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排序方式：

一含有两个开放阅读框架的cDNA片段的发现(英文): 2000年; 目的分离人知的 c DNAs。方法采用 RT- PCR自人的肝脏细胞分离到一约 1,2 0 0 bp的 c DNA片段 ,将其克隆测序。结果在这一 c DNA片段中包含了两个开放阅读框架。结论一个开放阅读框架代表与人疱疹病毒大衣壳蛋白同源的多肽 ,另一个代表与沙门氏菌外膜蛋白; 姜颖于永利; 关键词：DNA片段血管生成抑制开放阅读框架多肽

吉林双阳型梅花鹿sentrin/SUMO的发现被引量：3: 2002年; 为了确定梅花鹿未知的编码区cDNA ,我们利用TaKaRa公司的cDNA合成试剂盒及PCRcDNA文库试剂盒 ,构建了吉林双阳型梅花鹿子宫PCRcDNA文库。将文库的PCR产物克隆入 pGEM -Teasy载体并进行测序后 ,应用BLAST网络服务对测得的序列在GenBank数据库中进行同源性比较。结果显示构建的PCRcDNA文库中包含有不同长度的cDNA片段 ,而且自该文库中我们发现了一与人sentrin - 1/SUMO - 1(smallubiquitin -relatedmodifier 1)高度同源的全编码区cDNA序列。此序列已在Genbank登录 ,登录号为AF 2 42 5 2 6。这说明我们自梅花鹿子宫PCRcDNA文库中发现了梅花鹿的sentrin/SUMO基因。; 孙陆果姜颖于永利; 关键词：梅花鹿 CDNA文库基因

TA克隆载体的再生被引量：5: 2000年; 目的 :再生 TA克隆载体。方法 :将环化质粒以限制性内切酶消化成线性后 ,以 Klenow大片段将末端补平 ,再用 Taq DNA聚合酶在线性载体的两个 5′末端各加上一个非配对的 T。结果 :构建成 TA克隆载体。结论 :TA载体的再生将使克隆 PCR产物更加方便、价廉。; 姜颖杨煜于永利; 关键词：PCR

人内皮抑制素在酵母细胞中的表达及其促成纤维细胞有丝分裂活性被引量：6: 2000年; 利用酵母真核细胞表达系统表达出重组人内皮抑制素 (Endostatin) ,并对其促成纤维细胞有丝分裂活性进行研究。方法 :采用逆转录 PCR技术自人肝组织获得人内皮抑制素的cDNA ,将其克隆入真核表达载体pYEX4T 1,构建含人Endostatin的重组质粒 (pYEXEndo) ;经全自动序列分析仪测序确证后 ,将此重组质粒转化入酵母细胞 (DY15 0 )中进行诱导表达 ,表达产物经SDS PAGE分析及Westernblot鉴定。以MTT掺入法初步检测了重组人内皮抑制素对NIH3T3细胞的促有丝分裂活性。结果 :经CuSO4诱导的含pYEXEndo的酵母细胞表达出重组人GST Endostatin的融合蛋白 ,此蛋白在凝胶上表现为一约 45kD的阳性区带 ,在Westernblot实验中可被GST特异性多克隆抗体识别。重组人GST Endostatin融合蛋白的粗提物在体外能刺激NIH3T3细胞增殖。结论 :人GST Endostatin的融合蛋白在酵母表达系统中高水平表达 ,并具有刺激成纤维细胞生长的生物学活性。; 孙陆果姜颖于永利; 关键词：内皮抑制素有丝分裂成纤维细胞酵母细胞

神经细胞粘附分子样蛋白及过氧化物酶体激活物受体δ样蛋白基因的发现被引量：1: 2001年; 目的　钓取人血管抑制素的cDNA。方法　以RT PCR的方法从人胎肝中钓取cDNA片段 ,克隆并部分测序。测得的序列在GenBank及Swissprot中进行分析。结果　发现 2个完整的开放阅读框架 ,其编码的多肽一个与人神经细胞粘附分子高度同源 ,另一个与大鼠过氧化物酶体激活物受体δ同源。已在GenBank登录 ,登录号分别为BankIt32 35 6 9AF2 415 39,BankIt32 42 73AF2 42 5 2 7。结论　发现了分别编码神经细胞粘附分子样蛋白及过氧化物酶体激活物受体δ样蛋白的基因。; 姜颖于永利; 关键词：蛋白基因

重组人aFGF的克隆、表达及活性测定被引量：2: 2001年; 目的:为了研究酸性成纤维细胞生长因子(aFGF)的临床应用价值,将其开发为多肽类药物.方法:以RT-PCR从人肺成纤维细胞钓取人aFGF全编码区cDNA,使用Pichia分泌型酵母表达系统表达重组人aFGF,重组蛋白经肝素亲和层析纯化后,以NIH3T3成纤维细胞增殖实验、鸡胚尿囊膜法血管生成实验及小鼠创伤愈合实验检测活性.结果:重组人aFGF蛋白在酵母系统中得到较高量表达(12 mg/L),并能够促进NIH3T3增殖、促进血管增生、促进伤口愈合,而且这种活性能被受体(FGFR)细胞外段拮抗.结论:重组人aFGF在酵母系统中实现高效表达,并具有很好的生物学活性.; 姜颖孙陆果于永利; 关键词：酸性成纤维细胞生长因子克隆

重组人血管抑素的克隆、表达及活性测定被引量：4: 2000年; 目的 :研究血管抑素 (angiostatin)的临床应用价值 ,将其开发为多肽类药物。方法 :以RT PCR从胎儿肝脏钓取人血管抑素全编码区cDNA ,使用Pichia分泌型酵母表达系统表达重组人血管抑素 ,重组蛋白经肝素亲和层析纯化后 ,以鸡胚尿囊膜法血管生成实验及小鼠创伤愈合实验检测活性。结果 :重组人血管抑素在酵母系统中得到较高量表达 (5mg/L) ,经肝素亲和层析纯化 ,SDS PAGE显示分子量为 43kD。活性实验表明 ,重组蛋白能够抑制新生血管形成、抑制伤口愈合。结论 :重组人血管抑素在酵母系统中实现高效表达 ,并具有很好的生物学活性。; 姜颖孙陆果于永利; 关键词：活性多肽类药物克隆

吉林双阳梅花鹿肝脏PCRcDNA文库的构建和鹿补体C3 alpha链部分基因的钓取被引量：2: 2001年; 目的 :构建吉林双阳梅花鹿肝脏cDNA文库 ,建立梅花鹿基因数据库。方法 :提取吉林双阳梅花鹿肝细胞总RNA ,将其逆转录成双链cDNA ,采用TakaRa公司的cDNA合成试剂盒及PCR文库试剂盒 ,以通用引物经PCR法扩增 ,建立PCRcDNA文库。以特异性引物从文库中钓取片段。结果 :构建的PCRcDNA文库中包含不同长度的cDNA片段 ,从此文库中钓取了梅花鹿的补体C3alpha链的部分cDNA ,在Genbank中的登录号为AF2 6 46 31。结论 :成功构建了吉林双阳梅花鹿肝脏PCRcDNA文库 ,发现了吉林双阳梅花鹿补体C3alpha链的部分基因。; 姜颖孙陆果于永利; 关键词：梅花鹿 CDNA文库补体C3 基因

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姜颖