刘志杰
- 作品数：38 被引量：279H指数：8
- 供职机构：贵州大学动物科学学院更多>>
- 发文基金：贵州省农业科技攻关项目贵州省科学技术基金博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学自动化与计算机技术文化科学更多>>
- 猪圆环病毒2型贵州毒株的分离与鉴定被引量：2
- 2012年
- 为分离和鉴定出猪圆环病毒2型(PCV2)贵州株,对送检的3份感染病料进行了分离,并将其分离毒株分别同步接种于PK-15细胞,再特异性扩增和克隆所分离毒株的全基因序列。结果表明:成功分离出3株PCV2贵州株,命名为GZ-QZ1株(1 767bp)、GZ-RH1株(1 767bp)和GZ-CS1株(1 768bp);3株PCV2贵州株全基因组之间的核苷酸相似性为94.6%～99.9%,其中ORF2核苷酸相似性为90.2%～99.9%;ORF2氨基酸一致性GZ-QZ1和GZ-RH1为100%,二者与GZ-CS1的氨基酸一致性均为88.1%。3株PCV2贵州株之间同源,但GZ-CS1存在一定变异。
- 刘志杰曾智勇周莉梁海英
- 关键词：猪圆环病毒2型同源性全基因组
- 禽流感病毒基因组及检测方法概述被引量：1
- 2011年
- 禽流感(Avian Influenza,AI)是A型流感病毒引起的一种禽类传染病,同时也是一种人和动物之间的高度传染性疾病,不但造成了养禽业的巨大经济损失,还对人类公共卫生安全构成了威胁。因此,对禽流感病毒基因组的研究显得十分重要,以为快速、准确的基因诊断等检测技术方法奠定基础。近年来,禽流感病毒检测技术发展迅速,本文就AIV基因组及其检测方法进行了综述。
- 刘志杰李如举周莉曾智勇汤德元王彬甘振磊王凤
- 关键词：禽流感病毒基因组
- 猪木乃伊胎病原体混合感染的多重PCR诊断被引量：1
- 2014年
- 2013年11月,贵州省都匀市某猪场发生了一起母猪流产、产死胎为特征的疾病,为确诊该猪场病原诊断类型,试验采用猪繁殖障碍性病毒性疫病六重PCR检测方法对送检木乃伊胎病料进行了猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CFSV)和乙型脑炎病毒(JEV)的快速检测,结果表明该猪场送检病料存在PCV2和JEV两种病毒的混合感染。
- 王伟丞刘志杰梁海英曾智勇汤德元刘钊
- 关键词：猪圆环病毒2型乙型脑炎病毒
- 犬瘟热病毒贵州株的分离鉴定
- 本实验对贵州株犬瘟热病毒进行了分离鉴定，采用同步接毒法于Vero细胞上分离培养病毒，盲传到第四代即出现了稳定典型的CDV细胞病变。对分离所得病毒进行一系列的理化学试验，并进行分子生物学鉴定，以证实所分离病毒系犬瘟热病毒。
- 周莉刘志杰曾智勇
- 关键词：犬瘟热病毒分子生物学
- 1例仔猪腹泻疾病的多重RT-PCR诊断
- 2013年
- 猪传染性胃肠炎（TGE）是由猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）引起的猪的一种高度接触性传染病，主要特征是呕吐、严重腹泻和脱水性肠炎，对2周龄以内的仔猪危害较大，致死率可达100％；对5周龄以上的猪及成年猪危害较小，病死率低。
- 王伟丞曾智勇刘志杰
- 关键词：腹泻疾病PCR诊断猪传染性胃肠炎病毒仔猪脱水性致死率
- 中西医结合治疗摩拉斗牛急性肠炎兼感冒
- 2011年
- 2010年10月13日,贵州省贵阳市花溪区某农户的摩拉斗牛出现食欲废绝、反刍停止、腹泻、粪便中混有大量黏液和肠黏膜等症状,遂到贵州大学动物医院就诊,通过采用中西医结合治疗取得了较好的疗效,现将诊治情况报道如下。
- 雷红汤德元王彬刘志杰甘振磊周厚品王凤
- 关键词：柴胡注射液感冒鼻镜艮他霉素中西医结合治疗
- 犬瘟热病毒N基因原核表达质粒的构建
- 2011年
- 为了对N蛋白表达作为诊断用抗原、检测犬瘟热病毒(CDV)特异性抗体提供参考依据,以已构建的含犬瘟热病毒N基因的pMD18-N质粒为模板,利用特异性引物进行PCR扩增,得到1 572 bp的N基因开放阅读框,将所得N基因克隆至经相同双酶切处理后的pET32a(+)原核表达载体中,获得重组质粒pET32a(+)-N,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。测序结果显示,目的基因插入位置和阅读框正确,经IPTG诱导表达出分子量约为75 kDa的重组N蛋白。
- 周莉刘志杰曾智勇汤德元李谦王彬张晓杰甘振磊王凤
- 关键词：犬瘟热病毒N基因原核表达
- 犬瘟热病毒贵州株融合蛋白基因原核表达质粒的构建被引量：2
- 2012年
- 为了研究犬瘟热病毒贵州株(CDV-GZ1)完整融合蛋白(F),试验采用PCR方法以pMD18-F质粒为模板,利用特异性引物扩增获得大小为1 989 bp的目的 DNA,并将其克隆至pET32a(+)原核表达载体中,获得重组质粒pET32a(+)-F。结果表明:目的基因插入位置和阅读框均正确,说明F基因原核表达质粒构建成功;质粒pET32a(+)-F在BL21(DE3)中经诱导表达未获目的蛋白,说明CDV融合蛋白可能不适合在该表达系统中进行完整蛋白的表达。
- 曾智勇周莉汤德元刘志杰梁海英
- 关键词：犬瘟热病毒F基因原核表达
- 贵州白香猪的白细胞介素2基因的克隆及其序列分析被引量：1
- 2012年
- 为获得贵州白香猪白细胞介素2基因,以提取的经刀豆蛋白A诱导培养的贵州白香猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,扩增全长猪白细胞介素2(IL-2)基因,并克隆至pMD18-T Simple载体后测序。结果表明:贵州白香猪IL-2基因ORF长为465bp,可编码154个氨基酸,其中前20个氨基酸为信号肽,后134个氨基酸为成熟肽,具有一个潜在的N-糖基化位点;贵州白香猪除与FJ543109(99.4%)、Neijiang(98.7%)、JN851821(98.7%)、AB194099(98.5%)氨基酸一致性相对较低外,与其他猪源IL-2的一致性均为100%,而与其他种属动物的IL-2基因氨基酸一致性则较低,为11.9%～75%。
- 曾智勇周莉刘志杰梁海英
- 关键词：贵州白香猪白细胞介素2基因克隆
- 犬瘟热病毒贵州株CDV-GZ1的分离与鉴定被引量：3
- 2012年
- 为丰富我国犬瘟热病(CD)的流行病学资料,同时为CDV贵州分离株主要抗原基因及结构研究奠定基础,对贵阳市某宠物医院犬瘟热病毒金标卡检测呈阳性病死犬的肝脏、肺脏、淋巴结等组织,取适量经混合研磨过滤后,同步接种于Vero传代细胞上进行病毒分离培养,并对该分离毒株进行理化特性、电镜形态、血清学和核酸检测等系列鉴定。结果表明:在Vero细胞上盲传至第6代时稳定出现特征性的CPE,该毒株为RNA囊膜病毒,电镜下可见胞浆包涵体、病毒粒子呈晶格状排列,病毒可被犬瘟热阳性血清中和,分离病毒为犬瘟热病毒并被命名为CDV-GZ1株。
- 曾智勇周莉汤德元肖超能刘志杰梁海英
- 关键词：犬瘟热病毒
