吴英松 作品数:234 被引量:599 H指数:11 供职机构: 南方医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 国家高技术研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 轻工技术与工程 更多>>
C肽光激化学发光免疫分析试剂盒的研制 被引量:5 2011年 目的:研制光激化学发光免疫分析技术(AlphaLISA)建立人血清C肽(C peptide)的快速检测试剂盒。方法:采用夹心法建立C peptide AlphaLISA试剂盒。结果:自制C肽试剂盒灵敏度为0.06ng/ml.,可测范围为(0.06~22)ng/ml。批内与批间的精密度分别为4.0%~4.8%,5.6%~6.8%,与胰岛素以及胰岛素原无交叉反应,使用本试剂盒与CMIA-ARCHITECT试剂盒同时检测98份临床血清样本,结果具有相关性,其相关系数为0.973。结论:自制C肽AlphaLISA试剂盒的各项性能指标能够达到临床检测要求,可用于临床血清样本C肽浓度的测定。 马强 贺安 董志宁 刘天才 邹丽萍 林冠峰 李明 吴英松关键词:C肽 梅毒螺旋体0751基因的克隆、表达及鉴定 被引量:3 2011年 目的构建梅毒螺旋体0751基因的原核表达质粒,诱导重组蛋白表达及进行免疫学鉴定。方法以梅毒螺旋体基因组DNA为模板,PCR扩增梅毒螺旋体0751基因,构建其重组原核表达载体,并采用Western-blot方法初步鉴定该蛋白的特异性。结果成功扩增出梅毒螺旋体0751基因,该基因在大肠杆菌表达系统中得到表达,并且特异性识别梅毒患者血清。结论在大肠杆菌中成功表达梅毒螺旋体0751基因,为梅毒螺旋体的诊断提供了新的特异性抗原。 马强 耿焱 黄茂梁 吴英松 李明关键词:梅毒螺旋体 蛋白表达 一种快速提取病毒RNA的试剂盒 本发明属于分子生物学检测领域,公开了一种快速提取流感病毒RNA的试剂盒,所述试剂盒包含病毒裂解结合液,所述病毒裂解结合液含有聚醚醇、蔗糖、Tris‑HCl;利用该试剂盒,只需一步操作即可使流感病毒的核酸释放出来,后续的物... 吴英松 刘天才 杨学习 陈瑶文献传递 一种降钙素原单克隆抗体杂交瘤2H4及单克隆抗体 本发明公开了一种降钙素原单克隆抗体杂交瘤2H4及单克隆抗体。本发明所述降钙素原单克隆抗体杂交瘤2H4于2014年12月16日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:C2014232。本发明针对降钙素原合成... 吴英松 郝文波 徐伟文 万勇文献传递 恶性疟原虫海南株(FCC1/HN)谷氨酸脱氢酶基因的克隆及序列分析 <正> 以检测疟原虫特异性抗原为基础的免疫学方法,由于操作简便、快速、结果易于判定,日益受到人们的重视并显示出良好的应用前景,目前疟原虫相对特异的富组氨酸蛋白Ⅱ(HRP Ⅱ)和乳酸脱氢酶(LDH)正被应用于疟疾的诊断。研... 李林海 李明 吴英松 王萍文献传递 人血清补体C3、C4定时散射比浊分析检测试剂的研制 2008年 目的建立人血清补体C3、C4定时散射比浊分析方法。方法采用定时散射比浊分析法检测临床血清标本,并对试剂的各项性能指标进行评价。结果补体C3试剂盒的测定范围为0.945~1.776g/L,灵敏度为0.022g/L,批内批间的精密度分别为2.5%~4.8%,5.4%~7.1%。样本中的游离血红蛋白、胆红素、甘油三酯等干扰物浓度达到10g/L、600mg/L、57g/L时对检测结果无显著性影响,42份异常血样用自制试剂盒与进口DadeBehring试剂盒同时检测,其相关系数为0.985;补体C4试剂盒的测定范围为0.096~0.435g/L,灵敏度为0.0014g/L,批内批间的精密度分别为1.8%~2.2%,3.8%~5.2%。样本中的游离血红蛋白、胆红素、甘油三酯等干扰物浓度达到10g/L、600mg/L、24g/L时对检测结果无显著性影响,42份异常血样用本试剂盒与进口Dade Behring试剂盒同时检测,其相关系数为0.991。结论补体C3、C4散射比浊试剂盒各项指标均达到临床检测要求,与Dade Behring同类试剂测定结果有较好的相关性,在临床上有极大的应用前景,有望替代国外同类产品试剂盒。 杨洁霞 董志宁 吴英松 李明关键词:补体C3 补体C4 HBV多表位复合基因在NS-1细胞的表达 2003年 目的 研究HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS - 1内的表达。方法 PCR扩增HBc 1~ 72aa及 93~ 1 83aa编码序列并合成HBV多表位复合基因 ,定向克隆至pcDNA3 .1 (+)。经双酶切及核苷酸序列测定等方法筛选阳性克隆。阳性质粒以Lipofectamine介导转染NS - 1细胞 ,通过ELISA及间接免疫荧光等方法检测细胞表达产物。结果 双酶切及测序结果证实阳性质粒正确克隆了约 890bp的HBc与HBV多表位复合基因的杂合基因。重组子成功转染NS - 1细胞并表达HBc-Mep融合蛋白。 结论 HBc颗粒为呈现载体的HBV多表位复合基因在哺乳动物细胞NS - 1内正确表达目的蛋白。为研究pHBc -Mep作为DNA疫苗的免疫活性奠定基础。 田泽维 董文其 王萍 吴英松 李林海 李明 黄建生关键词:HBV HBC 细胞转染 CELL 疟原虫乳酸脱氢酶的研究进展 2001年 吴英松 李英杰 李明关键词:疟原虫 乳酸脱氢酶 分子生物学 免疫特性 DA8600测序平台对EGFR基因检测最低DNA用量的探讨 被引量:1 2017年 目的基于DA8600测序平台,探讨Ampli Seq建库方法检测EGFR基因突变所需最低样本DNA用量,以评估下一代测序(next generation sequencing,NGS)检测技术的性能。方法本研究选择10例EGFR突变的石蜡包埋组织样本,分别取1 ng、5 ng、10 ng、20 ng样本DNA进行文库构建,使用DA8600半导体测序仪进行检测,并比较检测结果。结果 10 ng和20 ng DNA用量均可全部准确检出EGFR基因突变;5 ng DNA用量准确检出7例EGFR基因突变,1例文库质量不合格无法进行测序,1例无法检出EGFR突变,1例测序数据量不足检测失败;1 ng DNA用量构建文库全部质量不合格,无法进行测序。结论通过对10例样本不同DNA用量构建文库的检测结果分析,说明10 ng DNA即可采用Ampli Seq建库方法在DA8600半导体测序仪进行EGFR基因突变检测。 曹治家 张家彬 李翠云 吴英松关键词:EGFR基因突变 抗人双特异性蛋白磷酸化酶18单克隆抗体的制备及鉴定 被引量:1 2009年 目的制备高亲和力、高特异性的抗人双特异性磷酸化酶18(Dusp18)单克隆抗体,并对其生物学特性进行鉴定,为Dusp18功能的研究奠定基础。方法重组Dusp18免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合,经筛选建立可稳定分泌抗Dusp18的单抗细胞株,制备腹腔积液,ProteinG纯化所得腹腔积液,ELISA及Westernblotting检测抗体的效价和亲和力,用亚型鉴定试纸条鉴定单克隆抗体的亚型。应用免疫组织化学检测Dusp18在肝癌组织中的表达情况。结果获得两株(F003和F004)单抗,上清效价分别为1:5120和1:10240,腹腔积液效价分别为1:25600和1:51200,Westernblotting结果均在预期位置出现阳性条带。利用两株抗体均可在肝癌组织中检测到Dusp18的表达。两株抗体亚型均为IgG1型,轻链均为k型。结论成功制备能特异性识别Dusp18的单克隆抗体,为进一步研究Dusp1的生物学功能,揭示其与肿瘤发生、发展之间的关系奠定了基础。 杜红延 姚小艳 杨学习 吴英松 徐伟文 李明关键词:抗体 单克隆