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刘丹丹: 作品数：22 被引量：46H指数：4; 供职机构：中国检验检疫科学研究院更多>>; 发文基金：国家质检总局科技计划项目国家科技支撑计划中国检验检疫科学研究院基本科研业务费专项资金更多>>; 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>

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一种人乳铁蛋白双抗夹心酶联免疫检测试剂盒: 本发明公开了一种人乳铁蛋白双抗夹心酶联免疫检测试剂盒，其中，该试剂盒包括：酶联板、包被缓冲液、第一单克隆抗体、封闭液、酶标记的第二单克隆抗体、显色底物和终止液；所述第一单克隆抗体由保藏编号为CGMCC NO.10594的...; 林祥梅王勤刘晓飞付伟冯春燕李晓琳仇松寅刘丹丹; 文献传递

小反刍兽疫血清学检测方法研究进展被引量：1: 2017年; 小反刍兽疫（Peste des petits ruminant,PPR）是由小反刍兽疫病毒（Peste des petits ruminant vrius,PPRV）引起的一种能感染家畜和野生小反刍动物的高度接触性传染病,被世界卫生组织（OIE）列为A类疫病。PPRV是副黏病毒科麻疹病毒属成员,仅存在一个血清型,主要感染山羊和绵羊。感染后康复及接种免疫后的动物可终身免疫。对急性、亚急性和症状不明显的感染及免疫后的动物进行精准的PPRV特异性抗体检测是目前血清学检测的重要研究方向。; 刘丹丹杜方原冯春燕张永宁王彩霞仇松寅刘晓飞王勤吴绍强林祥梅; 关键词：小反刍兽疫血清学检测小反刍动物麻疹病毒 PPRV 终身免疫

一种人乳铁蛋白单克隆抗体对: 本发明公开了本发明提供了一种人乳铁蛋白单克隆抗体对，该人乳铁蛋白单克隆抗体对由第一单克隆抗体和第二单克隆抗体组成，所述第一单克隆抗体由保藏编号为CGMCC？NO.10595的杂交瘤细胞株分泌得到，所述第二单克隆抗体由保藏...; 王勤刘晓飞林祥梅冯春燕李晓琳仇松寅刘丹丹; 文献传递

转基因动物多重快速检测试剂盒及引物: 本发明公开了一种转基因动物多重快速检测试剂盒及引物。所述引物如序列表SEQ ID NO：1至SEQ ID NO：20所示，使用本发明所述的引物，和/或包含该引物的试剂盒可同时检测人乳铁蛋白转基因牛(hLF)、人溶菌酶转基...; 刘晓飞王勤林祥梅冯春燕付伟仇松寅李晓琳刘丹丹

尼帕病毒病的风险分析与防控措施被引量：1: 2013年; 从生物安全等级上来说,尼帕病毒病属于第四级病毒,非常危险,包括人在内的多种动物均可被感染,该病毒毒力强,死亡率高,后果严重,因此本文针对尼帕病毒病的风险及其防控措施进行了探讨。; 仇松寅林祥梅刘建刘丹丹王勤; 关键词：尼帕病毒病防控措施

野生反刍动物心水病研究进展: 2018年; 心水病是由反刍动物埃立克体引起的一种急性、致死性的蜱传反刍动物传染病。该病不但可以使家养反刍动物发病,还可以使野生反刍动物发病,对野生动物及野生环境造成极大的危害和污染。论文从心水病的历史及地理分布、病原学、流行病学、临床症状、检测方法、发病机制、疫苗,进口野生动物传入心水病的风险分析及口岸防控措施等方面进行了综述,旨在为野生反刍动物心水病的检测与防控研究提供参考。; 王彩霞冯春燕刘丹丹张永宁杜方原刘晓飞林祥梅吴绍强; 关键词：心水病野生动物

含非洲猪瘟病毒核酸序列病毒样颗粒的研制及其在检测方法中的应用被引量：2: 2017年; 非洲猪瘟(African swine fever,ASF)是由非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)引起的烈性传染病,为了保证其检测结果的准确性和可靠性,需要研制试剂盒中使用的阳性标准质控品。本试验旨在研制含ASFV核酸序列的病毒样颗粒,并探究其在检测方法中的应用。首先扩增p72基因的全长片段,利用昆虫杆状病毒系统,包装出含有p72基因的ASF DNA病毒样颗粒。为了进一步验证该病毒样颗粒在应用中的可靠性,本研究将病毒样颗粒与ASF的组织毒及细胞毒同时进行DNA核酸提取,进行实时荧光定量PCR。结果表明,本研究制备的病毒样粒子能很好的取代ASFV在实时荧光定量PCR检测方法中作为阳性质控品,且能对核酸提取过程进行质控,实时荧光定量PCR检测试剂盒中,病毒样粒子的最低包装浓度为102 TCID50。进一步研究发现该病毒样颗粒也适用于普通PCR及LAMP检测方法中,最低浓度分别为103和101 TCID50。本试验结果将为规范ASF检测方法,促进ASF检测方法的转化应用及保证检测结果的准确度和可靠性提供科学依据。; 冯春燕杜方原刘丹丹Pershin Andrey王彩霞张永宁吴绍强林祥梅; 关键词：非洲猪瘟病毒样颗粒

非洲猪瘟病毒主要抗原p54-1的原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定被引量：20: 2018年; 为进一步深入研究非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)p54蛋白的主要抗原表位及抗原性质,本试验根据GenBank中p54基因序列(登录号:NC_001659.2)设计表达区域特异性引物,PCR扩增后连接表达载体pGEX6p-1构建pGEX6p-1-p54-1原核表达质粒;将该质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导,SDS-PAGE鉴定融合蛋白的表达,切除GST标签后采用阴离子柱纯化目的蛋白并鉴定;将纯化蛋白与佐剂混合乳化后作为免疫原,免疫小鼠制备p54-1蛋白多克隆抗体;采用ELISA和Western blotting检测抗体的效价和反应特性。结果显示,重组p54-1融合蛋白以可溶形式表达,切除标签后的纯化蛋白能够与ASFV阳性血清发生反应,而与PRRSV和PCV3不发生反应。利用该蛋白免疫获得的多克隆抗体经ELISA检测其抗体效价为1∶128 000。Western blotting结果显示,制备的多克隆抗体能够识别ASFV p54蛋白。表明本研究成功获得了较高纯度的p54-1蛋白,制备的p54-1多克隆抗体具有较高反应性和特异性,为后续非洲猪瘟双抗夹心ELISA检测方法的建立提供依据。; 王彩霞冯春燕杜方原刘丹丹张永宁林祥梅吴绍强; 关键词：原核表达多克隆抗体

非洲猪瘟病毒p54抗原C端的原核表达及多克隆抗体的制备与鉴定被引量：4: 2019年; 利用大肠埃希菌表达非洲猪瘟病毒核心抗原p54蛋白C末端55个氨基酸的肽段(命名为p54-2),制备了多克隆抗体并进行了纯化,以进一步用于非洲猪瘟ELISA试剂盒的研发。将PCR扩增获得的p54-2目的片段与表达载体pGEX6p-1质粒均经过限制性内切BamHⅠ和XhoⅠ双酶切后,构建pGEX6p-1-ASFV-P54-2原核表达质粒。将该质粒转化到大肠埃希菌BL21中,诱导蛋白大量表达,并纯化获得高纯度的蛋白。将纯化的p54-2蛋白免疫小鼠,获得p54-2多克隆抗体并进一步纯化多抗。用ELISA、Westernblot对纯化的多克隆抗体进行效价滴定及特异性鉴定。结果显示,成功构建了pGEX6p-1-ASFV-P54-2重组质粒,在大肠埃希菌中IPTG诱导下,能够高效表达重组p54-2蛋白。用p54-2蛋白免疫Balb/c小鼠获得的多克隆抗体经ELISA检测其抗体效价为1∶128000,说明该蛋白有很好的免疫原性。Westernblot结果显示,制备的多克隆抗体能特异性识别非洲猪瘟病毒p54胞内区,具有较高反应性和特异性,可以用于ELISA检测方法研究和p54抗原表位的鉴定。; 冯春燕王彩霞杜方原张永宁刘丹丹林祥梅吴绍强; 关键词：非洲猪瘟病毒多克隆抗体酶联免疫吸附试验

一种人乳铁蛋白双抗夹心胶体金检测试纸条: 本发明提供了一种人乳铁蛋白双抗夹心胶体金检测试纸条，该免疫胶体金试纸包括依次相连接的吸水垫、基膜、金标垫和样品垫；所述基膜上设置有C线和T线，所述C线上包被有羊抗鼠IgG的抗体，所述金标垫中含有胶体金标记的第一单克隆抗体...; 王勤林祥梅刘晓飞冯春燕付伟李晓琳仇松寅刘丹丹

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