- 辣椒疫霉菌的几个重要功能基因的作用机制研究
- 本研究利用辣椒疫霉菌全基因组序列信息,深入开展了六类重要基因功能机制研究,主要包括三类重要细胞壁降解酶:多聚半乳糖醛酸酶(Pgs)、果胶裂解酶(Pel)、果胶甲基酯酶(Pme),诱导坏死蛋白基因(NPP)簇、皱缩坏死基因...
- 冯宝珍李艳青付丽王会征李培谦王和美王秀菊张修国
- 关键词:功能基因分子检测技术晶体结构
- 文献传递
- 辣椒疫霉菌4个果胶甲基酯酶基因的克隆和pcpme6的真核表达研究
- 辣椒疫病在世界范围内广泛发生的土传病害,严重影响世界各国的农业生产,造成巨大的经济损失,病原是辣椒疫霉菌(Phtophthoracapsici)。辣椒疫霉菌是一种土传卵菌,以卵孢子或厚垣孢子在土壤病残体中越冬,可以存活数...
- 冯宝珍
- 关键词:辣椒疫霉果胶甲基酯酶真核表达WESTERNBLOT
- 文献传递
- 辣椒疫霉(Phytophthora capsici)果胶甲基酯酶Pcpme3基因真核表达及功能研究被引量:3
- 2009年
- 【目的】对辣椒疫霉果胶甲基酯酶Pcpme3基因进行真核表达,制备其特异性抗血清,为用Westernblot检测该基因在辣椒疫霉致病过程中的功能奠定基础。【方法】利用TR-PCR分离鉴定Pcpme3的成熟肽片段,克隆于pPIC9K载体。将获得的表达载体转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE分析和免疫家兔制备特异性抗体。【结果】酵母转化子经MD、MM平板筛选和G418抗生素筛选与PCR鉴定,获得Mut+/His+表型高拷贝重组转化子,经1%甲醇诱导后,SDS-PAGE检测发酵上清液,检测出43kD的特异蛋白。重组蛋白免疫家兔制备特异抗血清,Westernblot检测该基因在游动孢子侵染辣椒叶片中的表达,随着病情加重,该基因的表达逐渐增强,从而证明该基因参与了病菌的侵染致病过程。【结论】利用真核表达获得的蛋白制成特异性抗体可以有效地检测Pcpme3在辣椒疫霉侵染寄主过程中的功能特性。
- 贾永健冯宝珍李培谦张修国付红波
- 关键词:辣椒疫霉果胶甲基酯酶真核表达抗血清
- 辣椒疫霉(Phytophthoracapsici)诱导坏死蛋白基因克隆及功能研究
- 辣椒疫病是在世界范围内普遍发生的一种毁灭性病害,能侵染多种茄科及葫芦科植物。最早在1922年,Leon Leonian 记载了发生在墨西哥辣椒疫病,确定其病原为Phytophthora capsici.病原物的成功侵染必...
- 冯宝珍
- 关键词:辣椒疫病基因克隆基因功能