孙脊峰
- 作品数：93 被引量：359H指数：10
- 供职机构：第四军医大学唐都医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学农业科学更多>>
- HRE/CMV启动子的克隆和缺氧调控活性的测定
- 2007年
- 目的:将具有缺氧调控作用的多种缺氧反应元件(HRE)与CMV启动子组合,以获得缺氧应答启动子。将荧光素酶报告基因置于缺氧应答启动子的下游,通过检测荧光素酶活性的方法,方便地研究缺氧应答启动子缺氧诱导的作用。方法:合成多种HRE核苷酸序列,并设立HRE突变对照,克隆入pCI-neo中,构建HRE/CMV启动子。扩增HRE/CMV序列,定向亚克隆入pGL3-Basic中,获得HRE/CMV荧光素酶报告载体。瞬时转染HeLa细胞,在0.1%O2环境下培养细胞,并设立正常氧分压环境对照。检测荧光素酶的相对活性。结果:成功构建了HRE/CMV荧光素酶报告载体,其中mPGK-HRE/CMV载体表现出很好的缺氧诱导作用和高水平的表达。结论:mPGK-HRE/CMV启动子能够有效地进行缺氧诱导和调控工作。
- 杨洁杜德伟李占亭贾林涛赵晶许彦鸣杨安钢孙脊峰
- 关键词：缺氧反应元件荧光素酶
- 血液透析患者残余肾功能的保护被引量：3
- 2015年
- 残余肾功能是影响透析患者生存率和生活质量的重要因素。在我国,血液透析是终末期肾病患者肾脏替代治疗的最主要方式,充分认识维持性血液透析患者残余肾功能的重要性,加强对其残余肾功能的保护,是肾脏病学家和患者共同关注的问题。本文对近年来关于残余肾功能对血液透析患者的临床意义、残余肾功能的保护措施等方面的研究进行论述,并重点对透析脱水调节和透析频率对残余肾功能影响的研究进行归纳总结,同时结合笔者临床经验阐述了血液透析容量控制与残余肾功能保护的关系,旨在加强临床医务工作者对保护血液透析患者残余肾功能的重视,并提供保护其残余肾功能的途径。
- 孙脊峰
- 关键词：血液透析残余肾功能
- 内科医师的继续教育
- 2002年
- 孙脊峰许昌泰
- 关键词：内科医师继续教育
- 系统性红斑狼疮致多脏器功能衰竭1例的护理
- 2003年
- 王莉杨洁孙脊峰李光荫王惠萍
- 关键词：系统性红斑狼疮多脏器功能衰竭护理
- HCV胞膜蛋白E2基因的融合表达、纯化及多克隆抗体制备
- 2005年
- 目的原核表达HCV胞膜蛋白E2,获得抗E2多克隆抗体。方法利用PCR方法从HCV基因组序列中扩增出831bp(384～661aa)的E2基因片段并按读框克隆到原核表达载体pET32a(+),IPTG诱导HCVE2蛋白表达,SDS-PAGE和WesternBlot法检测蛋白表达,Ni-NTA偶联的琼脂糖吸附柱纯化融合蛋白,薄层扫描及Bradford法检测纯化蛋白的纯度>90%;用表达的E2蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体,利用间接ELISA法检测抗体效价,WesternBlot法检测抗体特异性。结果用原核诱导表达出HCV胞膜蛋白E2免疫新西兰兔后获得多克隆抗体的效价在1∶1280以上,能特异性识别E2蛋白。结论成功构建HCVE2基因的原核表达载体,利用原核表达HCV胞膜蛋白E2制备的多克隆抗体能特异性识别E2蛋白。为进一步开展HCVE2蛋白功能和HCV受体的研究奠定了基础。
- 杜德伟孙脊峰杨洁贾战生秦鸿雁周永兴韩骅
- 关键词：肝炎病毒金属螯合亲和层析多克隆抗体
- 缺氧调控载体功能活性的研究被引量：1
- 2007年
- 目的构建具有缺氧调控活性的基因治疗载体,其表达可由缺氧选择性诱导,用于转导基因的可控性表达。方法合成各种缺氧应答基因的缺氧应答元件（HRE）寡核苷酸序列,与巨细胞病毒（CMV）启动子组合,驱动荧光素酶报告基因和治疗基因人红细胞生成素（hEPO）的转录。检测荧光素酶的活性和hEPO的表达以确定其缺氧转录活性。结果在各种缺氧调控载体中,由鼠磷酸甘油酸激酶（mPGK）的HRE与CMV启动子组合而成的缺氧应答启动子显示出高缺氧应答性,而且缺氧诱导的表达水平与完整的CMV启动子在常氧环境下的转录水平相近。结论3HRE/mPGK/CMV缺氧调控载体对于实现治疗基因的精确调控表达可能非常有用。
- 杨洁张翔陈锐杜德伟李占亭赵晶杨安钢孙脊峰
- 关键词：转录荧光素酶报告基因
- 蜂蛰伤11例临床分析被引量：17
- 2002年
- 目的 为了探讨多发性蜂蛰伤对患者脏器功能的影响 ,对我院 1990年～ 2 0 0 1年 11例蜂蛰伤住院患者进行了回顾分析 ,发现多发性蜂蛰伤易引多脏器功能损害 ,肾功能衰竭和血管内溶血是重要的致死原因。本文进一步探讨了蜂蛰伤肾脏损害和血管内溶血的发生机制、临床表现和救治原则。
- 张衍国王伯平徐澎孙脊峰高天文刘玉峰
- 关键词：蜂蛰伤急性肾功能衰竭血液透析血浆置换血管内溶血多器官衰竭
- 刚性管理与柔性管理在护生实习中的应用被引量：3
- 2010年
- 目的探讨适合护生实习的最佳管理模式。方法在护生实习管理中将刚性管理与柔性管理结合使用，在制度管理的基础上增加了激励机制和人文关怀，充分发挥管理的效能。结果护生综合素质明显提高，护生与教员的关系和谐，患者对护生的满意率明显提高。结论将刚性管理与柔性管理相结合应用于护理实习中，管理效果显著，值得临床推广。
- 王莉孙脊峰杜德伟李占亭史芸
- 关键词：刚性管理柔性管理护生
- 高效缺氧诱导表达载体的构建与鉴定
- 2008年
- 目的:构建缺氧诱导表达载体,以介导报告基因在缺氧环境下的特异、高效表达。方法:通过分子生物学方法,将鼠磷酸甘油酸激酶基因的缺氧应答元件(HRE)和最小CMV(mCMV)启动子重组,构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)或萤光素酶报告基因的可诱导载体;通过酶切鉴定和测序分析,证实载体获得正确的构建;将重组载体转染HeLa细胞,观察EGFP荧光强度并检测萤光素酶活性。结果:HRE/mCMV启动子调控的报告基因载体具有特异和高效的诱导活性。结论:构建了可以进行特异和高效缺氧诱导的报告基因载体,为其进一步的开发和应用奠定了实验基础。
- 张翔杨洁丁蓉陈锐杜德伟李占亭赵晶杨安钢孙脊峰
- 关键词：报告基因
- 前列腺素E1治疗糖尿病蛋白尿的临床分析及机制研究
- 糖尿病肾病是糖尿病最常见的慢性并发症之一,在发达国家需透析治疗的患者中4O%左右为糖尿病性肾衰,因此及早治疗糖尿病肾病可有效延缓或预防糖尿病性肾衰的发生。但目前对糖尿病性肾病还缺乏有效的治疗手段,本文通过观察前列腺素E(...
- 焦凯孙脊峰殷振杰
- 文献传递
