迹方法,检测了LRP16对乳腺癌转移相关分子MMP2,MMP9,CD44和E钙黏着蛋白表达的影响,结果在LRP16抑制的MCF7细胞中只有E钙黏着蛋白蛋白表达上调.进一步的Northern印迹与免疫组化实验结果表明,抑制LRP16可上调MCF7细胞中E钙黏着蛋白基因的mRNA与蛋白表达水平;共转染与双荧光素酶方法检测LRP16对E钙黏着蛋白基因启动子的表达调控效应,结果显示,LRP16抑制E钙黏着蛋白基因基因5′近端启动子的转录激活,该抑制效应选择性存在于内源性ERα阳性细胞,并且依赖于雌激素的存在;染色质免疫共沉淀方法(ChIP)检测ERα与E钙黏着蛋白基因启动子的相互作用,结果显示,在LRP16基因表达缺陷的MCF7细胞中,ERα抗体沉淀到E钙黏着蛋白基因启动子的DNA序列;上述研究结果表明,抑制LRP16基因表达,削弱了激素依赖型乳腺癌细胞的侵袭生长能力,其分子机制涉及了LRP16通过ERα介导对E钙黏着蛋白基因基因转录激活的调控.
- 韩为东孟元光廖代祥李琦伍志强司艺玲郝好杰母义明赵亚力
- 关键词：LRP16雌激素受体ΑMCF-7
- 嵌合抗原受体及其基因和重组表达载体、CAR133-NKT细胞及其制备方法和应用
- 本发明属于肿瘤生物制品领域，公开了一种嵌合抗原受体及其基因和重组表达载体、CAR133‑NKT细胞及其制备方法和应用，所述嵌合抗原受体为CD133ScFv‑CD8‑CD137‑CD3ζ，包括串联的大鼠生长激素信号肽、CD...
- 韩为东伍志强王晓慧吕海燕王瑶罗灿黄建华陈美霞
- 文献传递
- 5-AzaC对表皮干细胞Oct4基因的诱导作用研究被引量：1
- 2009年
- 目的：探讨并建立表皮干细胞Oct4基因的非转基因诱导方法。方法：分离培养人表皮干细胞,在培养至3-5d出现克隆性生长时加入工作浓度为10μmol/L的5-AzaC,24h后再诱导1次。采用RT-PCR方法,检测经5-AzaC刺激48h后的表皮干细胞Oct4基因转录水平。结果：PCR产物经1%琼脂糖凝胶电泳后,出现247bp（Oct4）和219bp（β-actin）目的片段明亮的特异性条带。结论：5-AzaC能有效激发出表皮干细胞Oct4基因的转录。
- 刘惠玲伍明俊陈美霞李美蓉江梦溪伍志强卢学春赵亚力韩为东付小兵
- 关键词：表皮干细胞OCT4
