吴小萍
- 作品数：5 被引量：31H指数：3
- 供职机构：南京林业大学森林资源与环境学院林木遗传与生物技术省部共建教育部重点实验室更多>>
- 发文基金：上海市科技兴农重点攻关项目江苏省高校自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 杉木单染色体微分离和微克隆研究
- 该研究以杉木为原料,利用单染色体的微分离、微切割及微克隆技术,建立了杉木单染色体DNA文库.研究取得了以下几个方面重要进展：1.染色体标本的制备.2.目标染色体的微分离及体外扩增.3.单染色体文库的建立.此条染色体文库可...
- 吴小萍
- 关键词：杉木染色体微分离微切割微克隆
- 文献传递
- 百合总RNA提取方法的比较和分析被引量：21
- 2006年
- 以卷丹、麝香百合品种富田和离体鲜切花的花蕾为材料,比较Trizol法、异硫氰酸胍法、CTAB改进法和SDS改进法提取总RNA的效果,结果表明,SDS改进法能有效去除多糖,提取的RNA中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍,OD260/OD280值介于1.7～2.2之间,卷丹RNA得率为132.52μg/g,富田RNA得率为186.88μg/g。进一步用SDS改进法分别提取富田外轮花瓣、内轮花瓣、雄蕊、雌蕊、叶和茎的RNA,同样可以获得完整的纯度高的RNA,其中28SrRNA亮度约为18SrRNA的两倍,OD260/OD280值介于1.7～2.2之间,说明此方法适用于百合各个组织RNA的提取。经RT-PCR获得了花发育基因的特异性条带,说明用SDS改进法从百合中提取的RNA质量好、产率高、完整性强,完全适合于百合进一步的分子生物学研究。
- 吴小萍席梦利缪红艳施季森
- 关键词：百合RNA多糖
- 麝香百合LLGLO1基因的克隆和表达被引量：9
- 2006年
- 用RACE方法克隆的麝香百合花发育的GLOBOSA(GLO)类B功能基因LLGLO1,与其他多种单子叶植物的GLO类基因高度同源,且C区具有典型的PI结构基序。通过RT-PCR检测,百合不同组织中的LLGLO1基因表达模式与郁金香的GLO类基因相似。即主要集中在百合第一、二、三轮花器官中表达,心皮和茎中有微量表达,而且随着心皮的成熟,其在心皮中的表达量逐渐增加,但在百合叶片中则未检测到LLGLO1的表达,因此认为LLGLO1在百合花器官中呈特异性表达。LLGLO1在百合第一轮花器官中的表达支持了vanTunen对ABC模型的修正。
- 吴小萍席梦利施季森
- 关键词：麝香百合GLOBOSA基因表达
- 百合花发育相关基因LLGLO1的RNAi载体构建被引量：4
- 2010年
- 百合花发育相关基因的研究是开展花卉分子育种的重要基础。以麝香百合(Lilium longi-florumThumb.)未开放的花蕾为材料提取总RNA。根据LLGLO1序列的同源比对选取特异区段,设计引物扩增区段cDNA并引入酶切位点。将PCR扩增片断连接到T载体上,经酶切及PCR验证后进行测序。测序结果表明:用于RNAi的cDNA片断与LLGLO1序列完全相同。通过中间载体pSK+intron引入一段内含子间隔区,RNA干扰片断经过多次的酶切和连接过程最终连入表达载体pCAMBIA1301中形成ihpRNA结构。PCR及双酶切鉴定结果显示,构建的RNA干扰载体的ihpRNA结构完整。
- 席梦利刘坡吴小萍施季森
- 关键词：百合RNAI载体
- 杉木单染色体的微分离及微克隆研究
- 对杉木带随体的染色体进行了微克隆研究。利用显微操作仪分离单染色体并放入Eppendorf管中,经Sau3A酶切后在染色体DNA片段两端加上Sau3A寡核苷酸人工接头,然后进行两轮PCR扩增,得到
- 吴小萍洑香香徐进施季森胡赞民
- 关键词：杉木染色体微分离微克隆
- 文献传递
