乙型肝炎（乙肝）病毒（ hepatitis B virus,HBV）感染是目前最为严重的公共卫生问题之一。世界卫生组织（ World Health Organization,WHO）估计全世界目前约有20亿人感染HBV,其中2.4亿以上为慢性感染,每年新增 HBV 感染约500万例,每年有超过78万人死于急性或慢性乙肝[1-2]。中国是HBV感染的中高流行区,近年来已经通过乙肝疫苗的广泛接种有效地控制了HBV的传播,2006年全国乙肝血清流行病学调查结果显示：1~59岁人群乙肝表面抗原（HBsAg）携带率为7.18%,15岁以下儿童 HBsAg携带率为2.08%,与1992年调查结果相比,我国1~59岁人群乙肝表面抗原（HBsAg）阳性率下降了2.5个百分点,15岁以下儿童下降了7~8个百分点。然而,由于我国人口基数大,因此仍存在庞大的感染群体,据卫生部疾病预防控制局估计,至2006年,全国约有9300万人长期携带HBV,其中慢性乙肝患者约2000万[3]。 HBV感染严重危害了人类的健康,同时也引发了一系列社会和经济方面的问题,是现阶段最为突出的公共卫生问题之一。目前,临床上应用的治疗乙肝的药物包括干扰素、核苷类似物等,然而现有的治疗方法多价格高昂,且无法治愈慢性乙肝、解除患者痛苦,常伴有严重的副作用,并可能诱导HBV突变体产生,且停药后反跳现象较高,因此乙肝疫苗的预防接种是目前最为有效的控制乙肝手段。
目的比较国产及进口重组乙型肝炎(乙肝)疫苗(酵母)[Hepatitis B Vaccine(HepB)Made by Recombinant Deoxyribonucleic Acid Techniques in Yeast]的小鼠体内效力差异。方法选取一定批数的国产及进口HepB-酿酒酵母(Saccharomyces Cerevisiae Yeast,SCY)和HepB-汉逊酵母(Hansenula Polymorph Yeast,HPY),采用1.25微克/毫升(μg/ml)、0.31μg/ml、0.08μg/ml三个稀释度,进行小鼠体内效力测定,使用微粒子化学发光免疫分析法(Chemiluminescence Microparticle Immunoassay,CMIA)测定抗乙肝病毒表面抗原抗体(Antibody to Hepatitis B Virus Surface Antigen,Anti-HBs),对不同疫苗的50%有效剂量(50%Effective Dose,ED50)及Anti-HBs几何平均浓度(Geometric Mean Concentration,GMC)进行比较。结果在SCY表达的HepB比较中,国产疫苗B在ED50及AntiHBs GMC方面均优于其他两家疫苗;在HPY表达的HepB比较中,国产疫苗C的ED50低于其他两家疫苗,进口疫苗的Anti-HBs GMC显著高于国产疫苗。结论部分国产HepB的效力已经达到甚至超过进口疫苗的水平。
目的：对荧光染色法测定重组酵母乙肝疫苗原液中残留 DNA 的影响因素进行探索分析，以了解该方法对本疫苗残留DNA 检定的适用性。方法：参照探针杂交法对乙肝疫苗原液残留 DNA 的测定结果，对乙肝疫苗原液中可能存在 Tween-20、PEG、蛋白等物质对荧光染色法测定残留 DNA 含量的影响进行分析，对该方法的线性范围、用于乙肝疫苗原液残留 DNA 检定的准确性和重复性进行了研究，并对不同来源 DNA 标准存在的差异进行比较。结果：荧光法测定酵母乙肝疫苗残留 DNA 线性范围为2．5～80 ng· mL-1；发现 Tween-20、PEG 等对残留 DNA 检测影响较小，加标回收率均在80％～120％之间；而蛋白质对检测影响较大，经酚-三氯甲烷抽提后可有效去除蛋白质干扰，回收率达到90％左右，CV 小于10％；同时发现不同来源的 DNA 标准品存在荧光标记效率的差异。结论：乙肝疫苗原液经处理去除蛋白干扰后可采用荧光染色法进行残留 DNA 含量的测定，但应注意使用与疫苗表达系统相同宿主来源的 DNA 标准品。
