俞浩
- 作品数：5 被引量：11H指数：1
- 供职机构：中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化
- 2005年
- 该发明专利提供了重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化。
- 姜卫红杨晟俞浩
- 关键词：SARS病毒非典型肺炎病毒冠状病毒S蛋白分离纯化
- 对地中海拟无枝菌酸菌U32的GlnR蛋白的多效性的研究
- 谷氨酰胺合成酶是生物体氮代谢调控中的关键酶.我们克隆了地中海拟无枝菌酸菌U32中与glnA(谷氨酰胺合成酶的结构基因)启动子区域的顺式元件相作用的调控蛋白GlnR,将glnR阻断后,突变菌体为谷氨酰胺合成酶缺陷,GlnR...
- 俞浩
- 关键词：地中海拟无枝菌酸菌
- 文献传递
- 重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化
- 本发明提供了重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化。SARS病毒S蛋白基因被分段和完整地克隆到不同的细菌表达载体进行了表达。S蛋白基因751－1925bp、2005－3410bp、1－1925bp、32－3659bp...
- 姜卫红杨晟俞浩谢幼华汪垣杨勇张伟郑华宝
- 文献传递
- 力复霉素产生菌地中海拟无枝菌酸菌U32丙氨酸脱氢酶基因克隆及表达被引量：1
- 2003年
- 丙氨酸脱氢酶 (EC 1 4 1 1 )可逆催化丙氨酸脱氨生成丙酮酸和NADH。它是生物体内的氨基酸代谢和氨同化途径的关键酶。在地中海拟无枝菌酸菌 (Amycolatopsismediterranei)U32中 ,丙氨酸脱氢酶的活力与力复霉素的生物合成有负相关现象 ,其活力受KNO3全局效应的调控。根据结核分枝杆菌 (Mycobacteriumtuberculosis)和天蓝链霉菌 (Streptomycescoelicolor)的丙氨酸脱氢酶氨基酸的保守序列和地中海拟无枝菌酸菌U32对氨基酸密码子的使用偏好 ,设计一对简并PCR引物。以此引物从地中海拟无枝菌酸菌U32中扩增到一 5 5 5bp的片段 ,并以此片段为探针从地中海拟无枝菌酸菌U32基因组cosmid文库中成功的克隆到了丙氨酸脱氢酶结构基因 (ald)。它编码了一个 371个氨基酸的蛋白质 ,基因的GC含量为 72 5 % ,符合链霉菌的基因结构特征。在起始密码子的上游 6个碱基处 ,有一典型的链霉菌核糖体结合位点(RBS) :AGGAGG ,第 75位的氨基酸为赖氨酸 ,是丙酮酸结合位点。以pET2 8b为载体 ,在E .coliBL2 1 (DE3)中高效表达了ald基因。用IPTG在 2 2℃时诱导得到的丙氨酸脱氢酶活力最高。用His Tag柱纯化了表达的丙氨酸脱氢酶。酶学性质研究表明该酶专一性以L Ala和NAD(H)
- 姚玉峰卢捷俞浩赵国屏姜卫红焦瑞身
- 关键词：地中海拟无枝菌酸菌丙氨酸脱氢酶克隆基因
