刘丹丹
- 作品数：8 被引量：68H指数：3
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- NFBD1在鼻咽癌组织中的表达及其对化疗敏感性影响的研究
- 目的:研究鼻咽癌组织中NFBD1的表达水平,并探讨NFBD1对化疗药物敏感性的影响。方法:实时荧光定量RT-PCR和免疫组化分别从mRNA水平和蛋白质水平检测正常鼻咽粘膜及鼻咽癌组织中NFBD1的表达。NFBD1SiRN...
- 刘丹丹胡国华刘学良
- 关键词：鼻咽癌化疗敏感性
- p38丝裂原活化蛋白激酶信号分子在子痫前期患者血管内皮细胞损伤中的作用被引量：3
- 2011年
- 目的 探讨p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号分子在子痫前期患者血管内皮细胞损伤中的作用.方法选择2009年9月至2010年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的足月产妇54例为研究对象,其中36例为子痫前期患者,按病情分为子痫前期轻度组（20例）、子痫前期重度组（16例）;同期足月择期剖宫产孕妇为对照组（18例）.采用CD34标记血管内皮细胞,计数各组胎盘微血管密度（MVD）;SP法检测磷酸化的p38 MAPK（p-p38 MAPK）在胎盘组织中的定位;蛋白印迹法检测各组胎盘p38 MAPK及p-p38 MAPK的蛋白表达差异;双抗体夹心ELISA法检测各组血清中可溶性血管内皮生长因子受体1（sFlt-1）及可溶性内皮糖蛋白（soluble endoglin,sEng）的水平.结果 （1）MVD：对照组、子痫前期轻度组及子痫前期重度组患者胎盘MVD分别为103±3、81±5、63±4,各组间两两比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.（2）p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白表达水平：对照组、子痫前期轻度组及子痫前期重度组患者胎盘组织p38 MAPK蛋白表达水平分别为0.84±0.05、0.90±0.14、0.86±0.18,各组间两两比较,差异均无统计学意义（P＞0.05）;p-p38 MAPK蛋白的表达水平分别为0.13±0.05、0.59±0.12和1.16±0.18,各组间两两比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.（3）p-p38 MAPK蛋白的表达部位：p-p38 MAPK蛋白主要表达于胎盘滋养层细胞的胞质及胞核、血管内皮细胞及少量间质细胞的胞核.（4）sFlt-1及sEng的水平：①对照组孕妇血清sFlt-1、sEng水平分别为（5.2±0.3）、（10.9-±0.4）μg/L;子痫前期轻度组分别为（12.5±1.2）、（20.4±5.3）μg/L;子痫前期重度组分别为（19.3±3.0）、（29.5±3.7）μg/L;各组sFlt-1、sEng水平两两比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;②p-p38 MAPK蛋白表达水平与血清sFlt-1、sEng水平的相关性：子痫前期重度组和子痫前期轻度组p-p38 MAPK蛋白表达水平
- 罗欣刘丹丹漆洪波姚珍薇
- 关键词：先兆子痫P38丝裂原活化蛋白激酶类内皮血管血管内皮生长因子受体1受体
- 子痫前期胎盘中生长阻滞和DNA损伤45α基因及p38丝裂原活化蛋白激酶的表达被引量：3
- 2011年
- 目的探讨子痫前期胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α（growtharrestandDNAdamage—inducible45alpha，Gadd45a）基因和p38丝裂原活化蛋白激酶（p38mitogen-activatedproteinkinase，p38MAPK）信号分子的表达，及其与血清中可溶性血管内皮生长因子受体-1（solublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-1，sFlt-1）和可溶性endoglin（solubleendoglin，sEng）的相关性分析。方法选择2009年9月至2010年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的孕妇54例为研究对象，按病情分为子痫前期轻度组20例、子痫前期重度组16例，以足月择期剖宫产孕妇18例为对照组。采用免疫组织化学SP法检测Gadd45α及磷酸化p38MAPK（phospho—p38MAPK，P—p38MAPK）蛋白在各组胎盘组织中的定位；实时荧光定量PCR检测各组胎盘组织中Gadd45amRNA水平；Western印迹法检测各组胎盘组织中Gadd45α蛋白的表达水平、p38MAPK及p-p38MAPK的蛋白表达差异；双抗体夹心酶联免疫吸附法检测各组孕妇血清样本中sFh-1及sEng的含量，并进行单因素方差及LSD-t检验分析。结果（1）免疫组织化学检测Gadd45α与P—p38MAPK蛋白均定位于胎盘滋养层细胞胞质及胞核、血管内皮细胞胞核及少量间质细胞胞核。（2）子痫前期重度及轻度组Gadd45utuRNA相对表达水平（3．33±0．13和2．10±0．11）较正常对照组（1．01±0．18）明显上调，且子痫前期重度组高于轻度组，两两比较差异均有统计学意义（P〈O．05）。（3）Western印迹法检测正常对照组、子痫前期轻度组及重度组患者胎盘组织中Gadd45a蛋白表达水平分别为0．22±0．11、0．65±0．15、1．34±0．17；p-p38MAPK蛋白的表达水平分别为0．32士0．08、0．72±0．12、1．45±0．21，两两比较差异均有统计学意义（P〈O．05）；p38MAPK蛋白水平组间比较差异无统计学意义（P〉O．05）。（4）子痫前期轻度组、重度组孕妇血清sFlt-1、sEng水平�
- 刘丹丹罗欣漆洪波
- 关键词：核蛋白质类细胞周期蛋白质类P38丝裂原活化蛋白激酶类血管内皮生长因子受体1受体
- 5.p38 MAPK信号分子在子痫前期血管内皮细胞损伤机制中的作用探讨
- 目的：计数妊娠晚期人胎盘微血管密度(MVD)；检测胎盘组织中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)信号分子的活化情况及表达定位；测定妊娠晚期孕妇血清中sFIt-1及sEng的含量。探讨p38 MAPK信号分子在子痫...
- 罗欣刘丹丹漆洪波姚珍薇
- 关键词：子痫前期血管内皮细胞损伤P38
- p38 MAPK抑制剂SB203580对缺氧致人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用被引量：3
- 2010年
- 目的观察p38MAPK特异性抑制剂SB203580对缺氧致人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)损伤的保护作用。方法将HUVECs分为正常对照组、缺氧培养组、SB203580+正常对照组和SB203580+缺氧培养组,培养24h后,流式细胞术检测各组细胞的凋亡率;Western blot分析各组细胞p38MAPK蛋白及其磷酸化水平;Transwell小室模型检测各组细胞的迁移率;ELISA法检测各组细胞培养上清中可溶性血管内皮生长因子受体-1(sFlt-1)及可溶性Endoglin(sEng)的含量。结果与正常对照组相比,缺氧培养组细胞的凋亡率、p38MAPK的磷酸化水平、sFlt-1及sEng含量显著增加(P<0.01),细胞体外迁移能力下降;SB203580+缺氧培养组细胞的凋亡率、p38MAPK的磷酸化水平、sFlt-1和sEng的释放较缺氧培养组均下降,体外迁移能力增强(P<0.05);磷酸化p38MAPK的释放水平与sFlt-1及sEng含量呈正相关(r1=0.69,P<0.05;r2=0.71,P<0.05)。结论 SB203580通过特异性阻断p38MAPK信号转导通路,对缺氧培养的HUVECs产生保护作用。
- 罗欣姚珍薇漆洪波刘丹丹陈国庆
- 关键词：P38MAPKSB203580可溶性ENDOGLIN人脐静脉内皮细胞
- 子痫前期孕妇胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α基因的表达变化及其临床意义被引量：2
- 2010年
- 目的 通过检测子痫前期孕妇胎盘组织中生长阻滞和DNA损伤45α（Gadd45α）基因的定位及表达变化,探讨其与子痫前期发病的关系.方法 选择2009年9月至2010年3月在重庆医科大学附属第一医院住院分娩的36例子痫前期孕妇为研究对象,按病情分为子痫前期轻度组（20例）,子痫前期重度组（16例）,另以同期择期行足月剖宫产术的18例健康孕妇为对照组.3组孕妇分娩后取胎盘组织标本,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接（SP）法检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α蛋白的定位及分布,采用逆转录（RT）-PCR技术检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α mRNA表达水平,采用蛋白印迹（western blot）技术检测各组孕妇胎盘组织中Gadd45α蛋白的表达水平.结果 （1）子痫前期轻度组及重度组胎盘组织中均有Gadd45α蛋白表达,主要定位于胎盘滋养层细胞的胞质及胞核中,血管内皮细胞及少量间质细胞胞核也可见阳性染色;对照组胎盘组织中阳性染色较弱,且仅见于胎盘滋养层细胞中,血管内皮细胞中未见阳性染色.（2）子痫前期重度组及轻度组胎盘组织中Gadd45αmRNA表达水平分别为0.75±0.07及0.44±0.13,明显高于对照组的0.18±0.04,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;子痫前期重度组Gadd45α mRNA表达水平与子痫前期轻度组比较,差异也有统计学意义（P＜0.05）.（3）子痫前期重度组及轻度组胎盘组织中Gadd45α蛋白表达水平分别为1.34±0.17及0.65±0.15,两组比较,差异有统计学意义（P＜0.05）;两组也明显高于对照组的0.22±0.11,分别比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 子痫前期患者胎盘组织中Gadd45α mRNA和蛋白表达水平均明显高于健康孕妇,并且随子痫前期患者病情加重其表达上调;Gadd45α定位在与子痫前期发生密切相关的胎盘滋养层细胞中,Gadd45α基因可能参与了子痫前期的发生与发展.
- 刘丹丹罗欣漆洪波
- 关键词：先兆子痫胎盘核蛋白质类细胞周期蛋白质类
- 靶向人Gadd45α基因的shRNA慢病毒载体对缺氧致人脐静脉内皮细胞生物学功能损伤的影响被引量：12
- 2010年
- 目的研究靶向人生长阻滞和DNA损伤45α(Growth arrest and DNA damage 45 alpha,Gadd45α)基因和表达绿色荧光蛋白(Green fluorescert protein,GFP)的shRNA慢病毒载体对缺氧致人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelialcells,HUVECs)表达上调的Gadd45α的沉默作用,初步阐明Gadd45α在缺氧应激致HUVECs生物学功能损伤过程中的作用。方法慢病毒包装后感染HUVECs,筛选最适MOI及感染时间。感染72h后,采用Real-time PCR和Western blot检测细胞中Gadd45αmRNA和蛋白的表达;流式细胞术检测细胞的凋亡率;Transwell小室实验检测细胞的迁移率;ELISA检测细胞sFlt-1和sEng的分泌水平。结果包装后慢病毒载体的滴度为1×108TU/ml,最适MOI为20,最适感染时间为72h,对HUVECs的感染效率约为80%。Gadd45α shRNA慢病毒载体对Gadd45α基因的沉默效率可达80%,阴性对照慢病毒载体对Gadd45α的表达无抑制作用。缺氧可致HUVECs中Gadd45α的表达上调,靶向Gadd45α基因的shRNA慢病毒颗粒可有效抑制缺氧致HUVECs的凋亡,减少sFlt-1及sEng的释放,同时增强其体外迁移能力,与缺氧组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。Gadd45α蛋白的表达水平与sFlt-1及sEng的分泌水平呈正相关(r1=0.89,r2=0.77,P均<0.05)。结论沉默Gadd45α基因对缺氧应激条件下的HUVECs生物学功能具有保护作用;Gadd45α可能是一个关键上游位点,参与子痫前期时sFlt-1及sEng的释放。
- 罗欣刘丹丹漆洪波姚珍薇陈国庆
- 关键词：RNA干扰慢病毒载体缺氧人脐静脉内皮细胞子痫
- 前置胎盘分娩时机及分娩方式与母子安全性被引量：45
- 2009年
- 刘丹丹漆洪波
- 关键词：前置胎盘分娩方式分娩时机安全性母子适时终止妊娠
