刘忠
- 作品数：29 被引量：284H指数：11
- 供职机构：上海交通大学药学院更多>>
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- 相关领域：医药卫生农业科学生物学政治法律更多>>
- 直接检测非相干FDM-FSK光纤通信系统的实验研究
- 刘忠
- 基于流式细胞术的华细辛基因组C值测定被引量：2
- 2020年
- 目的建立华细辛Asarum sieboldii Miq.基因组C值的流式细胞术测定方法,估测华细辛基因组大小。方法对8种常用的细胞核解离液进行筛选,根据筛选结果,采用OTTO细胞核解离液,以华细辛幼嫩叶片为材料,以本氏烟草Nicotiana benthamiana Karel Domin为内参植物,运用流式细胞术对华细辛基因组C值进行了测定。结果华细辛基因组C值为(5.197±0.157)pg,估测华细辛基因组大小为5.083 Gb。结论该研究建立了流式细胞术测定华细辛基因组C值的方法,所得数据可为华细辛基因组学和进化生物学研究提供有益的参考。
- 吉平平刘发旺王莉莉李莉伟刘忠
- 关键词：华细辛流式细胞术
- 钩藤碱对LPS诱导的多巴胺能神经元及胶质细胞炎症及TNF-α和IL-1β影响被引量：6
- 2018年
- 目的观察钩藤碱对脂多糖(LPS)诱导的多巴胺能神经元及胶质细胞产生的炎症的影响。方法体外培养胎鼠神经元及神经胶质细胞,通过免疫细胞荧光染色鉴定后,分为4组:空白对照组、LPS模型组、LPS+钩藤碱组、LPS+宁动颗粒组,在干预后0、1、3、6、12 h收集细胞培养液,并ELASA法检测细胞培养液中炎性因子TNF-α,IL-1β的含量。结果 LPS介导的炎性组中,在时间上3、6 h作用TNF-α,IL-1β的含量达到高峰;TNF-α,IL-1β浓度,与LPS模型组比较,空白对照组、LPS+钩藤碱组与LPS+宁动颗粒组培养液中IL-1β含量均显著降低(P<0.05),且LPS+钩藤碱组与LPS+宁动颗粒组间无显著性差异。结论钩藤碱可以显著抑制LPS诱导的神经元及神经胶质细胞的炎性因子TNF-α,IL-1β,起到抗炎而保护神经元作用。
- 张婷李继君孙克兴刘忠Xiaohong Li
- 关键词：钩藤碱多巴胺能神经元胶质细胞
- 华细辛转录组SSR标记的开发及其在华细辛遗传多样性分析中的应用
- 2023年
- 为探索华细辛的遗传多样性,该研究基于转录组测序结果进行SSR标记的开发,并以来自不同地区的华细辛5个种群为分析样本,利用GenALEx 6.5、NTSYS 2.1和Structure 2.3.4等软件进行遗传多样性评估。结果显示,从华细辛转录组中筛选得到的16个多态性丰富且重复性好的SSR标记,以其两侧序列为模板设计引物,能够对华细辛5个种群的150个个体样本进行稳定扩增,共得到56个多态片段,平均每对引物扩增3.5个多态片段,变化范围为2~8个,检测到平均期望杂合度(H_(e))、Shannon′s多样性指数(I)、Nei′s基因多样性指数(H)、多态性信息含量指数(PIC)的均值分别为0.172、0.281、0.429、0.382。种群间遗传分化系数(F_(ST))均值为0.588,与分子方差分析(AMOVA)结果[华细辛种群间变异程度(69%)大于种群内变异程度(31%)]相一致,各种群的多态位点百分率(PPL)范围从大到小依次为SNJ>LN>SY>SZ>TB。主成分分析(PCoA)和UPGMA聚类分析进一步显示,华细辛个体样本均按地理分布进行遗传聚类,与Structure聚类分析结果一致。综上所述,从转录组中开发的SSR标记能够有效评估华细辛自然分布种群间的遗传分化程度和种群遗传结构,揭示华细辛遗传多样性较为贫乏,遗传变异主要体现在种群水平,以及种群间遗传分化程度与地理距离存在相关性。
- 陈梦颖戴瑞贤范玉玲刘忠
- 关键词：华细辛转录组SSR标记种群遗传结构
- 华细辛实时荧光定量PCR分析中内参基因的选择被引量：2
- 2017年
- 选择合适的内参基因是准确分析目标基因表达水平变化的重要条件。选取SAND-1、ACT、18Sr RNA、CYP2、GAPDH、TUB 6个常用的内参基因作为候选内参基因,利用实时荧光定量PCR技术,通过ge Norm、Norm Finder、Best Keeper、Delta CT等软件分析和评价6个候选内参基因在华细辛营养生长期、花期和花后期等不同生长阶段的根、根茎、叶片、叶柄等不同组织中的表达稳定性,筛选适宜华细辛不同生长阶段不同组织基因表达水平分析的内参基因。结果表明,18S r RNA在华细辛所有样品中表达最为稳定,是进行华细辛基因表达水平分析的适宜的内参基因。研究结果可为华细辛重要活性成分生物合成途径相关基因的功能分析,以及基因差异表达的研究提供有效的校正工具,确保基因表达分析结果的准确性与可靠性。
- 赵晓冰潘磊柳威林懋怡李宏庆刘忠
- 关键词：华细辛内参基因GENORMFINDERKEEPER
- 不同保存方法对蜡梅总DNA提取效果的影响及ISSR-PCR验证被引量：16
- 2008年
- 本文以蜡梅新鲜成熟叶片为对照,比较了真空冷冻干燥、硅胶干燥、压标本干燥、45℃烘干、75℃烘干5种叶片干燥方法和4℃保鲜、-20℃冻存、-70℃冻存法对蜡梅总DNA提取效果的影响。结果表明硅胶干燥的样品提取的DNA完整无降解,纯度高,DNA得率为鲜叶的1/3多,压标本干燥的样品可以提到完整的DNA,DNA得率与硅胶干燥的样品相近,提取的DNA含多酚,纯度低。真空冷冻干燥样品的DNA在冷冻干燥过程中小部分受到损伤,DNA得率较鲜叶稍有下降。45℃烘干的样品可以提取到完整的DNA,纯度高,DNA得率约为鲜叶的1/2,75℃烘干的样品的DNA全部降解。ISSR扩增结果表明75℃烘干的样品提取的DNA没有获得扩增产物,其他4种干燥方法提取的DNA的扩增结果与鲜叶相同。鲜叶可在4℃冰箱保鲜存放6d,在-20℃冰箱中冷藏半月,可在-70℃超低温冰箱中长期放置而不影响总DNA的提取质量和ISSR扩增结果。
- 靖相密褚云霞汤庚国张永春刘忠张慧
- 关键词：蜡梅DNA提取
- 古腊梅AFLP分子标记体系的建立及应用被引量：2
- 2008年
- 对古腊梅DNA的提取方法进行了探索,得到了高质量的适合于AFLP分析的DNA。同时对古腊梅AFLP分子标记体系进行了优化,通过对酶切连接反应体系、预扩增和选择性扩增体系的调整,对聚丙烯酰胺凝胶和银染方法的改进,最后得到了适合古腊梅的AFLP分子标记分析体系。应用此体系对古腊梅和100多份腊梅材料进行AFLP分析,发现古腊梅与其他腊梅材料之间存在多态性条带。
- 单丽丽肖敏陆瑞菊王亦菲陆惠丽黄剑华褚云霞刘忠张慧
- 关键词：AFLPDNA分子标记
- 华细辛苯丙氨酸解氨酶基因的克隆与生物信息学分析被引量：8
- 2018年
- 目的：克隆华细辛Asarum sieboldii苯丙氨酸解氨酶（phenylalanine ammonia-lyase,PAL）基因（AsPAL）,并进行序列特征分析。方法：通过同源克隆的原理,利用RT-PCR和c DNA末端快速扩增（RACE）相结合的方法,以华细辛叶片总RNA为模板,获得了该基因的c DNA全长,并通过DNAMAN软件和Ex PASy在线分析等对其进行了生物信息学分析。结果：获得AsPAL全长cDNA,Genbank登录号为KY428932,序列分析表明,所克隆的c DNA含有1个2 157 bp的完整开放阅读框,编码718个氨基酸,预测蛋白质相对分子质量为78 758 Da,理论等电点为6.24,没有跨膜区,含有PAL酶活性中心序列GTITASGDLVPLSYVAG,不含信号肽;氨基酸序列多重比较发现,AsPAL与土肉桂、葡萄、当归和杏的同源性达到80%以上。结论：获得了AsPAL c DNA全长序列,对其进行初步生物信息学分析,为进一步探究AsPAL的功能和华细辛甲基丁香酚生物合成的调控机制奠定了必要的基础。
- 林懋怡郑柳刘晋杰吉平平刘忠
- 关键词：华细辛苯丙氨酸解氨酶基因克隆生物信息学分析
- 当代中国沉默权的实践
- 本文认为刑事诉讼中的程序正义理论是一个非常具有理论自洽能力，并具有高度正当性的诉讼理论，但本文只是对程序正义理论从可观察、感知的经验角度进行描述，从现实中国刑事司法实践中的现象来读解沉默权理论的应用。由于程序正义理论体系...
- 刘忠
- 关键词：刑事诉讼沉默权程序正义理论权益保护
- 细辛肾毒性与细辛剂型剂量的动物实验研究被引量：17
- 2016年
- 目的:研究细辛的肾毒性及其与细辛剂型剂量之间的相关性。方法:以灌服蒸馏水为空白对照,分别以不同剂量的细辛水煎剂、细辛散剂和麻黄附子细辛汤复方为受试药物,连续60天给SD大鼠灌胃给药,通过检测尿蛋白、血清肌酐、血尿素氮等生化指标和观察组织切片,评价细辛不同使用方式对大鼠肾脏的损伤作用。结果:细辛散剂组在3.0 g·kg^(-1)·d^(-1)的给药剂量下,各生化指标与空白组比较P<0.05,有显著性差异,大鼠肾脏组织受到严重损伤,并普遍死亡;在1.5 g·kg^(-1)·d^(-1)的给药剂量下,同样引起了大鼠肾组织的明显损伤;在0.3 g·kg^(-1)·d^(-1)的给药剂量下,大鼠肾组织未表现出损伤,且生化指标与空白对照组比较P>0.05,均无显著性差异。当细辛生药量达到33.0 g·kg^(-1)·d^(-1)时,细辛水煎剂组方表现出轻微的肾组织损伤,在16.5 g·kg^(-1)·d^(-1)和3.3 g·kg^(-1)·d^(-1)剂量下,细辛水煎剂组未表现出肾组织病理变化,生化指标与空白对照组比较P>0.05,均无显著性差异。对麻黄附子细辛汤而言,在细辛生药用量达到16.5 g·kg^(-1)·d^(-1)时,开始出现大鼠轻微肾损伤,而在3.3 g·kg^(-1)·d^(-1)剂量下未表现出肾组织病理变化,生化指标与空白对照组比较P>0.05,也均无显著性差异。结论:在大鼠中,肾脏是细辛致毒的靶器官之一,并且大鼠肾损伤与细辛用法用量密切相关,散剂的毒性显著强于水煎剂和复方麻黄附子细辛汤。
- 牛卉郑柳赵晓冰潘磊柳威孙远岭李继君刘忠
- 关键词：细辛生化指标肾毒性组织切片
