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脊椎动物孔道形成毒素在天然免疫中的作用: 目的孔道形成毒素(pore-forming toxins,PFTs)是一类能够在细胞生物膜上打孔而引起细胞损伤的病原微生物毒力蛋白,主要由病原菌产生,约占细菌所产生的总毒力蛋白的25%~30%。PFTs在细菌感染性疾病中...; 向阳严超郭小龙周凯峰李盛安高茜王宣赵峰张云; 文献传递

宿主自主分泌穿孔毒素参与抗感染免疫: 微生物在感染宿主的过程中,穿孔毒素起到了重要的作用。这些穿孔毒素包括□-溶血素(a-hemolysin)、气单胞菌溶素(Aerolysin)等。而我们最近从大蹼铃蟾皮肤分泌物中却分离纯化出一个含有气单胞菌溶素结构域的蛋白...; 向阳严超郭小龙周凯峰李盛安高茜王宣李文辉张云

人TFF2基因的原核表达与纯化(英文): 2012年; 人三叶因子2(hTFF2)具有促进细胞迁移和抑制细胞凋亡的活性,所以被认为是胃肠黏膜修复的启动者之一。因为从人组织中获得hTFF2比较困难,而且体外产生的重组hTFF2大都以融合蛋白的形式存在,所以该研究的目的是在体外产生不带任何融合蛋白的游离型hTFF2。hTFF2的开放阅读框被插入pET-32a(+)表达载体,然后在大肠杆菌中表达出带有硫氧还蛋白融合部分的hTFF2融合蛋白。进而利用融合蛋白的组氨酸标签使用镍亲和色谱柱以及反向高压色谱柱对目的蛋白进行纯化。23°C,FXa因子裂解纯度高达95%的融合蛋白以得到游离型hTFF2。在去除FXa因子和尚未被切开的融合蛋白后,获得的游离型hTFF2被SDS-PAGE和Westernblotting所证实。重组游离型hTFF2的产量约为5mg/L,并且hTFF2能促进IEC-6细胞的迁移以及体外的伤口修复,而这些活性是依赖于ERK1/2的激活。同时,hTFF2也能抑制50μmol/L神经鞘氨醇所引起的HCT-116细胞的凋亡。总之,研究结果表明,在大肠杆菌中高产量地成功表达出具有生物学活性的游离型hTFF2,这为研究TFF2的分子机制,以及研制和开发TFF2的相关药物都提供很大的帮助。; 庄永辉李思熳余果宇张勇向阳邹浩李文辉; 关键词：TFF2 细胞迁移抗凋亡

云南有毒动物新型肽类毒素发现与功能解析: 张云李文辉向阳李盛安张勇杨新旺刘子超; 动物肽类毒素作为生物医药领域不可替代的分子解密器和药物研发宝库，催生了包括若干诺贝尔奖级的基础研究重大发现和一线大品种药物的研发。在国家基金委-云南省联合基金、973计划项目和"重大新药创制"国家科技重大专项资助下，在以...; 关键词：; 关键词：肽类毒素中药材生物医药

新型多肽毒素研究促进人疾病机理的解析: 脊椎动物三叶因子(trefoil factor,TFF)由50-100个左右的氨基酸组成，广泛分布在粘膜上皮中,与粘膜保护，损伤修复和肿瘤抑制密切相关。三叶因子缺陷小鼠丧失了粘膜修复功能.即使很小的损伤，也将造成致命的结...; 张勇高茜佘国宇向阳王严戒陈忠明曾琳李文辉张云; 关键词：分子探针三叶因子诱导凋亡

三叶因子Bm-TFF2突变体在原核体系中的表达及促细胞迁移活性: 2011年; 大蹼铃蟾三叶因子Bm-TFF2具有较人TFF2更强的促细胞迁移和抗凋亡活性。该研究利用RT-PCR方法扩增得到野生型Bm-TFF2的基因,然后分别构建N端、C端和分子中两个精氨酸突变的突变体,最后连接表达载体产生pET32a(+)/Bm-TFF2突变型重组质粒,转入大肠杆菌中,经37℃培养,IPTG诱导,其融合蛋白主要存在于包涵体中,用组氨酸标签的亲合柱纯化溶解后的包涵体上清,进一步用RP-HPLC纯化得到硫氧还蛋白(TRX)/Bm-TFF2突变型融合蛋白。通过SDS-PAGE和Westernblotting检测分析其纯度和特异性。最终,从1L培养基中得到20mg纯度为95%的三种重组突变型融合蛋白。三种突变型重组蛋白都具有剂量依赖性的促细胞迁移活性,并且其活性无显著差异。该研究为进一步研究Bm-TFF2结构和功能的关系以及揭示其作用的分子机制奠定了基础。; 余果宇向阳张红芸江萍李文辉张云张勇; 关键词：突变体纯化细胞迁移

眼镜王蛇抗菌肽OH-CATH30选择性地调节天然免疫反应抵御细菌感染: 细菌感染严重危害着人类的健康。近年来,耐药细菌在全世界范围内大规模快速出现。由于缺少有效的抗生素治疗,由耐药细菌感染导致的死亡率正逐年升高。因此,迫切需要新的治疗手段来应对这些耐药细菌造成的感染性疾病。调节免疫治疗细菌感...; 李盛安向阳王严戒刘杰李文辉张云

非晶状体betagamma-晶状体蛋白与三叶因子复合物的用途: 本发明涉及非晶状体betagamma-晶状体蛋白与三叶因子复合物（betagamma-CAT）的用途。非晶状体betagamma-晶状体蛋白与三叶因子复合物具有体内强力地抗微生物感染作用，它可以显著地降低因感染引起的小鼠...; 张云向阳李盛安李文辉; 文献传递

两栖类三叶因子活化人血小板的分子机制: ＜正＞哺乳动物三叶因子广泛存在于粘膜系统并发挥重要功能,能够保护上皮抵抗外来入侵,还能参与粘膜的损伤修复。三叶因子既有报道作为肿瘤抑制因子,又有报道为潜在的肿瘤促进因子。这一矛盾的现象人们无法解释。目前三叶因子研究的主要...; 张勇王严戒余国雨向阳高茜李文辉张云; 文献传递

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向阳