宋万杰
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 供职机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划浙江省重点科技创新团队项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 猪圆环病毒抗原快速检测试纸卡的制备
- 为了实现PCV2抗原的快速检测,本研究利用免疫胶体金技术,通过金标记抗猪PCV2的IgG,同时喷印猪IgG为检测线、猪PCV2-dCap蛋白为对照线,制备了一种检测PCV2抗原的试纸条。试纸条的检测灵敏度可达104TCI...
- 金玉兰宋万杰邱小伙邢刚周继勇
- 关键词：试纸条
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型Cap基因单核苷酸缺失突变体的构建与生物学特性被引量：4
- 2014年
- 猪2型圆环病毒(PCV2)是新出现的猪传染病—断乳仔猪多系统衰竭综合征病原.为了分析PCV2基因组核苷酸缺失突变对病毒复制的影响,以PCV2-HZ0201毒株基因组为模板,采用DpnⅠ定点突变技术,构建4个位于ORF2内的单核苷酸缺失突变体感染性克隆△1376PCV2,△1377PCV2,△1378PCV2和△1379PCV2.缺失突变体转染PK-15细胞后用间接免疫荧光检测病毒的拯救效果.结果显示,△1376PCV2感染性克隆能拯救出感染性病毒粒子,△1377PCV2,△1378PCV2和△1379PCV2感染性克隆不能拯救感染性病毒粒子,说明ORF2内1376位核苷酸的缺失不影响PCV2的复制.复制能力测定结果显示,△1376PCV2的复制能力比亲本病毒高10倍左右.促炎因子IL-6的转录本与血清浓度测定结果显示,△1376PCV2感染小鼠后的IL-6转录本与蛋白表达显著高于健康小鼠,且高于亲本病毒.这些数据首次揭示,ORF2内1376位核苷酸缺失的PCV2病毒粒子被提高了复制能力,同时促进了促炎因子IL-6的转录与表达.
- 金玉兰邢刚田朋飞吕朋宋万杰代丹周继勇
- 关键词：PCV2病毒拯救生物学特性
- 猪圆环病毒抗原快速检测试纸卡的制备
- 为了实现猪圆环病毒2型(PCV2)抗原的快速检测,本研究利用免疫胶体金技术,通过金标记抗猪PCV2的IgG,同时喷印猪IgG为检测线、猪PCV2-dCap蛋白为对照线,制备了一种检测PCV2抗原的试纸条。试纸条的检测灵敏...
- 金玉兰宋万杰邱小伙邢刚周继勇
- 关键词：猪圆环病毒2型抗原检测免疫胶体金技术试纸条
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型胶体金免疫层析方法的建立
- 猪圆环病毒(Porcine circovirus，PCV)属于圆环病毒科，单链、环状DNA病毒。包括无致病性的猪圆环病毒1型(PCV1)和具有致病性的猪圆环病毒2型(PCV2)。PCV2不仅可以引起断奶仔猪多系统衰竭综合...
- 宋万杰
- 关键词：猪圆环病毒2型胶体金免疫层析法参数优化
- 猪圆环病毒2型抗体胶体金免疫层析方法的建立被引量：7
- 2014年
- 为建立一种猪圆环病毒2型(PCV2)抗体检测方法,以胶体金标记PCV2dcap蛋白(PCV2dcap蛋白为cap蛋白去除N端信号肽的截短蛋白)包被检测线、PCV2dcap蛋白的单克隆抗体包被质控线。用制备的试纸条分别检测了PCV2、伪狂犬病病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、甲型流感病毒(H3N2)的标准阳性血清以及浙江省不同猪场的479份临床血清,并同瑞普(保定)生物药业有限公司生产的ELISA试剂盒的检测结果进行了比较;制备了5个不同批次试纸条,通过批内和批间差异试验数据来衡量试纸条的稳定性。结果显示,该试纸条仅同PCV2的阳性血清有反应性,同上述常见猪病病毒的阳性血清没有交叉反应性;该方法同ELISA的阳性符合率为99.57%,阴性符合率为100%,总符合率为99.58%;试纸条的批内变异系数小于2.50%,批间变异系数小于7.60%。结果表明,该方法可用于PCV2相关疾病的快速诊断、流行病学调查以及疫苗免疫效果的评估,对PCV2相关疾病的监测和预防具有重要意义。
- 宋万杰胡伯里金玉兰阮系真邵敬霞周继勇
- 关键词：猪圆环病毒2型胶体金免疫层析技术
