刘复州
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 供职机构：第三军医大学新桥医院更多>>
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- Jagged1活化Notch通路促进破骨细胞分化并抑制其增殖被引量：4
- 2014年
- 目的 观察Jagged1通过活化Notch通路对人外周血CD14＋单核细胞破骨分化、增殖的影响.方法 免疫组织化学法检测Jagged1在肺癌骨转移标本中的表达,Ficoll法联合磁珠分选法分离人外周血CD14＋单核细胞,分别加入Jagged1重组蛋白、Jagged1重组蛋白及γ-分泌酶抑制剂（DAPT）分组培养,采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测组织蛋白酶K（CK）、抗酒石酸性磷酸酶（TRAP）、降钙素受体（CTR）及Notch靶基因发状分裂相关增强子-1（HES-1）、HES相关YRPW主题-1（HEY-1）mRNA的表达,TRAP染色鉴定破骨细胞,扫描电镜检测破骨细胞溶骨功能.细胞计数法（CCK-8）检测CD14＋单核细胞增殖.结果 Jagged1在肺癌骨转移标本中高表达,癌旁组织无或低表达;Jagged1组TRAP、CK、CTR及HES-1、HEY-1 mRNA的表达、TRAP＋细胞数较对照组及DAPT组明显升高（P＜0.05）,而DAPT组与对照组比较均无明显变化;细胞培养48 h,Jagged1组细胞增殖较对照组及DAPT组明显抑制.结论 Jagged1通过活化Notch通路促进破骨前体细胞分化、抑制其增殖.
- 王汝杰邓小军刘复州邱浩邹传奇陈培王洪凯张莹初同伟周跃
- 关键词：JAGGED1破骨细胞NOTCH细胞分化
- 肺癌细胞条件培养液活化Notch通路促进破骨细胞分化被引量：1
- 2014年
- 目的 :体外检测肺腺癌A549细胞条件培养液(conditioned medium,CM)对人外周血CD14+单核细胞破骨分化和增殖的影响,探讨Notch通路相关因子在其中所起的作用。方法 :用含巨噬细胞集落刺激因子(macrophage colony stimulating factor,M-CSF)的α-MEM细胞培养液培养健康成人外周血CD14+单核细胞,作为对照组;用M-CSF和人肺腺癌A549细胞CM培养人外周血CD14+单核细胞,作为A549 CM组;用M-CSF、A549细胞CM和γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-L-丙氨酰-S-苯基甘氨酸t-丁酯{N-[N-(3,5-dil uorophenacetyl)-L-alanyl]-S-phenylglycine t-butyl ester,DAPT}培养人外周血CD14+单核细胞,作为DAPT组。各组均在培养6 d后加入核因子κB受体活化因子配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand,RANKL)继续培养。实时荧光定量-PCR法检测破骨细胞标志基因抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)、组织蛋白酶K(cathepsin K,CK)、降钙素受体(calcitonin receptor,CTR)及Notch靶基因HES-1、HEY-1的mRNA表达;TRAP染色法检测破骨细胞形成;扫描电子显微镜下观察破骨细胞溶骨功能;免疫荧光法检测Notch活性片段NICD的表达情况;CCK-8法检测CD14+单核细胞增殖情况。结果 :A549 CM组TRAP、CK和CTR表达水平以及TRAP+多核细胞数、溶骨面积和细胞核内Notch活性片段NICD的荧光强度均较对照组明显上调(P<0.05),而DAPT组较A549 CM组明显下调,但仍高于对照组(P<0.05);A549CM组HES-1和HEY-1 mRNA的表达水平明显高于DAPT组和对照组(P<0.05),后2者无明显差异;A549CM组细胞增殖率高于对照组,而DAPT组的细胞增殖率最高。结论 :肺腺癌A549 CM可能通过活化Notch通路,促进CD14+单核细胞向破骨细胞分化;同时Notch通路活化可抑制CD14+单核细胞增殖。
- 王汝杰沈伟伟黄晨刘复州胡旭张超初同伟周跃
- 关键词：破骨细胞NOTCH细胞分化
- Jagged1活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨分化但抑制增殖被引量：7
- 2014年
- 目的:探讨Jagged1通过活化Notch通路对RAW 264.7细胞向破骨分化及增殖的影响。方法:将RAW 264.7细胞分三组培养:对照组(细胞培养基+鼠RANKL 50 ng/L)、Jagged1组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白)、γ-分泌酶抑制剂(DAPT)组(细胞培养基+鼠RANKL+Jagged1重组蛋白+DAPT),实时荧光定量PCR检测各组破骨细胞标志基因组织蛋白酶K(Cathepsin K,CK)、抗酒石酸性磷酸酶(Tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)、降钙素受体(Calcitionin receptor,CTR)及Notch靶基因HES-1、HEY-1 mRNA的表达,TRAP染色鉴定破骨细胞,扫描电镜检测破骨细胞溶骨功能。免疫荧光检测NICD的表达变化,CCK-8检测RAW 264.7细胞增殖。结果:Jagged1组TRAP、CK、CTR及HES-1、HEY-1 mRNA的表达、TRAP+细胞数较对照组及DAPT组明显升高(P<0.05),而DAPT组与对照组均无明显变化;细胞免疫荧光显示Jagged1组NICD除表达于细胞膜、细胞质外,细胞核也有较高表达,对照组及DAPT组细胞核中NICD无明显表达;细胞培养48 h,Jagged1组细增殖较对照组及DAPT组出现明显抑制。结论:Jagged1通过活化Notch通路促进RAW 264.7向破骨细胞分化、抑制其增殖。
- 王汝杰刘复州沈伟伟胡旭陈培毛德举卓云云陈武桂周跃初同伟
- 关键词：JAGGED1NOTCH
- 不同前列腺癌细胞对成骨前体细胞增殖和成熟能力的影响
- 2013年
- 目的 :探讨前列腺癌LNCaP和PC-3细胞条件培养液(conditioned medium,CM)对成骨前体细胞MC3T3-E1增殖和分化的影响。方法 :分别用含20%LNCaP CM、20%PC-3 CM和不含CM的α-MEM培养液(作为对照组)处理MC3T3-E1细胞。CCK-8法检测各组细胞的增殖情况,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性检测试剂盒检测各组细胞中ALP的活性,茜素红染色法检测各组细胞的钙化情况,实时荧光定量-PCR法检测各组细胞中Ⅰ型胶原蛋白α1(collagen typeⅠalpha 1,Col1α1)、骨钙蛋白(osteocalcin,OCN)和RUNX2(runt-related transcription factor 2)的mRNA表达水平。结果 :与对照组和LNCaP CM组相比,PC-3CM组MC3T3-E1细胞的增殖能力明显增高(P<0.05);LNCaP CM组MC3T3-E1细胞中ALP的活性明显高于对照组(P<0.05),钙化面积大于对照组(P<0.05);PC-3 CM组MC3T3-E1细胞中ALP的活性较对照组明显降低(P<0.05),钙化面积明显小于对照组(P<0.05);LNCaP CM组MC3T3-E1细胞中Col1α1、OCN和RUNX2的mRNA表达水平均明显高于对照组(P<0.05),而PC-3 CM组MC3T3-E1细胞中Col1α1、OCN和RUNX2的mRNA表达水平均明显低于对照组(P<0.05)。结论 :PC-3 CM可明显促进成骨前体细胞增殖,但抑制其分化成熟;而LNCaP CM可显著促进成骨前体细胞分化成熟,说明该模型能够充分反映不同前列腺癌细胞对成骨前体细胞增殖和分化的差异,可以作为后续研究前列腺癌骨转移机制的体外模型。
- 刘复州邱浩王汝杰邹传奇刘栓得胡旭沈伟伟张超周跃初同伟
- 关键词：前列腺肿瘤细胞增殖细胞分化体外研究
- Jagged1活化Notch通路促进破骨细胞分化并抑制其增殖被引量：3
- 2014年
- 目的 观察Jagged1通过活化Notch通路对人外周血CD14＋单核细胞破骨分化、增殖的影响.方法 免疫组织化学法检测Jagged1在肺癌骨转移标本中的表达,Ficoll法联合磁珠分选法分离人外周血CD14＋单核细胞,分别加入Jagged1重组蛋白、Jagged1重组蛋白及γ-分泌酶抑制剂（DAPT）分组培养,采用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）检测组织蛋白酶K（CK）、抗酒石酸性磷酸酶（TRAP）、降钙素受体（CTR）及Notch靶基因发状分裂相关增强子-1（HES-1）、HES相关YRPW主题-1（HEY-1）mRNA的表达,TRAP染色鉴定破骨细胞,扫描电镜检测破骨细胞溶骨功能.细胞计数法（CCK-8）检测CD14＋单核细胞增殖.结果 Jagged1在肺癌骨转移标本中高表达,癌旁组织无或低表达;Jagged1组TRAP、CK、CTR及HES-1、HEY-1 mRNA的表达、TRAP＋细胞数较对照组及DAPT组明显升高（P＜0.05）,而DAPT组与对照组比较均无明显变化;细胞培养48 h,Jagged1组细胞增殖较对照组及DAPT组明显抑制.结论 Jagged1通过活化Notch通路促进破骨前体细胞分化、抑制其增殖.
- 王汝杰邓小军刘复州邱浩邹传奇陈培王洪凯张莹初同伟周跃
- 关键词：JAGGED1破骨细胞NOTCH细胞分化
