刘红玉
- 作品数：12 被引量：58H指数：3
- 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>
- 发文基金：科技基础性工作专项国家自然科学基金公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 抗鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定
- 为制备抗鸭坦布苏病毒(Duck tembusu virus,DTMUV)囊膜蛋白(E蛋白)的单克隆抗体(MAb),本研究将DTMUV E基因原核表达,目的蛋白纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,按常规MAb技术方法,取...
- 白小飞刘红玉陈玉环殷秀辰张云
- 关键词：单克隆抗体
- 文献传递
- 一管PCR式鉴别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的试剂盒
- 本发明公开了一种一管PCR式鉴别诊断鹅细小病毒(Goose parvovirus，GPV)和番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus，MDPV)的试剂盒，所述试剂盒包括引物、处理待检样品的试剂、PCR...
- 张云刘明殷秀臣刘红玉
- 文献传递
- 产ESBLs禽源大肠杆菌毒力因子的调查与分析被引量：2
- 2014年
- 为了获得产ESBLs和非产ESBLs菌株中毒力因子的携带情况,分析产ESBLs耐药菌株的毒力特性,为防治此类细菌性疾病提供依据。本试验采用CLSI标准方法和PCR方法分别检测青岛地区249株禽源大肠杆菌菌株的ESBLs和毒力基因。结果是83.13%的菌株产ESBLs;24种毒力基因均有检出;iutA、iroN、iss、iucA、sfa、fyuA、vat等7种毒力基因在产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株中的检出率差异均有统计学意义。表明携带毒力因子的产ESBLs大肠杆菌菌株正在青岛地区流行和传播;毒力因子和耐药性之间具有一定相关关系,iutA、iroN、iss在产ESBLs禽源大肠杆菌中更加流行,而iucA、sfa、fyuA、vat在产ESBLs菌株中的流行率显著低于非产ESBLs菌株。
- 刘红玉王君玮王娟赵思俊李玉清黄秀梅曲志娜
- 关键词：大肠杆菌ESBLS毒力因子
- 抗鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备及鉴定被引量：3
- 2014年
- 为了制备抗鸭坦布苏病毒(DTMUV)囊膜(E)蛋白的单克隆抗体,将鸭坦布苏病毒E基因进行原核表达,目的蛋白被纯化后免疫6周龄雌性BALB/c小鼠,按常规的单克隆抗体的制备技术,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经间接ELISA方法筛选及3次连续克隆化共获得6株能稳定分泌抗E蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞,它们分别被命名为1F3、1G2、1B11、2A5、3B6和4F9。Dot-ELISA及Western-blot分析结果表明,这6株单克隆抗体均能与原核表达的E蛋白特异性结合。经间接免疫荧光(IFA)试验验证,这6株单克隆抗体均能识别鸭坦布苏病毒感染的细胞,且荧光主要位于细胞质中。结果表明,本研究成功制备了6株抗鸭坦布苏病毒E蛋白的单克隆抗体。鸭坦布苏病毒E蛋白单克隆抗体的制备为今后鸭坦布苏病毒快速的病原学诊断以及E蛋白的结构和功能研究奠定了物质基础。
- 白小飞刘红玉陈玉环殷秀辰刘明张云
- 关键词：E蛋白原核表达单克隆抗体免疫印迹斑点杂交间接免疫荧光
- 一株鹅源巴氏杆菌的分离鉴定及耐药性分析被引量：13
- 2014年
- 对某种鹅场病死鹅进行剖解,肝涂片镜检后观察到革兰氏染色阴性短小杆菌,瑞氏-吉姆萨染色见两极浓染。用巴氏杆菌特异性引物进行PCR扩增,将扩增产物克隆至pMD18-T载体上,测序结果通过BLAST比对与多杀性禽巴氏杆菌的相似性为99.0%,确定其为多杀性巴氏杆菌。用16种常用抗菌药物的纸片法对该分离菌进行药敏试验,结果显示,该菌对四环素和万古霉素不敏感;对克林霉素、链霉素中度敏感;对内酰胺类(青霉素、氨苄西林)、大环内脂类(红霉素、克拉霉素)、喹诺酮类(环丙沙星)抗生素等高度敏感。用小白鼠和鹅进行动物回归试验,分为0.1mL/只、0.3mL/只和0.5mL/只剂量组,分别皮下接种TSB培养的病原菌,并分别在接种后6h和48h内出现死亡,死亡动物的剖检病变与巴氏杆菌感染的鹅相同,并在病变器官内分离出该病原菌。
- 刘红玉邵周伍林李刚殷秀辰陈玉环吴晓颖刘思国张云
- 关键词：多杀性巴氏杆菌PCR检测耐药性分析
- 胶东地区健康禽源大肠埃希菌耐药性与整合子-基因盒携带分析被引量：1
- 2014年
- 为了解健康禽源大肠埃希菌的耐药性及其Ⅰ型和Ⅱ型整合子携带情况和流行特征,探讨整合子与大肠埃希菌耐药表型的相关性,分析整合子在细菌多重耐药中的作用,采用MIC法和PCR方法分别检测249株健康禽源大肠埃希菌的耐药性和Ⅰ型、Ⅱ型整合酶基因及可变区。结果显示,12种药物耐药率均超过56.63%,多重耐药率高达98.39%;245株多重耐药菌株均含有Ⅰ型整合子,但含有Ⅱ型整合子的大肠埃希菌仅113株,Ⅰ型和Ⅱ型整合子的检出率分别为100%和46.12%;63.75%的Ⅰ型整合子阳性菌株扩增出5类大小不同的基因盒,大小为1 000bp^23 00bp,18.6%的Ⅱ型整合子阳性菌株扩增出2 200bp的基因盒;58.82%的菌株携带2种或2种以上的基因盒,基因盒以编码甲氧苄啶类和氨基糖苷类药物耐药性的dfrA和aadA基因家族为主,其中aadA22为优势基因盒,其次是dfrA17+aadA5基因盒。说明胶东地区禽源大肠埃希菌多重耐药现象严重;Ⅰ型整合子比Ⅱ型整合子更流行;Ⅰ型和Ⅱ型整合子参与多重耐药,但细菌携带的整合子-基因盒与其耐药表型无对应关系。
- 刘红玉王君玮王娟赵思俊黄秀梅李玉清曲志娜
- 关键词：大肠埃希菌多重耐药
- 一管PCR式鉴别鹅细小病毒和番鸭细小病毒的试剂盒
- 本发明公开了一种一管PCR式鉴别诊断鹅细小病毒(Goose parvovirus，GPV)和番鸭细小病毒(Muscovy duck parvovirus，MDPV)的试剂盒，所述试剂盒包括引物、处理待检样品的试剂、PCR...
- 张云刘明殷秀臣刘红玉
- 文献传递
- 一株分离自中国鹅源黄病毒的分子鉴定
- 2013年
- 为了分析2011年分离到的1株(ZZ株)引起产蛋量下降的鹅源黄病毒的全基因组序列及病原的分子特性,试验采用PCR技术对其全基因组进行PCR扩增、克隆和测序,之后对多聚蛋白的剪切位点、潜在的糖基化位点、半胱氨酸的分布及3'UTR的二级结构进行分析。结果表明:该病毒由10986个核苷酸组成,并具有典型的黄病毒基因组结构;开放阅读框(ORF)编码3 425个氨基酸(95～10 372 nt);与其他黄病毒比较,该病毒的5'UTR(94 nt)大小居中,而3'UTR(614 nt)相对较长;对多聚蛋白及3'UTR的系统进化树分析显示,ZZ分离株与恩塔亚病毒(Ntaya virus)的巴格扎病毒(Bagazavirus)亲缘关系最近。
- 陈玉环葛铭刘红玉张云
- 关键词：分子鉴定进化分析
- 表达Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒VP1蛋白重组腺病毒的构建被引量：1
- 2013年
- 为构建表达Ⅰ型鸭病毒性肝炎病毒(DHV-Ⅰ)VP1蛋白的重组腺病毒,本实验采用RT-PCR方法扩增DHV-Ⅰ HP-1株VP1基因,克隆于腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV中,并将其电转化于含腺病毒pAdeasy骨架质粒的大肠杆菌BJ5183中,通过同源重组制备含有重组腺病毒的质粒。重组质粒经PacⅠ酶切线性化后转染AD293细胞,获得重组腺病毒(rAd-VP1)。间接免疫荧光和western blot鉴定结果显示,DHV-Ⅰ的VP1蛋白在重组腺病毒感染的AD293中获得表达。rAd-VP1的制备为鸭免疫实验效果评价奠定了基础。
- 殷秀辰刘红玉陈玉环刘明张云
- 关键词：重组腺病毒VP1蛋白
- 青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌耐药性调查与优势基因型分析被引量：22
- 2015年
- 【目的】通过抗菌药物敏感性测定试验以及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)表型和基因型检测试验,了解青岛地区肉鸡养殖场产ESBLs大肠杆菌菌株的分布情况及耐药特征,分析ESBLs流行基因型和基因亚型,为指导临床合理使用抗菌药物、有效控制产ESBLs菌株的感染和流行提供依据。【方法】采用微量肉汤稀释法对249株大肠杆菌菌株进行抗菌药物敏感性测定试验,采用CLSI推荐方法进行ESBLs表型检测和确证实验,采用PCR方法、序列测定以及生物学分析软件进行ESBLs耐药质粒的DNA扩展和基因型分析,利用SPSS19.0软件对产ESBLs菌株与非产ESBLs菌株的耐药情况进行差异显著性分析。【结果】83.13%(207/249)的鸡源大肠杆菌菌株产ESBLs;产ESBLs菌株对7种抗菌药的耐药率高于非产ESBLs菌株,其中对庆大霉素、大观霉素、氨苄西林、阿莫西林/克拉维酸、头孢噻呋等5种药物差异显著(P<0.05),而产ESBLs菌株对四环素和氟苯尼考2种抗菌药的耐药率显著低于非产ESBLs菌株;产ESBLs菌株多重耐药程度显著高于非产ESBLs菌株,其多重耐药率分别为99.03%和92.86%(P=0.035);CTX-M型、TEM型和OXA型ESBLs菌株的检出率分别为100.00%、99.52%和47.83%,未检测出SHV型ESBLs菌株;产酶菌株分属于10个基因亚型,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型是优势基因亚型,并首次从健康家禽中检测到基因重组嵌合体CTX-M-123和CTX-M-64。【结论】产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株在青岛地区广泛流行和传播;产ESBLs菌株耐药相对非产ESBLs菌株严重;相比国内其它地区,CTX-M型和TEM型同样成为青岛地区产ESBLs鸡源大肠杆菌菌株的流行基因型,但基因亚型存在差异,TEM-1型、CTX-M-65型和CTX-M-55型、OXA-1型分别是各基因型的优势基因亚型。
- 曲志娜刘红玉王娟赵思俊李玉清黄秀梅盖文燕王君玮
- 关键词：鸡源大肠杆菌耐药性ESBLS基因型基因亚型
