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甲状腺功能减低孕鼠补充甲状腺素对子代脑组织同源盒基因Nkx2．1mRNA表达的影响被引量：4: 2010年; 目的通过对妊娠期甲状腺功能减低（甲低）大鼠补充左旋甲状腺素（L-thyroxine，L-T4），探讨甲状腺素对子代鼠脑组织同源盒基因Nkx2．1 mRNA表达影响，探讨该基因的表达与甲状腺素水平之间的关系。方法Wistar雌性大鼠120只，按体重分层随机分为对照组、甲低非治疗组，甲低孕鼠妊娠早期（妊娠第1—17天）补充L—T4高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期（妊娠第18天至分娩后第20天）补充L．T4高、中、低剂量组，共8组，每组15只；补充L—T4高、中、低剂量分别为：3．5、2．0,0．5μg/100g体重。各组均给予低碘饮食，对照组饮用碘浓度为200μg／L碘酸钾溶液，其余7组饮用去离子水。3个月后各组均与正常雄性大鼠交配，确定受孕后各甲低给药组于不同时期给予补充L-T4。各组分别取孕第17天胎鼠、新生及出生后第20天龄仔鼠前脑组织，实时荧光定量PCR（Real-time PCR）检测Nkx2．1mRNA水平。结果甲低孕鼠妊娠早期补充L-T4高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期补充L—T4高、中、低剂量组，甲低非治疗组、对照组大鼠血清TT3，分别为（0．85±0．17）、（0．81±0．18）、（0．86±0．21）、（0．85±0．20）、（0．89±0．18）、（0．85±0．20）、（0．86±0．20）、（1．08±0．07）nmol／L（F：4．08，P〈0．01）；TT4分别为（0．43±0．16）、（0．39±0．11）、（0．39±0．13）、（0．43±0．17）、（0．51±0．19）、（0．43±0．16）、（0．41±0．15）、（39．43±14．16）nmol／L（F=31．99，P〈0．01）；FT3分别为（3．29±0．61）、（3．29±0．61）、（3．24±0．61）、（3．28±0．63）、（3．31±0．59）、（3．28±0．50）、（3．24±0．49）、（4．93±0．46）pmol／L（F：5．79，P〈0．01）；FT4分另0为（3．38±0．80）、（3．31±0．67）、（3．29±0．73）、（3．27±0．71）、（3．48±0．81）、（3．56±0�; 李敬华张瑞汪蓓蕾娜仁李媛赵秀娟梁东春郭刚; 关键词：甲状腺功能减退症基因同源盒甲状腺素

双启动子shRNA真核表达载体的构建被引量：1: 2010年; 目的:构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。方法:通过PCR分别扩增带有BamHⅠ、EcoRⅠ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/E)和带有BglⅡ、HindⅢ酶切位点的人U6启动子序列(U6-B/H),用BamHⅠ与EcoRⅠ双酶切pcDNA3.1(+)与PCR产物U6-B/E后进行连接,重组质粒命名为psPRO。再用BglⅡ与HindⅢ双酶切psPRO与PCR产物U6-B/H后进行连接,构建含有双启动子的shRNA真核表达载体。结果:酶切鉴定以及DNA测序结果显示载体构建成功。结论:构建双启动子的shRNA真核表达载体,使其在细胞中表达2个不同的siRNA,不仅筛选方便,而且可以通过建立这种模式化工具载体,为今后RNA干扰实验研究的开展和深入提供手段。; 娜仁郭刚张瑞赵郁汪蓓蕾梁东春杨宇虹; 关键词：聚合酶链反应质粒

甲状腺素对甲状腺功能减低大鼠子代脑组织中同源盒基因Nkx6．1 mRNA表达的影响被引量：2: 2010年; 目的通过对妊娠期甲状腺功能减低（简称甲低）大鼠补充甲状腺素，探讨妊娠不同时间补充不同剂量甲状腺素对子代大鼠脑组织中同源盒基因Nkx6．1 mRNA表达的影响。方法1月龄Wistar大鼠240只，雌雄各半，体质量100—120g。按体质量将雌性大鼠随机分为8组：对照组，甲低组，甲低孕鼠妊娠早期（1～17d）补充甲状腺素（妊早甲低）高、中、低剂量组，甲低孕鼠妊娠晚期（18～20d）补充甲状腺素（妊晚甲低）高、中、低剂量组，每组15只。高、中、低剂量组每天补充的甲状腺素分别为3．5、2．0、0．5μg／100g体质量。8组大鼠均饲以重度缺碘地区粮食配制的饲料，对照组饮用含碘200μg／L的碘酸钾溶液，7个甲低组饮用去离子水。雄性大鼠用正常食料饲养，3个月后按1：1交配。8组大鼠分别取孕17d、新生、生后20d子代大鼠脑组织，采用实时荧光定量PCR法检测脑组织中Nkx6．1 mRNA表达。结果①成功建立了甲低动物模型，8组大鼠血清TT3、TT4、FT3、FT4组间比较差异有统计学意义（F值分别为4．08、31．99、5．79、26．34，P均〈0．01）。②在孕17d、新生、生后20d，Nkx6．1 mRNA表达组间比较差异有统计学意义（F值分别为758．720、1121．589、144．716，P均〈0．01）；组内不同时间比较差异有统计学意义（F值分别为2898．863、325．605、716．285、56．329、236．727、196．678、7115．752、9152．306，P均〈0．01）。③时间因素和剂量因素对Nkx6．1 mRNA表达有影响（F值分别为1176．655、246．530，P均〈0．01）；时间与剂量因素间存在交互作用（F=1249．934，P〈0．01）。④在孕17d、新生、生后20d，甲低组Nkx6．1 mRNA表达与对照组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。⑤在新生、生后20d，6个甲低补充甲状腺素组Nkx6．1 mRNA表达与甲低组比较，差异有统计学意义（P均〈0．01）。⑥在孕17d、; 娜仁张瑞汪蓓蕾李敬华李媛梁东春郭刚; 关键词：甲状腺功能减退症同源盒基因甲状腺素

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娜仁

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