吴志明
- 作品数：12 被引量：30H指数：4
- 供职机构：南京农业大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程经济管理更多>>
- 甜瓜属野生种Cucumis hystrix Chakr.胞质葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因的克隆与启动子结构分析
- 2013年
- 根据植物葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH,EC1.1.1.49)氨基酸保守区域,设计简并引物,采用RT-PCR技术克隆得到甜瓜属野生种Cucumis hystrix Chakr.(2n=24)G6PDH基因cDNA片段;随后基于该序列设计特异引物,PCR方法筛选野生种BAC文库,获得2个BAC阳性单克隆。测序后获得了G6PDH基因全序列及其上游启动子序列,GenBank登录号:JQ771576。序列分析显示:G6PDH基因全长约6.5 kb,由15个外显子和14个内含子组成;内含子序列均符合5'-gt-ag-3'结构。外显子拼接后获得了G6PDH基因的开放阅读框(ORF)序列,序列全长1 551 bp,编码516个氨基酸,与黄瓜基因组网站公布的G6PDH基因核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为98.71%和99.03%。野生种G6PDH氨基酸序列N端缺少转运肽序列,确定为野生种胞质G6PDH。氨基酸序列与烟草、马铃薯、荷兰芹、猕猴桃、拟南芥、大豆、小麦、玉米、葡萄、杨树等植物胞质G6PDH同源性高达77%以上。系统发育树分析发现,甜瓜属胞质G6PDH与茄科植物最先聚类,植物胞质G6PDH在分子进化水平上与物种进化相符。启动子结构分析表明:序列含有启动子基本元件TATA-box、CAAT-box,还含有丰富的光响应元件,与环境胁迫响应相关的不同顺式作用元件,促进高水平转录的5UTR Py-rich stretch元件和提高表达的CAT-box元件等。
- 曹明明吴志明娄群峰阮氏清云陈劲枫
- 关键词：启动子BAC文库
- 矮牵牛Ty1-copia类逆转座子逆转录酶序列的克隆与分析
- 2013年
- 采用植物Tyl-cop／a类逆转座子逆转录酶的保守区设计筒井引物，经PCR扩增从矮牵牛（Paun／ahybr／daVflm．）中扩增出260bp左右的目标条带，扩增产物经测序及序列分析，总共获得了24条逆转录酶序列。结果表明，24条逆转录酶序列长度变化范圈为260—272bp，同源性范圈为49．8％-97％，经核苷破聚类分析分为7个家族。Tyl-cop／a类逆转录酶在序列长度、碱基组成上具有高度异质性，翻译成氨基硬后，有18条序列是完整的，另外6条序列出现终止密码子突变或移框突变。终止密码子突变和移框突变是矮牵牛Tyl-copia类逆转座子商度异质性的童要表现。与已登陆的不同植物物种的Tyl-cop／,,类逆转录酶序列进行同源性分析，结果与部分植物物种具有较高的同源性，可能有共同起源。
- 魏跃颜志明吴志明江彪张蜀宁
- 关键词：同源性
- 一株灭蝇胺降解菌及其应用
- 本发明公开了一株灭蝇胺降解菌M15，其为分枝杆菌属菌株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2023年5月29日，保藏编号为CCTCC NO：M 2023835。本发明还公开了其应用。本发明灭蝇胺降解菌M15具有高效...
- 蒋建东刑又文吴志明吕世龙徐希辉
- 同源四倍体矮牵牛花粉母细胞减数分裂观察被引量：8
- 2008年
- 以同源四倍体矮牵牛06P-12为材料,采用常规压片法对花粉母细胞减数分裂过程及染色体行为进行了观察研究,以探明同源四倍体矮牵牛育性降低的细胞学原因.结果显示:花粉母细胞减数分裂过程与二倍体基本相同但有其特殊性,主要表现在:终变期染色体的构型复杂,有四价体、三价体和单价体;中期Ⅰ和中期Ⅱ有赤道板外染色体;后期Ⅰ和后期Ⅱ出现落后染色体、丢失染色体、染色体桥及不均等分裂的现象;四分体时期出现一分体、二分体、三分体以及含微核的异常三分体、四分体、多分体.花粉母细胞减数分裂过程中正常细胞平均达78.6%,异常细胞频率平均为21.4%.研究表明,同源四倍体矮牵牛育性降低的细胞学原因是减数分裂过程中染色体行为异常.
- 魏跃张蜀宁隋益虎吴志明钱春桃陈劲枫
- 关键词：同源四倍体矮牵牛花粉母细胞减数分裂
- 基于生态足迹模型的福州市主体功能区划分研究
- 人类的生存和发展都离不开珍贵的土地资源，珍惜和合理利用每一寸土地是我国的基本国策。推进形成主体功能区建设，有利于科学合理地开发和可持续利用宝贵的土地资源。《全国主体功能区规划》是划分主体功能区的基本依据，它指明了各主体功...
- 吴志明
- 关键词：资源利用生态足迹模型主体功能区
- 文献传递
- 半夏凝集素基因克隆及其对桃蚜的抗性研究被引量：10
- 2010年
- 研究了半夏凝集素(Pinellia ternataagglutinin,PTA)基因对桃蚜(Myzus persicae)的抗性。从半夏幼叶中提取总RNA,采用RT-PCR法分离克隆出PTA1基因cDNA片段,该基因在GenBank中登录号为DQ092435。序列分析表明:该cDNA片段全长为810bp,编码269个氨基酸组成的蛋白,具有单子叶植物甘露糖凝集素基因家族的特征,含有3个由4个氨基酸(QDNY)组成的甘露糖专一结合位点,与报道的天南星科凝集素基因氨基酸序列的同源性在72.7%~92.9%。构建了35S启动子控制下的PTA1基因的植物表达载体pBI121PTA1,该载体含有抗卡那霉素的选择标记基因(nptⅡ),利用根癌农杆菌介导法转化烟草获得抗卡那霉素的植株。PCR和半定量RT-PCR分析表明:PTA1基因已经整合到植物基因组中并在转录水平上得到了有效表达。抗蚜虫鉴定表明:转基因植株有效地抑制了蚜虫的群体增长率,平均抑制率达77.02%,表明该基因对同翅目害虫的抗虫基因工程有重要的应用价值。
- 吴志明董文琦党志红潘文亮谢晓亮温春秀陈劲枫
- 关键词：基因克隆转基因烟草抗性桃蚜
- 黄瓜6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因cDNA片段的克隆及表达分析被引量：6
- 2010年
- 以黄瓜品种露丰为材料,根据已报道的6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因(6PGDH)的保守氨基酸序列设计简并引物,利用RT-PCR技术获得黄瓜6PGDH的cDNA同源片段,命名为CSPG(登录号为EU815934)。该片段长度为1 207 bp,包含一个936 bp的开放阅读框(编码311个氨基酸)和271 bp的Poly A 3′非翻译区末端,无内含子;该基因编码的氨基酸序列与拟南芥、大豆、水稻、玉米、菠菜的6PGDH基因有75%以上的同源性。运用半定量RT-PCR技术对6PGDH基因的转录水平进行分析,结果表明:该基因在叶、根、茎中均有表达,高温胁迫下的表达量高于常温对照,说明6PGDH基因与热胁迫相关。
- 魏跃陈啸寅李振陆王永平史建磊吴志明张蜀宁陈劲枫
- 关键词：黄瓜CDNA克隆
- 6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因(6PGDH)的克隆与甜瓜属异源四倍体的分子验证被引量：3
- 2009年
- 根据已发表的黄瓜6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphog luconate dehydrogenase)基因6PGDH的cDNA序列(GenBank登录号:EU815934)设计引物,扩增了甜瓜属异源四倍体新种及野生种和栽培黄瓜‘北京截头’的6PGDH基因片段,测序结果表明3个种的6PGDH基因片段序列表现出高度的一致性,长度均为1098bp包含936bp编码311个氨基酸的阅读框和162bp的3′非翻译区末端,片段内无内含子存在。利用DNAMAN软件检测到异源四倍体新种与野生种和栽培黄瓜‘北京截头’氨基酸的差异位点有3个,碱基差异位点有22个,差异位点的遗传分布符合孟德尔遗传学定律,从而在分子水平证实了异源四倍体新种是野生种和栽培黄瓜‘北京截头’的杂交后代。
- 魏跃吴志明张蜀宁陈劲枫
- 关键词：黄瓜异源四倍体杂交种克隆
- 一株灭蝇胺降解菌及其应用
- 本发明公开了一株灭蝇胺降解菌M15，其为分枝杆菌属菌株，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏日期为2023年5月29日，保藏编号为CCTCC NO：M 2023835。本发明还公开了其应用。本发明灭蝇胺降解菌M15具有高效...
- 蒋建东刑又文吴志明吕世龙徐希辉
- 黄瓜胞质6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因克隆及序列分析被引量：6
- 2009年
- 根据6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶(6-phosphogluconate dehydrogenase,6PGDH)基因的保守氨基酸序列设计简并引物,应用RT-PCR技术从黄瓜栽培种品种'北京截头'(Cucumis sativus'Beijingjietou')叶片中获得了640bp的特异片段,以该序列在EST数据库进行同源检索筛选,发现甜瓜EST序列AM715537.2与之高度一致,据此设计引物经RT-PCR扩增、分子克隆和序列拼接,获得了黄瓜6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因全长序列,命名为Cs6PGDH(GenBank登录号FJ610345)。序列分析表明,该基因全长1829bp,其中开放读码框(ORF)长1488bp编码495个氨基酸组成的多肽,编码区内无内含子存在,5′、3′端非翻译区长度各为70bp和271bp。Blast同源性分析显示该基因编码的氨基酸序列与拟南芥、大豆、水稻、玉米、菠菜等物种6PGDH基因有74%以上的一致性。由于与其他物种胞质6PGDH相类似氨基酸N端都缺少长度约为40aa的转运肽,推断Cs6PGDH为黄瓜胞质6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶基因。
- 魏跃王永平李为观吴志明张蜀宁陈劲枫
- 关键词：黄瓜表达序列标签克隆
