姚忻
- 作品数：14 被引量：31H指数：4
- 供职机构：复旦大学上海医学院更多>>
- 发文基金：美国中华医学基金艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治专项国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 乙肝病毒多聚酶调节复制新位点的发现
- 闻玉梅林旭马张妹丁建平袁正宏王勇翔何丽芳姚忻
- 该课题由国家自然科学基金委及上海市科委资助。乙肝病毒的复制与病毒的致病性密切相关。病毒复制本身虽不致损伤机体，但高滴度的病毒及其表达的抗原可激发机体损伤性免疫应答。乙肝病毒的复制酶是决定病毒复制的关键酶。1.该项目基于乙...
- 关键词：
- 关键词：乙肝病毒病毒复制DNA多聚酶
- 乙型肝炎病毒DNA转染细胞的一种内参标准:真核细胞报告基因SEAP被引量：7
- 1999年
- 目的建立用真核细胞报告基因ＳＥＡＰ转染人肝癌细胞系（Ｈｕｈ７、ＨｅｐＧ２）及鸡肝癌细胞系（ＬＭＨ）的表达系统，供研究ＨＢＶ基因功能应用。方法分别将带有分泌性碱性磷酸酶（ＳＥＡＰ）报告基因的ｐＢＣ１２／ＰＬ／ＳＥＡＰ及ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ转染Ｈｕｈ７、ＨｅｐＧ２及ＬＭＨ细胞，并用ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ质粒ＤＮＡ与Ｓ基因区变异体的克隆ＨＢＶＤＮＡ共转染ＨｅｐＧ２细胞。培养后收取细胞培养液，用ＥＬＩＳＡ法测定ＳＥＡＰ活性及ＨＢｓＡｇ。结果在三种细胞中ｐＢＣ１２／ＣＭＶ／ＳＥＡＰ均可表达，以７２小时表达的酶活性测定最为适宜；而ｐＢＣ１２／ＰＬ／ＳＥＡＰ表达仅处于低水平。以ＳＥＡＰ表达量作为内参对ＨＢｓＡｇ的表达量进行比较，发现Ｓ基因１２９Ｌ变异体表达ＨＢｓＡｇ量显著高于野毒株。结论ＳＥＡＰ作为内参具有快速简便，不需同位素及特殊仪器的优点，有较高的实用价值。
- 姚忻何建文袁正宏何丽芳
- 关键词：乙型肝炎病毒SEAP
- 聚乙二醇－灭活疫苗粘膜免疫剂
- 本发明属生物技术领域，涉及一种聚乙二醇－灭活疫苗粘膜免疫制剂。本发明采用药用级聚乙二醇，浓缩、纯化灭活病毒液及制备疫苗，利用聚乙二醇作为免疫佐剂对灭活疫苗蛋白修饰、连接，增强疫苗的稳定性和免疫原性，及局部粘膜免疫应答。经...
- 瞿涤闻玉梅姚忻
- 文献传递
- 克隆乙型肝炎病毒DNA在肝与肾细胞中复制与表达的研究
- 1999年
- 目的 对比研究在体外细胞培养系统中乙型肝炎病毒（ Ｈ Ｂ Ｖ） 在肝、肾细胞中的复制与表达。方法 用克隆 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ（ｐ１７７ 、ｐ３ ．８ Ⅱ、ｐ Ｃ Ｍ Ｖ３ ．９） 分别转染 Ｈｅｐ Ｇ２ 与２９３ 细胞系；ｐ１７７ 与ｐ３ ．８ Ⅱ还转染了原代人胚肾细胞。培养后收集转染细胞培养上清液，用 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 法检测 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 与 Ｈ Ｂｅ Ａｇ ；提取转染细胞的 Ｄ Ｎ Ａ 与 Ｒ Ｎ Ａ，进行 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 与 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹杂交检测细胞内 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 与 Ｈ Ｂ Ｖ Ｒ Ｎ Ａ。结果 转染 Ｈｅｐ Ｇ２ 细胞， Ｈ Ｂｓ Ａｇ 与 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 均有高水平表达； Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 与 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹杂交显示特异的 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 与 Ｈ Ｂ Ｖ Ｒ Ｎ Ａ 杂交信号。而转染２９３ 细胞后， Ｈ Ｂｓ Ａｇ 与 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 仅出现很低水平表达； Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 和 Ｎｏｒｔｈｅｒｎ 印迹杂交除ｐ Ｃ Ｍ Ｖ３ ．９ 转染细胞出现明显的 Ｈ Ｂ Ｖ 特异杂交信号外，其他为阴性或微弱阳性。转染原代人胚肾细胞均无 Ｈ Ｂｓ Ａｇ 与 Ｈ Ｂｅ Ａｇ 表达。结论 Ｈ Ｂ Ｖ Ｄ Ｎ Ａ 在肝细胞中可以复制与表达，在肾细胞中仅有低水平的病毒抗原表达而无复制，只?
- 张蕾青张德强姚忻马张妹何丽芳
- 关键词：乙型肝炎病毒抗原表达DNA克隆
- 乙型肝炎病毒S基因129Leu和145Arg变异株的抗原表达与DNA免疫研究被引量：8
- 1999年
- 目的研究我国发现的乙肝病毒Ｓ基因突变株（１２９Ｌｅｕ和１４５Ａｒｇ）表达ＨＢｓＡｇ及ＤＮＡ免疫的特性。方法用自乙肝疫苗免疫无保护婴儿血清中克隆的２株变异Ｓ基因（其中“ａ”决定簇突变，分别为ｎｔ５４０Ａ→Ｔ，ａａ１２９Ｇｌｎ→Ｌｅｕ和ｎｔ５８７Ｇ→Ａ，ａａ１４５Ｇｌｙ→Ａｒｇ）片段，置换已知核苷酸序列并可表达及复制的ＨＢＶ１．２个拷贝全基因野毒株重组质粒ｐ３．８Ⅱ的Ｓ基因。将重组质粒转染ＨｅｐＧ２细胞，用Ａｂｂｏｔ试剂和２４种单抗检测转染细胞培养上清中ＨＢｓＡｇ的结合力。用重组质粒ＤＮＡ肌肉免疫小鼠。结果１２９Ｌｅｕ变异株转染细胞上清对ＨＢｓＡｇ酶联免疫反应检测的吸光度（Ａ）值高于ｐ３．８Ⅱ野毒株，而１４５Ａｒｇ变异株的Ａ值低于ｐ３．８Ⅱ；用２４种单抗测定的总趋势为１２９Ｌｅｕ表达的ＨＢｓＡｇ的Ｓ／Ｃ值高于ｐ３．８Ⅱ，而１４５Ａｒｇ的结果则低于ｐ３．８Ⅱ。三者表达的ＨＢｅＡｇ水平相似。用ＤＮＡ免疫经１２９Ｌｅｕ诱生的抗－ＨＢｓ水平低于野毒株ｐ３．８Ⅱ，但略高于１４５Ａｒｇ。结论１２９Ｌｅｕ变异株表达的ＨＢｓＡｇ与ＨＢｓ多抗及单抗的结合力较野毒株明显增高，但１２９Ｌｅｕ变异株ＤＮＡ免疫诱生的抗－ＨＢｓ水平却低于?
- 何建文武力姚忻李河民闻玉梅
- 关键词：乙型肝炎病毒基因变异DNA免疫
- 抑制性IgG受体(FcγRIIB)的免疫调节作用及意义被引量：6
- 2009年
- FcγRIIB作为低亲和力IgG受体介导对多种免疫细胞功能的负反馈调节。它的两种主要分子异构体IIB1、IIB2分布于不同的细胞表面并发挥不同的抑制效应。FcγRIIB可以通过依赖和不依赖于其胞浆区ITIM结构域的方式抑制细胞的激活效应。FcγRIIB在与BCR交联后,抑制BCR与脂筏形成稳定结构,并阻止B细胞的免疫突触形成。FcγRIIB的表达失衡将导致自身免疫病、肿瘤和感染性疾病的发生发展。进一步研究阐明影响FcγRIIB受体表达或其信号传导机制的因素,将有助于人们找到治疗和控制这些疾病的新方法。
- 姚忻闻玉梅
- 关键词：FCΓRIIB免疫调节
- 乙型肝炎病毒致病相关基因的研究
- 闻玉梅何丽芳林旭武力姚忻马张妹刘芳何建文
- 本研究综合了乙肝病毒株的致病相关基因，为防治乙肝病毒持续感染提供了新的切入点。研究了乙肝病毒基因组结构与功能的全基因技术平台，并对HBV致病基因的研究分别从PreCS及P基因作了研究。从HBV全基因组研究了从乙肝病毒携带...
- 关键词：
- 抗原抗体复合物调控DC-T细胞及黏膜免疫应答的研究
- 抗体可被称为一种天然免疫佐剂,特异性抗体和抗原在合适比例下形成的免疫原性复合物,通过Fc段与免疫效应细胞的相互作用,可改变和增强抗原递呈细胞(APC)对抗原的摄取、加工和递呈,增强诱生的免疫应答反应,起到对抗原诱生免疫应...
- 姚忻
- 关键词：抗原抗体复合物黏膜免疫应答基因芯片技术HBV转基因
- 慢性乙型肝炎患者外周血中HBV特异性CD3^+T细胞的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 研究慢性乙型肝炎患者外周血中可作用于病毒感染靶细胞的特异性CD3+ T细胞比率。方法 筛选HLA A2 患者 :将MHC :Ig双体融合蛋白试剂 ,加入HBV核心蛋白 (C)、聚合酶蛋白 (P)及表面抗原蛋白 (S)中HLA A2 限制性合成肽 ,与患者CD3+ 细胞作用 ,采用双重荧光抗体染色 ,用FACS检测各患者的特异性T细胞比率 ,同时设立各种对照管。结果 2 3/ 5 4例 (42 .6 % )患者为HLA A2 。其中 15例经用HBVC、P、S肽染色后 ,5例患者的特异性CD3+ 阳性细胞比率高于对照管 ,4例患者有结合S肽的特异性CD3+ 细胞 ,其中 1例同时可结合P肽 ,1例仅与P肽结合。结论 慢性乙型肝炎患者外周血中与特异性肽结合的CD3+ T细胞比率较少。MHC :Ig双体融合蛋白技术使用方便 ,但非特异性染色率偏高。
- 张继明姚忻孙淑惠何丽芳翁心华闻玉梅
- 关键词：慢性乙型肝炎外周血
- 聚乙二醇－灭活疫苗粘膜免疫剂
- 本发明属生物技术领域，涉及一种聚乙二醇-灭活疫苗粘膜免疫制剂。本发明采用药用级聚乙二醇，浓缩、纯化灭活病毒液及制备疫苗，利用聚乙二醇作为免疫佐剂对灭活疫苗蛋白修饰、连接，增强疫苗的稳定性和免疫原性，及局部粘膜免疫应答。经...
- 瞿涤闻玉梅姚忻
- 文献传递
