刘煜
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 供职机构：成都军区总医院更多>>
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- miR-1抑制SDF-1表达和分泌调控HMSC-bm向肝癌细胞迁移被引量：1
- 2014年
- 目的明确肿瘤抑制性micro RNA-1(miR-1)能否通过抑制SDF-1的表达和分泌,调控骨髓间充质干细胞(HMSC-bm)向肿瘤组织的转移。方法 (1)分别利用miR-1表达质粒pSuper-miR-1和miR-1反义寡核苷酸,在肝癌细胞系HepG2中过表达或下调miR-1,Western blot和酶联免疫吸附实验分别检测肝癌细胞蛋白裂解物和培养上清液中SDF-1的表达和分泌水平;(2)构建融合SDF-1 3'UTR的pGL3重组萤光素酶报告基因载体,将其与pSuper-miR-1共转染HEK293细胞,利用双萤光报告基因检测系统检测重组萤光素酶的表达情况。(3)利用pSuper-miR-1或miR-1反义寡核苷酸转染接种于Transwell下层小室的HepG2细胞过表达miR-1或下调miR-1水平,检测Transwell上层小室HMSC-bm向下层小室HepG2肝癌细胞的迁移情况。结果 (1)在肝癌细胞,HepG2过表达miR-1能够显著抑制SDF-1蛋白表达和分泌,而下调miR-1水平则能够诱导SDF-1的表达和分泌。(2)miR-1能够抑制携带SDF-1 3'UTR的pGL3重组萤光素酶报告基因活性。(3)在Transwell下层小室的HepG2细胞中过表达miR-1后,上层小室中HMSC-bm向下层小室迁移细胞数量显著减少,而下调下层小室HepG2细胞中miR-1表达水平,则明显增加HMSC-bm向HepG2肝癌细胞的迁移。结论 miR-1能够直接抑制肝癌细胞SDF-1的表达和分泌,并藉此降低肝癌细胞对HMSC-bm的趋化作用。
- 张涛李东彭晶晶宋晓峰李华杜敏吴敬波谭勇周进军许涛陈滔付曾强冯建琼刘煜
- 关键词：SDF-1骨髓间充质干细胞
- 人头面部三维有限元模型的建立及撞击伤模拟检验研究
- 目的:有限元分析法（Finite Element Analysis FEA）是一种计算算法，用于研究一些复杂的物理模型的几何或载荷工况。它的基本原理是通过离散模型为很多个小单元，然后对单个单元的载荷情况进行分析，再将所有...
- 刘煜
- 关键词：颌面部损伤致伤机理
- 文献传递
- 肝癌Huh7干细胞样细胞的富集培养及鉴定被引量：2
- 2013年
- 目的：建立一种体外有效富集、培养和鉴定具有肝癌于细胞特征的细胞亚群的方法。方法：采用成球培养法利用肿瘤干细胞样细胞（cancerstemcell，CSC）分化培养基对肝癌Huh7细胞进行富集培养，获得的干细胞样细胞于体外进一步扩增获得肝癌干细胞球。流式细胞术检On,0Huh7干细胞样细胞表面肿瘤干细胞标志物EpCAM、CD90和CDl33的表达，平板克隆集落形成实验和裸鼠成瘤实验分别检测Huh7细胞和Huh7干细胞样细胞的克隆集落形成能力、体内成瘤能力。结果：Huh7细胞成球培养3～7d后即可形成肝癌干细胞样细胞球，获得的干细胞样细胞具有自我更新和增殖能力，其EpCAM阳性细胞比例较Huh7细胞明显增加[（99．6％±0．31）％猫（0．12％±O．05）％，P〈0．01]，但两种细胞CD90[（0．11％±0．06）％US（0．09％±0．07）％，P〉0．05]和CDl33[（0．17％±0．08）％椰（0．15％±0．05）％，P〉0．05l表达差异无统计学意义。Huh7干细胞样细胞克隆集落形成数量明显多于Huh7细胞[（188．67±12．5）协（79±16．7）个，P〈0．01]；当接种量为5X10^4个细胞时，与接种Huh7细胞的对照裸鼠相比，接种Huh＇／干细胞样细胞的裸鼠成瘤时间更短（1I”s30d），成瘤率更高（100％郴16．67％）；接种5×10’数量级的细胞时，实验组成瘤体积[（171．90±10．94）伽（86．39±11．21）mm^3P〈0．01]和瘤体质量[（2．984±0．82）vs（0．324±0．17）g，P〈0．01]均明显大于对照组。结论：利用成球培养法能够从Huh7肝癌细胞系中富集培养获得Huh7肝癌干细胞，其具有比Huh7细胞更强的成瘤能力。
- 张涛李东漆仲春彭晶晶陈滔谭勇周进军许涛付曾强刘煜李华
- 关键词：肝癌
- 程序性死亡配体1在索拉非尼耐药肝癌细胞中的表达和功能被引量：3
- 2018年
- 目的探讨程序性死亡配体1(PD-L1)在索拉非尼耐药人肝癌细胞中的表达及其功能。方法采用浓度递增法构建索拉非尼耐药人肝癌细胞株(Hep3B-SR和Hep G2-SR),用CCK-8法检测半数抑制浓度(IC50)并计算耐药指数,蛋白质印迹法和q PCR检测P-糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和PD-L1的表达。转染si RNA沉默耐药细胞PD-L1的表达并检测沉默效率。沉默PD-L1表达后,CCK-8法检测IC50、计算耐药指数,并检测耐药基因的表达,用细胞增殖实验检测细胞增殖情况,划痕实验检测细胞迁移情况,平板克隆形成实验检测细胞克隆形成情况,流式细胞术检测细胞凋亡情况。结果 Hep3B-SR和Hep G2-SR的耐药指数分别为5.4和5.2。耐药细胞中P-gp、MRP1和PD-L1表达较亲本细胞上调(P均<0.01)。沉默PD-L1表达后,Hep3B-SR和Hep G2-SR的耐药指数分别下降为1.8和1.5,P-gp和MRP1的表达下调(P均<0.01);沉默PD-L1表达可抑制耐药细胞的增殖、迁移、克隆形成并促进其凋亡(P均<0.01),合用索拉非尼时作用更为显著。结论 PD-L1在索拉非尼耐药人肝癌细胞中高表达;抑制PD-L1表达可部分逆转索拉非尼耐药人肝癌细胞的耐药性,提高索拉非尼的抗癌效果;抑制PD-L1表达可有效抑制索拉非尼耐药人肝癌细胞的生长,合用索拉非尼其抗癌效果更强。
- 孙非凡李东李华王涛刘煜张涛
- 关键词：肝细胞癌索拉非尼基因沉默
- MicroRNA-1对肝癌细胞Hep3B凋亡的影响及机制研究
- 研究背景和目的： 原发性肝细胞癌发病率高，致死率高，被称为“癌中之王”。肝癌的具体发病机制尚未完全阐明，但目前的研究认为异常的细胞凋亡和肝癌的发生发展有着密切联系。肝癌对常规的放化疗敏感度均很低，进一步提示在肝癌细胞内可...
- 刘煜
- 关键词：肝癌MICRORNA-1凋亡
- 文献传递
- MicroRNA-1对肝癌细胞BAG4表达的影响被引量：7
- 2014年
- 目的观察microRNA-1(miR-1)对肝癌细胞系Hep3B死亡结构域沉默子(BAG4)的表达及细胞凋亡的影响。方法 Western blot检测肝癌组织中BAG4蛋白表达情况;将过表达miR-1的质粒转染肝癌细胞Hep3B,分别用RT-qPCR及Western blot检测BAG4 mRNA和蛋白的表达,流式细胞仪检测细胞凋亡;生物信息学软件分析miR-1和BAG4 3’UTR作用关系。结果 BAG4蛋白在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织;Hep3B转染miR-1过表达质粒后,相较于阴性对照(NC)组,BAG4mRNA和蛋白水平的表达均有所降低;早期凋亡率明显增高。生物信息学分析提示BAG4是miR-1潜在靶基因。结论 miR-1可以诱导肝癌细胞Hep3B凋亡,其作用可能和抑制BAG4表达有关。
- 刘煜李华李东张涛
- 关键词：肝癌MICRORNA-1凋亡
- MicroRNA-1通过调控VEGF表达抑制肝癌血管生成
- 目的：我们的前期研究已揭示了miR-1能发挥抑制肝癌细胞增殖，促进肝癌细胞凋亡等一系列抑癌基因效应，我们拟进一步观察miR-1对肝癌血管生成的影响，在此基础上探讨其可能的作用机制。方法：(1)体外细胞实验：分别构建过表达...
- 刘煜李东王涛孙非凡王丹彭晶晶张涛
- 关键词：MICRORNA-1VEGF血管生成
